کلونینگ و ساخت مولکول ag85b:fc?1 با ریکامبینیشن مولکول ag85b از باکتری مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با مولکولfc?1 از igg انسانی جهت طراحی واکسن و روش های نوین تشخیصی

پایان نامه
چکیده

مقدمه : توبرکلوزیس (tb) یکی از مشکلات اصلی سلامت عمومی در جهان است. در حال حاضر تنها واکسن موجود برای آن یک سویه ضعیف شده bcg است. ولی کارایی این واکسن مورد تردید قرار گرفته است. بنابراین واکسن های موثرتر علیه tb مورد نیاز هستند. در حال حاضر، اجزای کمپلکس آنتی ژن 85 میاکوباکتریوم توبرکلوزیس (ag85a, ag85b,ag85c) به دلیل ترشحی و ایمنودامیننت بودن از آنتی ژن ها پروداکتیو نوید بخش برای ساخت واکسن محسوب می شوند و در بسیار از ترکیبات واکسن به کار رفته اند. مواد و روشها: برای ساخت ag85b:fc?1، ناحیه کد کننده ag85b از ژنوم مایکوباکتریوم توبرکلوزیس سویه cdc1551 به روش pcr تکثیر شد. جایگاه های برش آنزیمی برای آنزیم های محدودکننده noti و xbai از طریق پرایمرها وارد شد. آنتی ژن 85b در یک وکتور ta کلونینگ کلون سد و در باکتری اشرشیاکولی سویه dh5? ترانسفورم گردید. آنتی ژن 85b خالص شد سپس به داخل وکتور بیانی (pdr2ef1) کلون گردید به نحوی که با ژن کد کننده قطعه fc از ایمنوگلوبولین g1 انسانی در یک قالب خواندنی قرار گیرد. فیوژن پروتیین حاصل در وکتور بیانی به داخل سلول های یوکاریوتی تخمدان همستر چینی (cell line cho) ترانسفکت شد و در نهایت تولید پایدار فیوژن پروتیین ag85b:fc?1، در سلول های cho مهندسی شده با روش ایمونوفلورسانس (ifa)تأیید گردید. نتایج : نتایج تعیین توالی نشان داد که ag85b:fc?1 فاقد هر گونه خطا و یا موتاسیونی است و دو بخش پروتیینی در یک قالب خواندنی ترجمه می شوند. قطعه پپتیدی لینکر ما بین دو بخش پروتیینی دارای جایگاه برش برای فاکتور xa و اسید فرمیک می باشد. این ویژگی این امکان را می دهد که خواص ایمونوژنیک آنتی ژن 85b به تنهایی و یا ag85b:fc?1 را بتوان بصورت in vivo و یا in vitro بررسی کرد. قطعه fc در فیوژن پروتیین ریکامبیننت همچنین موجب می شود تا آنتی ژن به صورت اختصاصی توسط سلولهای عرضه کننده آنتی ژن برداشت شوند. نتایج ifa نشان داد که فیوژن پروتیین ag85b:fc?1 به خوبی در سلول های یوکاریوتی بیان گردیده است. نتیجه گیری : در حال حاضر میتوان فیوژن پروتیین ساخته شده از مایع رویی سلول های یوکاریوتی را با استفاده از کروماتوگرافی افینیتی (hitrap recombinant protein a column (amersham uk) و ژل فیلتراسیون روی ستون hiload 60/16 superdex 200 size exclusio خالص کرده و در یک مدل موشی مبتلا به توبرکلوزیس، فعالیت و ویژگی های آنرا مورد بررسی قرار داد. قطعه fc?1 پروتیین از طریق رسپتورهای خود و بطور اختصاصی به سطح سلول های عرضه کننده آنتی ژن اتصاف می یابد. هدف اصلی از این مطالعه نیز بررسی اثر هدایت ایمونوژن به داخل سلول های عرضه کننده آنتی ژن از این طبق می باشد.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

The effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2

كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...

متن کامل

The Study of Stressful Factors in Clinical Education for Nursing Students Studying in Nursing and Midwifery College in Khorramabad

کچ هدي پ شي مز هني فده و : شزومآ لاب يني شخب ساسا ي شزومآ مهم و راتسرپ ي تسا . و هنوگ ره دوج لکشم ي شزومآ رد لاب يني ، آراک يي هدزاب و ا ني شزومآ زا شخب راچد ار لکشم م ي دنک . فده اب رضاح شهوژپ سررب ي لماوع سرتسا از ي شزومآ لاب يني رد وجشناد ناي راتسرپ ي هدکشناد راتسرپ ي و يامام ي ماـجنا داـبآ مرـخ تسا هتفرگ . شور و داوم راک : رضاح هعلاطم کي هعلاطم صوت يفي عطقم ي تسا . د...

متن کامل

مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure

کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...

متن کامل

طراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspX و tb 10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

هدف: سل از مهم‌ترین بیماری‌های عفونی و از شایع‌ترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه می‌باشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد می‌شود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن می‌باشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت  کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد. مواد ...

متن کامل

The study of relationship between the tension-making factors and mental health of Semnan nurses

هديكچ فده و هقباس : راتسرپ هفرح ي م رد سرتسارپ لغاشم ردص رد ي ب لغاشم نا تشاده ي نامرد و ي لـماوع و دراد رارـق سرتسا از ي لغش ي ددعتم ي ناور تملاس ي لغاش ي ا ن ي م رارق رطخ ضرعم رد ار هفرح ن ي دهد . فدـه اـب رـضاح شهوژپ سررب ي ت أ ث ي نت لماوع ر ي گد ي ناور تملاس رب از ي نانمس رهش ناراتسرپ دش ارجا . شور و داوم اه : رامآ هعماج ي زا دوب ترابع لك ي ر ناراتسرپ ه مس ي ب ي ناتسرام اه ي رهش هك ...

متن کامل

مقایسه مدل ژنتیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بیجینگ با سایر سویه‌های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با استفاده از روش MIRU-VNTR

زمینه: اخیراًٌ نشان داده شده است که سوش‌های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ژنوتایپ بیجینگ، رابطه مستقیمی با مقاومت دارویی دارند. بنابراین روشی ساده و سریع برای تشخیص و تمایز ایزوله‌های خانواده بیجینگ مورد نیاز می‌باشد. هدف از این مطالعه، ارزیابی قدرت تمایز لوکوس‌های مختلف دو روش 15 MIRU-VNTR و 12 MIRU-VNTR برای سویه-های بیجینگ و مقایسه آن با سایر سویه‎های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد. مواد و روش‌ها...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان خراسان رضوی - دانشکده علوم پایه

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023