بررسی ژن alta 1 در آلترناریا و جنس های آلرژی زا وابسته و ارزیابی نقش پروتئین حاصله از آن در بروز آسم و آلرژی در مبتلایان به اختلالات دستگاه تنفس تحتانی

بیش از 80 جنس قارچ های آلرژی زا تشخیص داده شده اند که از مهمترین آنها آلترناریا، کلادوسپوریوم، پنیسیلیوم، کوروولاریا، اولوکلادیوم و آسپرژیلوس می باشد. از مهمترین آلرژن های آلترناریا میتوان به alta1 اشاره کرد که توسط قارچ آلترناریا آلترناتا تولید میشود. هدف از این مطالعه بررسی ژن alt a 1 در آلترناریا و جنس های آلرژی زای وابسته و ارزیابی نقش پروتئین حاصل از فیلتر کشت در بروز آسم و آلرژی در مبتلایان به اختلالات دستگاه تنفس تحتانی می باشد. در این بررسی جداسازی alt a1 از سویه های استاندارد قارچی شامل آلترناریا آلترناتا و جنس های وابسته با استفاده از روش الکتروفورز سدیم دودسیل سولفات پلی آکریل آمید و ایمنوبلاتینگ انجام شد. همچنین ﺑـﻪ ﻣﻨﻈـﻮر ﺑﺮرﺳـﯽ و ﻣﻘﺎﯾـﺴﻪ ﻣﯿـﺰان mrna ژن alt a 1 در آ.آلترناتا و جنس های وابسته توسط روش real time pcr، ﭘﺲ از جداسازی میسلیوم های قارچی rna ﮐـﻞ اﺳـﺘﺨﺮاج و ﭘـﺲ از ﺳـﻨﺘﺰ cdna، ﺗﻐﯿﯿﺮات ﻣﯿﺰان ﺑﯿﺎن ژن ﻫﺎی ﻣﺬﮐﻮر اﻧﺪازه ﮔﯿﺮی ﺷﺪ. 202 بیمار مبتلا به آلرژی در محدوده سنی 18 تا 83 سال، آزمون پوستی به روش ایجاد خراش (prick test) نسبت به آلرژن استاندارد آلترناریا آلترناتا انجام شد. همچنین ارزیابی سرم بیماران ازنظر میزان ige اختصاصی نسبت به طیف وسیعی از آلرژنها توسط سیستم immunocap انجام شد نتایج تکنیک الکتروفورز سدیم دودسیل سولفات پلی آکریل آمید ژل و ایمنوبلاتینگ نشان داد که پروتئین alt a 1 درآ.آلترناتا، ا. بوتریوزوم و ا چارتاروم به شدت با سرم پلی کلونال خرگوش ضد alt a 1 واکنش نشان دادند، در حالی که گونه هایک. لوناتا. ک. کلادوسپوریوئیدس ،ا. نیگروم، پ. کرایزوژنوم و آ. فومیگاتوس اتصال به باند پروتئینی خاص ضدalt a 1 را نشان نداند. نتایج real time pcr نشان داد که بیشترین میزان سطح ژنalt a 1 درآلترناریا آلترناتا، اولوکلادیوم، استمفیلیوم و کورولاریا به ترتیب می باشند. از 202 بیمار آسمی مورد مطالعه 49 نفر (24/75 درصد) نسبت به آ.آلترناتا دارای آزمون پوستی مثبت نشان دادند. واکنش به سوسک، علفهای هرز، قارچ آ. آلترناتا و گربه به ترتیب 44، 32، 25 و 12 درصد بود. نتایج حاصل از ارزیابی ige اختصاصی ضد آ. آلترناتا نشان داد که در 25 درصد بیماران آسم و آلرژیک به عنوان قارچ قابل اهمیت مورد توجه می باشد. همچنین منابع آلرژن غیر قارچی نقش اصلی و عمده را در بروز و شیوع آسم در جمعیت مورد مطالعه نشان دادند. نتیجه آنکه، به دلیل واکنش متقاطع با گرده و عوامل زیست محیطی،گردهها منابع آلرژن اصلی در جمعیت افراد آتوپیک بودند و با توجه به قابل اهمیت بودن قارچ آلترناریا در بیماران مبتلا به آسم و آلرژیک لذا بررسی آلرژن های دیگر آ.آلترناتابه غیرازalt a 1 نیزدارای اهمیت ایمونولوژیک و بالینی می باشد.