بررسی شایستگی توسعه ای اووسیت ها و زایگوت های انتخاب شده گوسفندی با استفاده از تست بریلیانت کرزیل بلو

هدف از مطالعه حاضر انتخاب اووسیت ها و زایگوت های توانا برای تکامل رویانی از طریق بکارگیری تست بریلیانت کرزیل بلو (bcb) است. ابتدا رنگ bcb در محیط dpbs تغییر یافته با 0.4% از bsa در سه غلضت 13، 26 و 39 میکرومول رقیق و برای انجام چهار آزمایش مورد نظر استفاده شد. در آزمایش اول رابطه بین غلضت های مختلف تست bcb و انتخاب اووسیت بررسی و در آزمایش دوم رابطه بین اندازه فولیکول و رشد اووسیت توسط تست bcb ارزیابی شد. در آزمایش های سوم و چهارم نیز توانایی تست bcb برای انتخاب اووسیت ها و زایگوت های توانا برای تکامل رویانی مورد ارزیابی قرار گرفت. بعد ار انجام تست bcb اووسیت ها به دو دسته (bcb+ & bcb-) و زایگوت ها به سه دسته (پر رنگ، متوسط و بی رنگ) بر اساس رنگ موجود در سیتوپلاسم آنها تقسیم شدند. در طی انجام آزمایشات تمامی روندهای کشت رویان شامل: بلوغ (ivm)، لقاح (ivf) و کشت آزمایشگاهی (ivc) طبق پروتوکل های معیار واحدهای ivf انجام شد به این ترتیب که مرحله بلوغ 24 ساعت، لقاح 24 ساعت و کشت 7 روز به طول انجامید. نتایج حاصل از آزمایشات اول و دوم نشان داد، درصد و قطر اووسیت های bcb+ در غلظت های مختلف تست bcb (13، 26 و 39 میکرومول) مشابه بوده و با افزایش اندازه فولیکول درصد اووسیت های bcb+ و قطر اووسیت ها افزایش می یابد. در آزمایش سوم مشخص شد اووسیت های bcb+ توانایی تکاملی بهتری (p<0.05) نسبت به اووسیت های bcb- و گروه کنترل (تست نشده) دارند. در آزمایش چهارم دیده شد زایگوت های دسته سوم (بی رنگ) کیفیت و تکامل رویانی بهتری (p<0.0001) نسبت به سایر گروه های تیماری دارند. نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که تست bcb به عنوان یک روش نوین جهت انتخاب اووست ها و زایگوت های گوشفندی با پتانسیل تکاملی بهتر کارایی دارد.