شناسایی گونه های استرپتومایسس (streptomyces) شمال کشور و اثر آنها در کنترل نماتود مرکبات (tylenchulus semipenetrans)

نماتود مرکبات (tylenchulus semipenetrans) از جمله نماتودهای مهم مرکبات است که به طور وسیعی در باغ¬های مرکبات دنیا و ایران گسترش داشته و باعث زوال تدریجی درختان و کاهش محصول می¬شود. هدف از این تحقیق، شناسایی تعدادی از جدایه¬های بومی استرپتومایسس جدا شده از خاک¬های مرکبات و بررسی فعالیت ضد نماتودی علیه نماتود مرکبات بود. به منظور بررسی تأثیر عوامل بیولوژیک بر مرگ و میر لاروها، در تابستان 1392 از خاک مرکبات دارای علایم به نماتود و به ظاهر سالم استان های گیلان، مازندران و گلستان نمونه برداری انجام شد. جداسازی باکتری استرپتومایسس در محیط نیمه انتخابی (cga) casein glycerin agar انجام شد. 46 جدایه باکتری استرپتومایسس برای بررسی کنترل لارو مرکبات در شرایط آزمایشگاهی جداسازی و خالص سازی گردید. جهت انجام آزمون بررسی اثر آنتاگونیستی، از نهال¬های یک ماهه راف لمون آلوده به نماتود مرکبات به مدت 3 ماه در شرایط گلخانه نگهداری شد و بعد از نمونه برداری خاک آلوده به آزمایشگاه منتقل و لاروها به روش سینی جداسازی شدند. آزمون در قالب طرح کاملاً تصادفی با 3 تکرار انجام شد. در مرگ و میر لاروها در مدت 4 روز ،13 جدایه قابلیت آنتاگونیستی نشان دادند. در بین این 13 جدایه، جدایه¬هایsp13-2 و sp8-3 به میزان 66/49 درصد و جدایه sp23-1 به میزان 33/49 درصد مرگ و میر لاروی بالاترین میزان فعالیت آنتاگونیستی را نشان دادند. شناسایی جدایه¬های تاثیرگذار استرپتومایسس با استفاده از ویژگی¬های ریخت¬شناسی، فیزیولوژی، بیوشیمیایی و مولکولی صورت گرفت. علاوه بر این، ناحیه 16srdna آن¬ها توالی¬یابی و محصول pcr ناحیه ریبوزوم 16srdna هشت جدایه sp8-3, sp23-1, sp15-1, sp13-2, sp4-1, sp8-2, sp8-1, sp16-5 به کشور کره جنوبی فرستاده شد. نتایج حاصل از توالی¬یابی به بانک ژن ارجاع شد و پس از blast کردن توالی در بانک ژن (سایت ncbi) ثبت شد.