تولید، تغلیظ و تعیین عیار ناقل ویروسی بر پایه murine leukemia virus

پایان نامه
  • وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه اصفهان - دانشکده علوم پایه
  • نویسنده فاطمه رادمنش
  • استاد راهنما ماندانا بهبهانی
  • تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
  • سال انتشار 1391
چکیده

ابزارهای گوناگونی به منظور انتقال ژن به سلول های یوکاریوتی توسعه یافته اند، در میان آن ها، کارایی ویروس های rna دار متعلق به خانواده رتروویریده به دلیل الحاق پایدار ژنوم خود در کروموزوم های میزبان بالاتر است. ویروس لوکمی موش (mlv) شناخته شده ترین عضو جنس اورتورتروویرینا از گامارتروویروس ها است. ناقل ویروسی بر پایه mlv تنها قادر به بیان ژن های خارجی در سلول های در حال تقسیم میتوز می باشد، که بیانگر مناسب بودن این ناقل به عنوان ابزار انتقال ژن در ژن درمانی سرطان است. دراین مطالعه، ناقل ویروسی بر پایه mlv در رده سلولی hek293t با روش ترانسفکشن همزمان و گذرا سه پلاسمید شامل pbabe-gfp (پلاسمید بیان کننده ژن گزارشگر gfp)، pbs-cmv-gagpol (پلاسمید حاوی ژن های gagpol) وpmd2g (پلاسمید بیان کننده ژن vsvg) و استفاده از کلسیم فسفات تولید شد. سلول های ترانسفکت شده از طریق تکنیک فلوسیتومتری بررسی شدند و نرخ بیان gfp، 94/50 درصد حاصل گردید. ناقل ویروسی تولید شده با دو روش اولتراسانتریفیوژ و محلول پلی اتیلن گلیکول غلیظ شد. رقت های سریالی از ویروس غلیظ شده تهیه گردید و عیار ویروس بر حسب واحد عفونی بر میلی لیتر (106 × 21 ذره عفونی در هر میلی لیتر) محاسبه شد. سپس، ترانسداکسیون دو رده سلولی vero و a549 با استفاده از ناقل تولید شده صورت گرفت و نرخ بیان gfp حدود 49 درصد برای هر دو رده سلولی بدست آمد.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تولید و تغلیظ ناقل ویروسی بر پایه mlv و مقایسه ترانسداکسیون رده های سلولی سرطانی و غیر سرطانی با ناقل تولید شده

ابزارهای گوناگونی به منظور انتقال ژن به سلول های یوکاریوتی توسعه یافته اند. در میان آن ها، کارایی ویروس های rna دار متعلق به خانواده رتروویریده در انتقال ژن به دلیل الحاق پایدار ژنوم خود در کروموزوم های میزبان بالاتر است. ویروس لوکمی موش (mlv) شناخته شده ترین عضو جنس اورتورتروویرینا از گامارتروویروس ها است. ناقل رتروویروسی بر پایه mlv تنها قادر به بیان ژن های خارجی در سلول های در حال تقسیم میتو...

متن کامل

Xenotropic Murine leukemia virus-related virus (XMRV) in Iranian HIV Patients

Background: Despite of isolation of Xenotropic murine leukaemia virus-related virus (XMRV) from the patients acquired prostate cancer in 2006 and patients with chronic fatigue syndrome in 2009, there have been controversial findings about its potential role in human diseases and frequencies in different population groups. In the present study, we aimed to determine the frequency of XMRV genome ...

متن کامل

Abelson Murine Leukemia Virus-transformed

Transformation of murine adult bone marrow cells by Abelson Murine Leukemia Virus (A-MuLV)' can result in the generation of permanent cell lines (Abelson lines) representing early stages of B lymphocyte differentiation (1) . Because it is difficult to obtain large numbers of B cell precursors capable of Ig gene recombination from normal cell populations, Abelson cell lines provide an accessible...

متن کامل

کاربرد ناقل های ویروسی گیاهی در بیوتکنولوژی

از حدود 40 سال پیش شاخه­ای از ویروس­ شناسی با هدف استفاده از ویروس­های گیاهی پایه­ گذاری شد و از ویروس­های گیاهی متعددی به عنوان ناقل­های بیانی استفاده شده است. استفاده از ویروس­های گیاهی برای بیان پروتئین نوترکیب، باعث افزایش سرعت تولید پروتئین، کاهش هزینه و هم­چنین افزایش راندمان تولید برای مصارف صنعتی و پزشکی و در برخی موارد برای افزایش کارائی واکسن­ها شده است. به این منظور لیگاندهای غیر پپ...

متن کامل

Murine leukemia: a virus-induced autoimmune disease?

Thymocytes from mice carrying Moloney murine leukemia virus since birth are cytotoxic for normal syngeneic fibroblasts; they are much less cytotoxic for the same cells infected with this virus. The cytotoxic thymocytes appear to increase in number with age of the carrier mice and are present both during preleukemic and leukemic periods. These results suggest that lymphomas in carrier mice resul...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه اصفهان - دانشکده علوم پایه

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023