بررسی روش الایزا با استفاده از آنتی ژن p30 در تشخیص عفونت تحت بالینی ناشی از توکسوپلاسما گوندئی در گربه

عفونت ناشی از تک یاخته توکسوپلاسما گوندئی، از جمله شایع ترین عفونت ها در انسان و حیوانات خون گرم به شمار می رود. گربه سانان و مخصوصا گربه های اهلی مهم ترین مخزن این تک یاخته برای انسان و دیگر حیوانات به شمار می روند و مطالعه این عفونت در این حیوانات هم از نظر دامپزشکی و هم از لحاظ بهداشت عمومی حائز اهمیت است. تشخیص دقیق و به هنگام عفونت ناشی از تک یاخته مذکور، نقش عمده ای را در مطالعات مربوط به اپیدمیولوژی عفونت ایفا می کند. به این منظور، روش های تشخیصی متعددی جهت تشخیص این عفونت طراحی شده اند که از بین آن ها، روش الایزای مبتنی بر آنتی ژن خالص شده، به لحاظ سهولت، کمی بودن و امکان بررسی چندین نمونه به صورت همزمان، از اهمیت خاصی برخوردار است. هدف از انجام این مطالعه، بررسی ارزش تشخیصی روش الایزا با استفاده از آنتی ژنp30 درعفونت ناشی از توکسوپلاسما گوندئی، سویه rh در گربه های بدون علایم بالینی می باشد. به منظور انجام این بررسی، ابتدا، اقدام به تهیه هشت قلاده بچه گربه خانگی در سنین 3-1 ماه گردید. قبل از شروع آزمایش، اقدام به اخذ یک نمونه سرمی از گربه ها و بررسی نمونه های اخذ شده از لحاظ وجود تیتر پادتنی قابل ردیابی با استفاده از تست ایمنوفلورسانس غیر مستقیم با تیتر 1:16 شد. در صورت وجود تیتر قابل ردیابی ضد توکسوپلاسما گوندئی، گربه مربوطه، از مطالعه حذف می شد تا در نهایت تعداد هشت قلاده بچه گربه سرم منفی جهت بررسی، آماده شدند در مرحله بعدی اقدام به انجام واکسیناسیون گربه ها و درمان ضد انگل می گردید. گربه ها در طول بررسی از لحاظ وجود علایم بالینی مورد ارزیابی قرار گرفتند. از آن جا که بررسی در شرایط تحت بالینی صورت گرفت، تهیه رادیوگراف از قفسه سینه گربه ها انجام شد و از نظر درگیری ریه ها ( به عنوان اولین ارگان قابل ارزیابی رادیوگرافیک متعاقب عفونت بالینی) از نظر وجود عوارضی همچون alveolar pattern, interstitial pattern, pleural effusion مورد بررسی قرار گرفتند. گربه های مورد ارزیابی در ابتدا، فاقد هرگونه عوارض ریوی قابل تشخیص با رادیولوژی بودند. در مرحله بعدی، اقدام به تزریق تعداد 10000 تکی زوآیت استخراج شده از کشت سلول های vero به تعداد شش قلاده و فیلتر حاصل از کشت سلول بدون تکی زوآیت به دو قلاده از گربه ها ( گروه کنترل) گردید. نمونه های خون از دو روز بعد از تزریق، یک روز در میان اخذ شدند. نمونه های سرمی اخذ شده با تست الایزا مورد ارزیابی قرار گرفت و نتایج حاصل از آن با روش پادتن درخشان غیر مستقیم مقایسه گردید. نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که الایزای طراحی شده با استفاده از آنتی‍ژن خالص شده sage1 قابلیت ردیابی عفونت ناشی از توکسوپلاسماگندئی، سویه rh را حداقل از روز هشتم بیماری دارا می باشد. حساسیت محاسبه شده در مورد این روش، 100% و ویژگی آن 92% بود. بررسی ارزش تشخیصی الایزا با استفاده از روش roc نشان دهنده سطح زیر منحنی برابر با 987/0 بود که تست مذکور را تستی ارزشمند و دقیق در جهت تشخیص عفونت معرفی می کند. نقطه برش اندکس (cut off point) الایزا در حساسیت و ویژگی مذکور برابر 11/0 می باشد.