بررسی بیان کموکاین هایcxcl8 ,ccl4 ,ccl3 توسط نوتروفیل ها در مواجهه با انگل لیشمانیا اینفانتوم

لیشمانیوز از بیماری های مشترک انسان و دام می باشد و به صورت ضایعات پوستی، احشایی و مخاطی- پوستی بروز می کنند. عامل بیماری تک یاخته ای به نام لیشمانیا است که بر حسب محیط زندگی خود به دو شکل تاژک دار و بی تاژک دیده می شود. ناقل انگل گونه های پشه خاکی جنس فلوبوتوموس و میزبان نهایی انگل شامل انسان، سگ سانان و جوندگان است. نوتروفیل ها اولین سلول هایی هستند که در محل تلقیح انگل حضور می یابند. این سلول ها در مواجهه با انگل لیشمانیا آن ها را فاگوسیتوز می کنند. مطالعات مختلف نشان می دهند نوتروفیل ها در اثر محرک های مختلف می توانند تعدادی کموکاین تولید کنند و این کموکاین ها می توانند نقش مهمی در فعال شدن یکی از پاسخ های th1 یا th2 داشته باشند. در این مطالعه کموکاین های cxcl8 ,ccl4, ccl3 تولید شده توسط نوتروفیل ها پس از روبرو شدن با انگل بررسی شد. از 30 فرد سالم خونگیری شد و نوتروفیل های خون محیطی با استفاده از 1077-histopaque، دکستران و سانتریفیوژ جدا شد. پس از انجام آزمون تعیین درصد زنده بودن و خلوص، سلول ها شمارش شد. سپس این سلول ها با اشکال پروماستیگوت انگل در فاز ایستا مجاور شد و در انکوباتور co2 به مدت یک ساعت انکوبه شد نوتروفیل های تحریک نشده به عنوان کنترل استفاده شدند. پس از استخراج rna با استفاده از کیت qiazol lysis reagent، rna توسط مجموعه آنزیمm -mulv و rnase inhibitor و random hexamer به cdnaتبدیل شد. از cdna برای انجام real time pcr استفاده شد. ژن های انتخاب شده ژن کموکاین های cxcl8 ,ccl4, ccl3بوده و از ?-actin هم به عنوان ژن رفرانس استفاده شد و سپس از فرمول –??ct2 تغییر بیان ژن ها بررسی شد. تغییری در بیان mrna ژن های3 ccl و ccl4 در میان نوتروفیل های تحریک نشده و تحریک شده با لیشمانیا مشاهده نشد. اما نوتروفیل ها بیان بالایی از cxcl8 بعد از مواجه با لیشمانیا نشان دادند