نمایش باکتریائی فاکتورهای بیماریزای bapو فسفولیپاز d ازacinetobacter baumannii بر روی باکتری lactococcus lactis

پایان نامه
چکیده

به علت افزایش میزان مقاومت های آنتی بیوتیکی، acinetobacter baumannii یکی از مشکلات سلامت عمومی و تهدید بزرگی برای بیماران بستری در بیمارستان، رفت و آمد کنندگان به بخش مراقبت های ویژه نیروهای نظامی محسوب میشود. ممکن است واکسیناسیون این گروهای خطر وقوع و گسترش عفونت های مرتبط با آن را کاهش دهد. در مطالعه ی حا ضر امکان تحریک سیستم ایمنی خونی و سلولی توسط یکی از فاکتور های بیماریزای این باکتری بنام فسفولیپاز d توسط روشهای بیوانفورماتیکی مورد بررسی قرار گرفت. سپس بعد از تعیین فراوانی ژن pld در بین جدایه های بالینی جمع آوری شده از طریق pcr امکان استفاده از پروتئین نوترکیب pld بعنوان واکسن زیر واحدی در مدل موشی سنجیده شد. در عین حال پروتئین pld و پروتئین مرتبط با بیوفیلم (bap) بر روی باکتری lactococcus lactis نمایش داده شدند و کارائی این باکتریهای نوترکیب به عنوان واکسن خوراکی در مدل موشی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج بررسی های بیوانفورماتیکی پایداری دمائی نیمه عمر طولانی، عدم شباهت به پروتئینهای انسانی و موشی و باکتریهای فلور روده و غیر آلرژی زا بودن پروتئین pld را نشان داد. توالی های اپیتوپی تحریک کننده ی سیستم ایمنی خونی و سلولی نیز در این پرتئین شناسائی شدند. همچنین یک کاندیدای واکسن پپتیدی بر علیه این باکتری و چند باکتری دیگر بیماریزای انسانی معرفی شد. نتایج pcr وجود ژن pld را در همه ی جدایه ها نشان داد. کاندیدای واکسن زیر واحدی pld باعث تولید مقادیر قابل توجهی آنتی بادی بر علیه pld شد. موش های ایمن دریافت کننده ی دوز های کشنده ی108 ، 109و 1010 از باکتری a. baumannii 100% زنده ماندند. در گروه دریافت کننده ی 1011 این میزان به 80% تقلیل یافت. همه موش های غیر ایمن مردند. موش های غیر ایمن در یافت کننده ی 108 و 109باکتری 100% زنده ماندند. این میزان با دریافت 1010و 1011 باکتری یه 60% افت پیدا کرد. موش هایی که به صورت دهانی l. lactis نمایش دهنده ی pld یا bap دریافت کردند نیز افزایش میزان igg را نشان دادند. موش های ایمن شده با باکتری نمایش دهنده ی pld با دریافت 108 و 109باکتری 100% زنده ماندند. . این میزان با دریافت 1010و 1011 باکتری یه ترتیب 80% و 40% بود. موش های ایمن شده با باکتری نمایش دهنده ی bap با دریافت 108،109 و1010باکتری % 100 محافظت شدند. 80% محافظت حاصل استفاده از 1011 باکتری بود. همه موش های کنترل در عرض 24 بعد از چالش مردند. نتایج آزمایشگاهی نشان می دهد هم واکسن نوترکیب و هم واکسنهای خوراکی به طور معنی داری باعث تولید آنتی بادی و حفاظت موش ها از عفونت های حاصل از a. baumannii میشود

منابع مشابه

Lactococcus lactis as a live delivery vector

Mucosal surfaces of the body provide a universal entry portal for all known and emerging infectious pathogenic microbes. Therefore, it seems that special vaccination strategies are needed for vaccines that can hinder the entry capability of pathogenic microbes through the mucosal surfaces. Lactic acid bacteria are widely used in the food industry and are presently applied as delivery vehicles i...

متن کامل

Gene expression in Lactococcus lactis.

Lactic acid bacteria are of major economic importance, as they occupy a key position in the manufacture of fermented foods. A considerable body of research is currently being devoted to the development of lactic acid bacterial strains with improved characteristics, that may be used to make fermentations pass of more efficiently, or to make new applications possible. Therefore, and because the l...

متن کامل

Replacement recombination in Lactococcus lactis.

In the pUC18-derived integration plasmid pML336 there is a 5.3-kb chromosomal DNA fragment that carries the X-prolyl dipeptidyl aminopeptidase gene (pepXP). The gene was inactivated by the insertion of an erythromycin resistance determinant into its coding sequence. Covalently closed circular DNA of pML336 was used for the electrotransformation of Lactococcus lactis. In 2% of the erythromycin-r...

متن کامل

Cloning of EprA1 gene of Aeromonas hydrophila in Lactococcus lactis

Bacterial-based systems as live vectors for the delivery of heterologous antigens offer a number of advantages as vaccination strategies. Developments in genetic engineering have given Gram-positive lacticacid bacteria (LAB) the advantage of being used as a host expression system for antigen delivery to inducethe immune response. A fragment containing the full length of the “eprA1” ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023