مطالعه تنوع ژنتیکی ژرم پلاسم خاکشیر استان کرمان با استفاده از نشانگرهای مولکولی rapd و issr و بررسی میزان اسانس موجود درتوده های مذکور و تاثیر عصاره آن روی باکتری استرپتوکوکوس پیوژنز در مقایسه با آنتی بیوتیک های موجود

گیاه خاکشیر با نام علمی descurainia sophia به عنوان یک گیاه دارویی در ایران و جهان شناخته شده است.در این تحقیق با کمک نشانگرهای rapdوissr تنوع ژنتیکی ژرم پلاسم خاکشیر استان کرمان مورد ارزیابی قرارگرفت. بذرهای خاکشیر 15 رویشگاه از مناطق مختلف جمع آوری شدند.استخراج dnaاز بذر به کمک روش miniperp-ctab باکمی تغییر و افزایش در مراحل شست و شوی dna صورت گرفت. کمیت و کیفیت dnaاستخراج شده توسط دستگاه الکتروفورز و نانو دراپ اندازه گیری شد. از 20 نشانگر راپید به دلیل سرعت بالا و هزینه نسبتاً کم استفاده شد که تعداد 16نشانگر که باندهای واضح تر را در واکنش زنجیره ای پلی مراز(pcr)تولید کرده بودند به همراه 4نشانگر issrکه در آنها تفاوت باند کاملاً مشخص بود برای آنالیز مورد استفاده قرار گرفتند. از این تعداد آغازگر تعداد 146 قطعه چند شکل بدست آمد و امتیازدهی انجام شد. ماتریس صفر و یک به دست آمده با کمک نرم افزازpc ntsys- با استفاده از ضریب تشابه دایس به ماتریس فاصله تبدیل شده و سپس با استفاده ازالگوریتم میانگین فاصله(upgma) دندروگرام مربوطه رسم شد. باتوجه به نتایج حاصل، 15 منطقه انتخاب شده استان کرمان در 4 گروه مجزا قرار گرفتند. کلاستر ایجاد شده تا حدود زیادی با شرایط جغرافیای همخوانی داشت. نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که نشانگر های rapd و issr قدرت تمایز خوبی را به منظور تعیین تنوع ژنتیکی و روابط خویشاوندی این توده نشان داده است. در آزمایش بعدی تاثیر غلظتهای مختلف عصاره اتانولی بذر خاکشیر 4 منطقه از استان کرمان بر علیه باکتری استرپتوکوکوس پیوژنز عامل بیماری مخملک در شرایط آزمایشگاهی بررسی شد. بدین منظور دیسکهای آغشته به غلظتهای mg/ml 25، 50، 100 و 250 از عصاره اتانولی بذر خاکشیر جیرفت، باغین، رفسنجان و کوهبنان به روش خیساندن تهیه شد و با قراردادن آنها روی محیط کشت آگارخونی که باکتری استرپتوکوکوس پیوژنز در آن رشد یافته بود.اثر ممانعت کنندگی رشد این باکتری با عصاره خاکشیر در مقایسه با آنتی بیوتیکهای پنی سیلین، اریترومایسین و آموکسی سیلین در قالب طرح کاملاًتصادفی با 4 تکرار مورد ارزیابی قرارگرفت. با کمک نرم افزارsas تجزیه واریانس و آزمون دانکن در سطوح 05/0 و 01/ انجام شد و آزمون تعیین حداقل غلظت بازدارندگی رشد باکتری نیز انجام شد. نتایج نشان داد عصاره mg/ml250 جیرفت دارای بیشترین اثر ممانعت کنندگی رشد باکتری را داشت، کمترین اثر ممانعت کنندگی مربوط آنتی بیوتیک اریترومایسین بود. از بین 4عصاره مورد استفاده عصاره شهرستان جیرفت بیشترین تاثیر ممانعت کنندگی رشد باکتری راداشت اما با توجه به اینکه در غلظتهای mg/m 50، 100 و 250 همولیز کامل خون صورت گرفته نمی توان این غلظتها را برای تولید داروهای گیاهی تجویز کرد ولی غلظتmg/ml25 هیچ گونه همولیزی نشان نداد و بهترین غلظت در این تحقیق برای تولید داروهای گیاهی است و حداقل غلظت بازدارندگی رشد باکتری مربوط به غلظت mg/ml 25 بود. در ادامه این تحققیق میزان اسانس موجود در گیاه خاکشیر ده منطقه از استان کرمان مورد بررسی قرار گرفت در این آزمایش به منظوراسانسگیری از روش کلونجر یا تقطیر با آب استفاده شد. بیشترین میزان اسانس در بین نمونه های مورد آزمایش مربوط به شهرستان جیرفت و کمترین میزان اسانس مربوط به شهرستان سیرجان می باشد.