بررسی آنتی بادی های ضد h. pylori تولید شده در حیوان آژمایشگاهی برای اهداف کاربردی

پایان نامه
چکیده

چکیده بیش از نیمی از جمعیت جهان آلوده به h. pylori می باشند. طیف عوارض بالینی بیماری وسیع بوده و شامل التهاب معده مزمن، زخم معده و زخم دوازدهه و آدنوکارسینومای معده و لنفومای مرتبط با malt می باشد. عفونت h. pylori در بدن میزبان منجر به ایجاد پاسخ ایمنی خصوصاً پاسخ ایمنی هومورال در خون محیطی و تولید آنتی بادی ضد آنتی ژن های h. pylori می شود . عفونت h. pylori به وسیله روش های تشخیصی متنوعی که شامل روش های تهاجمی و غیر تهاجمی می باشد، شناسایی می شود. روش های غیرتهاجمی بر روش های تهاجمی از آن جهت که نیاز به انجام آندوسکپی و برداشتن بیوپسی ندارند، ارجحیت دارند. روش elisa و immunoblotting معمول ترین روش های غیرتهاجمی مبنی بر جستجوی آنتی بادی می باشند. هدف از پژوهش حاضر بررسی آنتی بادی های تولید شده بر ضد آنتی ژن های بارز موجود در غشای خارجی باکتری h. pylori و تعیین آنتی ژن های ایمونودامینانت و آنتی بادی های غالب موجود در سرم حیوان ایمونیزه می باشد. با استفاده از این آنتی بادی ها می توان آنتی ژن های اختصاصی این ارگانیسم را در نمونه های بیماران ردیابی و وجود عفونت h. pylori را تشخیص داد. .به این منظور ابتدا آنتی ژن های غشای خارجی h. pylori غیر محلول در سارکوزیل تخلیص شده و به خرگوش ماده سفید تزریق شد و سرم خرگوش ایمن شده پس از سه تزریق جداسازی و بررسی شد. به منظور تخلیص آنتی بادی اختصاصی ضد h. pylori سرم تحت کروماتوگرافی تمایلی قرار گرفت. سپس تیتر آنتی سرم به دست آمده توسط روش elisa به دست آمد و آنتی بادی monospecific تیتر شده با آنتی ژن های حاصل از سویه های مختلف با روش elisa و western blot مورد بررسی قرار گرفت. برای بررسی کاربردی این آنتی بادی ها با استفاده از روش تشخیصی capture elisa مدفوع بیماران مورد ارزیابی قرار گرفت. پاسخ ایمنی بالایی در مقابل چهار آنتی ژن پروتئینی غشای خارجی با وزن های 21 ، 25 ، 26, 34 کیلودالتونی مشترک در میان سویه های مختلف h. pyolri مشاهده شد. تیتر سرم قبل و بعد از خالص سازی با کروماتوگرافی به ترتیب 1/2000 و 1/1000 بود .پس از کروماتوگرافی هیچ واکنش با e. coli و s. aureusبه عنوان شاهد منفی مشاهده نشد. کاهش تیتر سرم بعد از کروماتوگرافی نسبت به تیتر سرم قبل از کروماتوگرافی نشان دهنده حذف آنتی بادی های واکنش دهنده با e. coli و s. aureus از سرم بود. از آنجایی که حضور آنتی بادی های مزبور نتایج مثبت کاذب را در روش elisa افزایش می دهند، حذف آنها به کاهش میزان مثبت کاذب انجامیده و میزان اختصاصیت تست را بالا می برد. آنتی بادی های به دست آمده در این پژوهش، شناساگر های خوبی برای h. pylori می باشند. کلید واژه: h. pylori ، الایزا ، ایمونوبلاتینگ ، کروماتوگرافی تمایلی

منابع مشابه

بررسی شیوع سرمی آنتی بادی های ضد بروسلا در شترهای ذبح شده در کشتارگاه سمنان، ایران

خلاصه بروسلوز یکی از بیماری های دامی است که توسط گونه های باکتری جنس بروسلا ایجاد شده و قابل انتقال به انسان می باشد. مطالعه حاضر به منظور تعیین شیوع سرمی این بیماری در شترهای ذبح شده در کشتارگاه شهر سمنان، طی یک دوره چهار ماهه در تابستان و اوایل پاییز سال 1393 انجام پذیرفت. جهت ردیابی عفونت بروسلوز در این حیوانات، آزمون های سرم شناسی شامل رزبنگال، رایت و 2-مرکاپتواتانول بر روی تعداد 150 نم...

متن کامل

تولید آنتی بادی تک زنجیره‌ای انسانی شده ضد مارکر CD20 در E.coli

Background and Objectives: Rituximab is an anti-CD20 chimeric monoclonal antibody widely used for the treatment of malignant B cells lymphoma. However, the immunogenicity of murine-derived monoclonal antibodies and the large size of full length antibodies restrict cancer immunotherapy. Humanized single chain antibodies can be a solution and a promising alternative for application in immunothera...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

سرواپیدمیولوژی آنتی بادی های ضد توکسوپلاسما در زنان مراجعه کننده برای مشاوره ازدواج

توکسوپلاسموز بیماری است که بوسیله توکسوپلاسما گوندی ایجاد می شود. به خاطر طیف وسیع آلودگی به خصوص آلودگی بدون علایم آن در زنان باردار که منجر به عفونت توکسوپلاسموز مادرزادی می گردد، تعیین عیار (تیتر) آنتی بادی های ضد توکسوپلاسما قبل از حاملگی و هم چنین مشخص نمودن عوامل موثر در بالا رفتن شیوع آن ضروری است. این مطالعه که از نوع توصیفی- مقطعی می باشد، به منظور تعیین شیوع آنتی بادی های IgG و IgM ضد...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023