سنجش کمی و نیمه کمی بیان ژن های epcam و c-myc در بیماران مبتلا به سرطان پستان توسط روش های real time pcr و pcr تمایزی

مولکول چسبنده سطح سلول های اپی تلیالی (epcam) که نوعی گلیکوپروتئین غشایی بوده و در اتصالات هموفیلیک وابسته به کلسیم نقش دارد و میلوسیتوماتوز (c-myc) که از اهداف پایین دستی epcam است از مهم ترین ژن هایی هستند که در سرطان پستان دچار افزایش بیان می گردند. در شرایط عادی پروتوآنکوژن epcam منجر به افزایش چسبندگی می گردد، ولی گاهی اوقات این گلیکوپروتئین در آدنوماتوز و سرطان های بافت اپی تلیالی دچار افزایش بیان می گردد که بر روی پیشرفت، درمان و تشخیص اکثر سرطان های آدنوکارسینوما موثر است. در سلول های طبیعی c-myc در تمایز، تنظیم انتقال g1 به s، تکثیر، تنظیم حالت احیای درون سلولی، حفاظت از تمامیت ژنومیک در چندین سطح مختلف، رگ زایی و در نهایت آپوپتوز نقش دارد. اما در طی سرطان، c-myc دچار افزایش بیان شده و رشد سلولی را به صورت مهار نشده ای افزایش می دهد. برطبق مطالعات انجام گرفته در30 تا 40% از سرطان های پستان بیان epcam افزایش یافته که بالاخص در تشخیص حائز اهمیت می باشد. هم چنین در 22 تا 35% از سرطان های پستان بیان افزایش یافته ی c-myc مشاهده شده است. به منظور بررسی وضعیت بیان epcam و c-myc از روش های متنوعی از جمله fish، pcr تمایزی و real time pcr استفاده می شود، روش مناسب باید سریع، آسان، حساس، دقیق، تکرار پذیر و ارزان باشد. هدف از این مطالعه، بررسی وضعیت بیان ژن epcam و c-myc در بافت های سرطان پستان بدخیم توسط روش real time pcr و مقایسه نتایج این روش با روش pcr تمایزی می باشد. ژن gapdh به عنوان ژن کنترل انتخاب گردید و سپس وضعیت بیان ژنepcam و c-myc به ترتیب در 24 و 23 نمونه بافت بدخیم، 6 نمونه بافت خوش خیم و 5 نمونه بافت طبیعی توسط real time pcr و pcr تمایزی بررسی شد. بیان افزاینده ژن epcam در 9 مورد از 24 نمونه ی بدخیم (37/5%) و 1 مورد از 6 نمونه ی خوش خیم (16/6%) و در ژن c-myc در 7 مورد از 23 نمونه ی بدخیم (30/4%) و 2 مورد از 6 نمونه ی خوش خیم (33/3%) بررسی شده توسط real time pcr مشاهده گردید. برای این نمونه ها در هر دو ژن pcr تمایزی نیز انجام گردید و میزان تطابق خام بین نتایج دو تست real time pcrو pcr تمایزی در هر دو ژن 70% و میزان توافق بین نتایج دو تست 37% مشاهده شد. همچنین برای اولین بار در این تحقیق مشاهده شد که در سرطان پستان بیان افزایش یافته ی ژن های epcam و c-myc در نمونه های یکسان با یکدیگر مرتبط می باشند .هم چنین بیان ژن های epcam وc-myc متعلق به نمونه های بدخیم با بیان ژن her2 در نمونه های یکسان مقایسه شد و ارتباط معنی داری از لحاظ آماری بین آن ها مشاهده نگردید.