بررسی عفونت متاپنوموویروسی در طیور گوشتی در اهواز با آزمایش rt-pcr

پایان نامه
چکیده

متاپنوموویروس پرندگان (ampv) عامل بیماری رینوتراکئیت در بوقلمون ها می باشد و می تواند منجر به عفونت دستگاه تنفسی فوقانی و سندرم تورم سر در ماکیان شود. مطالعات نشان داده است که عفونت به ampv باعث زیان های اقتصادی قابل توجه در صنعت طیور می گردد، بر این اساس، این مطالعه به منظور ردیابی آلودگی به ampv در گله های مرغ گوشتی در استان خوزستان به روش rt-pcr انجام شد. 50 گله مرغ گوشتی با استفاده از سواب های نایی در طی عملیات کشتار در کشتارگاه نمونه گیری شدند (به ازای هر 10000 مرغ از جمعیت هر گله، 10 نمونه گرفته شد). rna با استفاده از محلول rnx-plus tm (شرکت سیناژن)، به طور مستقیم از سواب ها استخراج شد. هر 10 سواب متعلق به یک گله در نهایت تبدیل به یک نمونه شدند. dna مکمل (cdna)، در طی مرحله rt با استفاده از اولیگونوکلئوتید random hexamer و آنزیم نسخه بردار معکوس m-mulv ساخته شد. تکنیک pcr بر اساس ژن n (nd/nx)، با استفاده از پرایمرهای جهانی که قادر به ردیابی تمام تحت تیپ های شناخته شده ampv بود، انجام شد. محصولات pcr با استفاده از الکتروفورز ژل و نمایان شدن در اثر رنگ آمیزی با اتیدیوم بروماید، مورد آنالیز قرار گرفتند. در نهایت، صحت نتایج مثبت با استفاده از semi-nested pcr اثبات شد. در پایان مطالعه، آلودگی به ampv در 28% نمونه ها (14 از 50) ردیابی شد و نتایج نشان داد که آلودگی به این ویروس در خوزستان وجود دارد. این یافته با تنها مطالعه قبلی در منطقه که آلودگی به ampv را با استفاده از الایزا اثبات کرده بود مطابقت دارد. اپیدمیولوژی آلودگی به ampv به طور وسیعی در ایران مورد مطالعه قرار نگرفته است که تا اندازه ای به دلیل به راحتی در دسترس نبودن کیت های الایزای تجاری ampv می باشد. امروزه، انجام آزمایشات تشخیصی مولکولی ، در بسیاری از آزمایشگاه ها معمول می باشد. ردیابی مولکولی برای تشخیص آلودگی های ampv و شناسایی تحت تیپ های آن در کشورهای مختلف دنیا مثل ایالات متحده آمریکا، ایتالیا، اردن و کره انجام شده است. بر اساس اطلاعات ما این مطالعه اولین گزارش از تشخیثص آلودگی به ampv با استفاده از تکنیک مولکولی (rt-pcr) در ایران می باشد، که می تواند به شناسایی تحت-تیپ(های) این ویروس در کشور و در نهایت، کنترل و پیشگیری دقیق آن منتهی شود.

منابع مشابه

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

مقایسه حساسیت دو روش RT-PCR و RRT-PCR برای تشخیص ویروس بیماری نیوکاسل در طیور

زمینه مطالعه: بیماری نیوکاسل یکی از مخرب ترین بیماریهای ویروسی طیور در سرتاسر جهان است. هدف: با توجه به اینکه روش‌های سنتی قابلیت محدودی در کنترل این بیماری دارند، انجام این مطالعه به منظور استفاده از تکنولوژی‌های نوین برای تشخیص به موقع بیماری جهت کاهش خسارت پیش روی صنعت طیور می‌باشد. روش کار: استخراج RNA با استفاده از کیت RNease mini و بر اساس دستورالعمل شرکت سازنده انجام شد. RNA استخراج شده ...

متن کامل

مقایسه RT-PCR ‌با جداسازی ویروس در تشخیص ویروسهای تحت تیپ 9H ‌آنفلوآنزای طیور

‌تعداد 22 نمونه بافتی از ‌ گله‌های طیور مبتلا به بیماری‌های تنفسی ارجاعی به آزمایشگاه ویروس شناسی بخش طیور دانشکده دامپزشکی طی سال‌های 85-1383 گرفته شده و به منظور جداسازی ویروس آنفلوانزا ی طیور بر طبق روش استاندارد به تخم‌مرغ‌های‌جنین‌دار 11-9 روزه تلقیح شدند. در آزمایش RT - PCR ‌روی نمونه‌ها قسمتی از ژن هماگلوتینین 9Hبا قطعه ای به طول bp435 با پرایمرهای اختصاصی تکثیر شد. نتایج نشان داد ک...

متن کامل

تشخیص سروتیپ ماساچوست ویروس برونشیت عفونی طیور با روش RT-PCR

‌چکیده بهینه RT-PCR به منظور تشخیص ویروس برونشیت عفونی طیور و تشخیص سروتیپ ماساچوست، دو آزمایش استفاده گردیده است. پس از استخراج 1S- سازی گردید. در این آزمایشات از دو جفت پرایمر اختصاصی از ژن از نمونه‌های بافتی طیور واکسینه شده و همچنین نمونه‌های بافتی کلینیکی از موارد مشکوک به برونشیت RNA عفونی، ابتدا وجود ژنوم ویروس و سپس سروتیپ ویروس در این نمونه‌ها تشخیص داده شد. با تعیین ردیف تکثیر...

متن کامل

تشخیص سروتیپ ماساچوست ویروس برونشیت عفونی طیور با روش RT-PCR

بهینه RT-PCR به منظور تشخیص ویروس برونشیت عفونی طیور و تشخیص سروتیپ ماساچوست ، دو آزمایش استفاده گردیده است . پس از استخراج 1S- سازی گردید . در این آزمایشات از دو جفت پرایمر اختصاصی از ژن از نمونه‌های بافتی طیور واکسینه شده و همچنین نمونه‌های بافتی کلینیکی از موارد مشکوک به برونشیت RNA عفونی ، ابتدا وجود ژنوم ویروس و سپس سروتیپ ویروس در این نمونه‌ها تشخیص داده شد . با تعیین ردیف تکثی...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023