Optimization of multi-epitopic HIV-1 recombinant protein expression in prokaryote system and conjugation to mouse DEC-205 monoclonal antibody: implication for in-vivo targeted delivery of dendritic cells

نویسندگان

  • Ali Mostafaie Biotechnology Research Center, Kermanshah University, Kermanshah, Iran
  • Massoumeh Ebtekar Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran , Iran
  • Mehdi Mahdavi Department of Virology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
  • Roghayeh Rahimi Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran , Iran
چکیده مقاله:

Objective(s):Multi-epitopic protein vaccines and direction of vaccine delivery to dendritic cells (DCs) are promising approaches for enhancing immune responses against mutable pathogens. Escherichia coli is current host for expression of recombinant proteins, and it is important to optimize expression condition. The aim of this study was the optimization of multi-epitopic HIV-1 tat/pol/gag/env recombinant protein (HIVtop4) expression by E. coli and conjugation of purified protein to anti DEC-205 monoclonal antibody as candidate vaccine. Materials and Methods: In this study, expression was induced in BL21 (DE3) E. coli cells by optimization of induction condition, post induction incubation time, temperature and culture            medium formula. Some culture mediums were used for cell culture, and isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside was used for induction of expression. Protein was purified by Ni-NTA column chromatography and confirmed against anti-His antibody in western-blotting. To exploit DCs properties for immunization purposes, recombinant protein chemically coupled to αDEC-205 monoclonal antibody and confirmed against anti-His antibody in western-blotting. Results: The optimum condition for expression was 1 mM IPTG during 4 hr cultures in 2XYT medium, and final protein produced in soluble form. Conjugation of purified protein to αDEC-205 antibody resulted in smears of protein: antibodies conjugate in different molecular weights. [AGA1] . Conclusion: The best cultivation condition for production of HIVtop4 protein is induction by 1 mM IPTG during 4 hr in 2XYT medium. [AGA2] The final concentration of purified protein was 500 µg/ml.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

optimization of multi-epitopic hiv-1 recombinant protein expression in prokaryote system and conjugation to mouse dec-205 monoclonal antibody: implication for in-vivo targeted delivery of dendritic cells

objective(s):multi-epitopic protein vaccines and direction of vaccine delivery to dendritic cells (dcs) are promising approaches for enhancing immune responses against mutable pathogens. escherichia coli is current host for expression of recombinant proteins, and it is important to optimize expression condition. the aim of this study was the optimization of multi-epitopic hiv-1 tat/pol/gag/env ...

متن کامل

stability and attraction domains of traffic equilibria in day-to-day dynamical system formulation

در این پژوهش مسئله واگذاری ترافیک را از دید سیستم های دینامیکی فرمول بندی می کنیم.فرض کرده ایم که همه فاکتورهای وابسته در طول زمان ثابت باشند و تعادل کاربر را از طریق فرایند منظم روزبه روز پیگیری کنیم.دینامیک ترافیک توسط یک نگاشت بازگشتی نشان داده می شود که تکامل سیستم در طول زمان را نشان می دهد.پایداری تعادل و دامنه جذب را توسط مطالعه ویژگی های توپولوژیکی تکامل سیستم تجزیه و تحلیل می کنیم.پاید...

An anti-DEC-205 monoclonal antibody stimulates binding of thymocytes to rat thymic dendritic cells and promotes apoptosis of thymocytes

DEC-205, a transmembrane receptor responsible for cross-presentation of apoptotic cell-derived antigens, is expressed by cortical thymic epithelial cells (TEC) and thymic dendritic cells (TDC) in humans and mice, but its function in T-cell development is still unclear. In this work we have studied for the first time the expression of DEC-205 in the rat thymus by HD83 monoclonal antibody (mAb) a...

متن کامل

morphology, geochemistry, mineralogy, and micromorphology of soils of hormozgan province in relation to parent materials

ویژگی های زمین شیمیایی، کانی شناسی، و میکرومورفولوژیکی خاک ها و سنگ مادر مربوطه در منطقه بین بخش های جنوبی زاگرس و خلیج فارس تا دریای عمان(استان هرمزگان، ایران) مورد بررسی قرار گرفت. هدف های این مطالعه شناسایی تغییرات در خصوصیات فیزیکی، شیمیایی، و ترکیب کانی شناسی خاک، مطالعه میکرومورفولوژی و تکامل خاک، و بررسی توزیع عنصر خاک بر اساس هوازدگی، پروسه های خاک و زمین شناسی جهت توصیف اثرات مواد مادر...

15 صفحه اول

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 18  شماره 2

صفحات  145- 152

تاریخ انتشار 2015-02-01

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023