جداسازی و شناسایی مولکولی اکتینومیست های دریایی ساحل دیلم و بررسی اثر ضد میکروبی نانوذرات ساخته شده با استفاده از عصاره یکی از ایزوله ها

اکتینومیست ها باکتری های گرم مثبت و منابعی غنی از متابولیت های ثانویه با فعالیت های بیولوژیکی گسترده می باشند که می توان از متابولیت ها به عنوان ترکیبات دارویی استفاده کرد. رسوبات دریایی منابع بالقوه ای از اکتینومیست ها و متابولیت های ثانویه هستند. سنتززیستی نانوذرات به عنوان روشی به صرفه از لحاظ اقتصادی وسازگار با محیط زیست شناخته شده است. هدف از این تحقیق جداسازی و شناسایی اکتینومیست های جدید از رسوبات ساحلی بندر دیلم و بررسی تولید متابولیت های ثانویه در این ایزوله ها با استفاده از آنالیزهای بیوشیمیایی، فیلوژنتیکی و آزمون های ضد میکروبی می باشد. تکثیر ژن 16s rdna با استفاده از پرایمرهای f27 و r1492 طی فرایند pcr انجام شد. برای آنالیز توالی های تکثیر شده از نرم افزارژنتیکی chromas و برای رسم درخت فیلوژنی از mega6 استفاده شد. آزمون ضد میکروبی با استفاده از عصاره محیط کشت باکتری ها به دو روش انتشار دیسک و چاهک صورت گرفت. از هفت ایزوله مختلف جداسازی شده براساس توالی های 16s rdna شش ایزوله از جنس استرپتومایسس و یک ایزوله از جنس نوکاریا بودند. نتایج آنالیزهای افتراقی بدین شرح بود: همه ایزوله ها کاتالاز و گرم مثبت، تست mr همه ایزوله ها جز یک ایزوله منفی، به ترتیب دو و سه ایزوله سیمون سیترات و اورنیتین دکربوکسیلاز مثبت بودند. همه ایزوله ها لیزین دکربوکسیلاز، vp، tsi و ایندول منفی، نتایج آزمون sim نشان داد که همه ایزوله ها غیرمتحرک هستند، هیچ یک از ایزوله هاh2s تولید نمی کنند و برخی از ایزوله ها رنگیزه تولید می کنند. در بخش دیگر از این تحقیق فعالیت ضدباکتریایی علیه، bacilos cereus، echershia coli، kelbsilla sp.، proteus vulgaris، salmonella typhi و ضدقارچی علیه،aspergillus flavus ، aspergillus niger، microsporum gypseum،trichophyton mentagrophytes، candida albicans و penicillium sp. ارزیابی شد. نتایج حاصل نشان داد اکثر ایزوله ها علیه b.cereus و s. typhi موثر بوده و نسبت به p. volgaris و .kelbsilla sp، هیچ یک از ایزوله ها اثر مهار رشد نشان ندادند. از طرفی دیگر تمام ایزوله ها علیه قارچ های بیماری زای مورد استفاده اثر مهاری نشان دادند.ایزوله aha5 موثرترین ایزوله بود و بیشترین اثر مهاری علیه قارچ t. mentagrophytes (2/0±21)نشان داد. در بخش دوم از این تحقیق سنتز نانوذرات به روش سنتز سبز با استفاده از عصاره محیط کشت ایزوله aha2 صورت گرفت. در زمانیکه محلول نیترات نقره با عصاره محیط کشت ایزوله مورد نظر تیمار می شد احیای یون های نقره در دمای اتاق صورت می گرفت. آنالیز نانوذرات با استفاده از uv-visible و اسپکتروسکوپی با پتانسیل زتا صورت گرفت. ماکزیمم جذب نانوذرات سنتز شده در محدوده 450-420 مشاهده شد. این نانوذرات فعالیت ضدمیکروبی بالایی علیه باکتری ها و قارچ های بیماری زای مورد استفاده نشان دادند. برای بررسی مکانیسم های درگیر در فعالیت ضدمیکروبی و همچنین میزان سمیت نانوذرات سنتز شده مطالعات بیشتری لازم است. نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که ایزوله های اکتینومیست جدا شده از رسوبات ساحل دیلم می توانند به عنوان منبع بالقوه ای برای طراحی و تولید عوامل ضدمیکروبی مورد استفاده قرار گیرند.