تولید متابولیت ثانویه گروه تروپان در ریشه موئین القایی گیاه شاهبیزک(.atropa belladonna l) با استفاده از آگروباکتریوم ریزوژنز در شرایط بیوراکتور آزمایشگاهی

انسان با شناخت گیاهان دارویی مختلف به شفا بخشی و اثرات درمانی این گیاهان پی برد و به منظور پیشگیری و درمان بیماری از آنها استفاده کرد. با استفاده از پیشرفت های بیوتکنولوژی، تولیدات طبیعی گیاهان می-توانند منبع عظیمی از ترکیبات شیمیائی جدید با منشاء گیاهی را برای کاربردهای گوناگون فراهم کنند. کشت بافت گیاهان دارویی به عنوان یک راه حل مناسب جهت تولید متابولیت های ثانویه با ارزش معرفی شده است. اخیرا کشت ریشه های موئین به عنوان یک منبع پایدار برای تولید متابولیت ها پیشنهاد شده است. ریشه های مویین با استفاده از آگروباکتریوم رایزوژنز تولید می شوند. بزرگترین مزیت کشت ریشه های مویین این است که اغلب در مقایسه با گیاهان مادری، توان بالایی در تولید متابولیت های ثانویه دارند. بیوراکتورها شرایط مناسبی را برای تولید گیاه در ابعاد بزرگ برای تولید صنعتی ایجاد می کنند. بیوراکتور به عنوان مخزنی است که واکنش های بیولوژیکی و یا تغییرات بیولوژیکی در آن اتفاق می افتد گیاه شاهبیزک از گیاهان دارویی مهم و بومی ایران می باشد که به علت دارا بودن متابولیت های ثانویه با ارزش، مصرف دارویی زیادی برای درمان بسیاری از بیماری ها دارد. در این تحقیق جهت افزایش تولید متابولیت ثانویه اسکوپلامین ریشه های موئین القائ شده از باکتری آگروباکتریوم رایزوژنز استرین ar15834 در دستگاه بیوراکتور کشت گردید. جهت تأیید تراریختی ریشه های موئین تولید شده، آنالیزpcr با استفاده ازآغازگر اختصاصی ژن rolb انجام پذیرفت. نتیجه آنالیز pcr، وجود باندهای تشخیصی مربوط به تکثیر اختصاصی ژن rolb را با اندازه 780 جفت بازی نشان داد و بدین ترتیب تراریختی ریشه های مویین تأیید شد.در این بررسی انواع مختلف شرایط هوادهی و همزن در دستگاه بیوراکتور مورد بررسی قرار گرفت .نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که بیشترین تولید اسکوپلامین مربوط به دستگاه بیوراکتور با شرایط همزن vvm25/1 وrpm70بود.تولید اسکوپلامین تا میزان 59/1 میلی گرم درگرم وزن خشک افزایش یافت. میزان وزن خشک ریشه های کشت یافته در بیوراکتور با هوادهی vvm25/1 و همزدن rpm70 نسبت به دیگر تیمارها افزایش نشان داد که وزن خشک نهایی در این بیوراکتور 28/1 میلی گرم در گرم بود . همچنین در این بررسی میزان ضریب رسانایی و میزان مصرف ساکارز مورد بررسی قرار گرفت که نتایج حاصل نشان داد بیشترین میزان مصرف ساکارز و وبیشترین میزان افزایش مصرف املاح مربوط به دستگاه بیوراکتور با شرایط همزن vvm25/1 وrpm70بود. محیط کشت های مختلف از قبیل ms، ms2/1 و b5 بمنظور رشد بهتر ریشه های موئین بررسی شد و محیط کشت ms2/1 بعنوان محیط کشت مناسب برای رشد ریشه ها بخاطر تولید زی توده بیشتر انتخاب گردید.