: شناسایی، جداسازی و تعیین ویژگی برخی از ژن های ممانعت کننده احتمالی گلدهی از سیب(malus domestica) و بررسی بیان آن ها به روش rt-pcr و real -time pcr

چکیده: سیب با نام علمی malus × domestica brokh. یکی از رایج ترین میوه کشت شده در مناطق معتدله می باشد که طول دوره نونهالی آن بر حسب رقم 5 تا 12 سال می باشد. اصلاح صفت طول دوره نونهالی دانهال-های سیب در درجه اول اهمیت قرار دارد، چرا که این صفت باعث افزایش زمان و هزینه لازم برای اصلاح ژنوتیپ های مختلف سیب می شود. کوتاه کردن دوره نونهالی درختان میوه می تواند از طریق مهندسی ژنتیک با خاموش کردن یا کاهش تظاهر ژن های ممانعت کننده گلدهی عملی شود. در این راستا، در این تحقیق برخی ژن های احتمالی ممانعت کننده درگیر در مسیر گلدهی سیب از جمله همولوگ های atsef و attem شناسایی و الگوی بیان آن ها و نیز ژن های احتمالی پایین دست آنها (mdsoc1 و mdft) در بافت های مختلف بررسی شد. بررسی های بیوانفورماتیک مشخص کرد که mdsef1، mdsef2 و mdsef3 به عنوان همولوگ های atsef، در سیب به ترتیب 64%، 65% و 65% با atsef شباهت داشتند. بررسی همردیفیmdsef1 با توالی های دیگر نشان داد که pyrus × bretschneideri 92% شباهت دارد. blastp توالی اسید آمینه ای ژن tem آرابیدوپسیس با سیب 2 توالی بسیار مشابه mdtem1و mdtem2 را به ترتیب با شباهت 60% و 61% با attem ، نشان داد. نواحی رمزآور 776 جفت بازیmdsef1 و 1228 جفت بازی mdtem1 برای اولین بار جداسازی و همسانه سازی شد. بررسی نیمه کمی بیان ژن، وجود رونوشت mdsef1 وmdsef2 را در تمام بافت ها بجز ریشه ثابت کرد. بررسی بیان کمی نشان داد که بیان mdsef1 در برگ نونهال در مقایسه با سایر بافت ها بیشتر است. در حالیکه بیشترین میزان بیان mdsef2 در بافت میوه مشاهده شد. همچنین مشخص شد که بیان mdsoc1 در بافت برگ بیشترین مقدار است. بررسی نیمه کمی mdtem1 بیان آن را در تمام بافت ها نشان داد اما mdtem2 در بافت ریشه مشاهده نشد. بررسی کمی بیان mdtem1 نشان داد که در بافت برگ نونهال بیشترین مقدار را دارد. درحالیکه بیشترین بیان mdtem2 در ساقه بالغ بوده است. بررسی کمی بیان ژن های مورد مطالعه، همچنین، نشان داد که بیان ژن mdft در بافت میوه بیشترین مقدار را دارد در حالیکه در بافت های برگ بالغ و نونهال و ساقه نونهال بیان آن فوق العاده کم بوده است.