کلونینگ و بیان ژن hly Listeria monocytogenes در Lactococcus lactis
نویسندگان
چکیده مقاله:
ژن hly یکی از مهم‌ترین عوامل ویرولانس Listeria monocytogenes می‌باشد که پروتئین لیستریولیزین (O (LLO را رمزگذاری می‌کند. LLO یک پروتئین ایمونوژن با قابلیت بالاست، که قادر به برانگیختن ایمنی سلولی و هومورال است و علاوه بر فعالیت همولیتیک، عملکردهای متعدد دیگری نیز دارد. این پروتئین با تخریب فاگولیزوزوم به فرار باکتری از سیتوپلاسم، زنده ماندن و رشد درون سلولیL. monocytogenes کمک می کند.از طرفی Lactococcus lactis سویه ای از باکتریهای اسید لاکتیک می‌باشد که برای بیان پروتئین‌های نوترکیب کاربرد زیادی دارد. هدف ما در این تحقیق بیان آنتی ژن نوترکیب LLO در سویه L. lactis بود.که این کاردر ابتدا با واسطه پلاسمید pTG19-T (وکتور T/A کلونینگ) و سپس با استفاده از پلاسمید pNZ8110 که مربوط به سیستم پلاسمیدهای بیانی ترشحی مختص L. lactis می‌باشد، انجام گردید. ژن hly، با طراحی محل برش آنزیم‌های محدود‌کننده در دو سر ژن، وارد پلاسمید شده و پس از کلونینگ و تکثیر در E. coli MC1061 بعنوان میزبان واسط با روش الکتروپوریشن وارد L. lactis گردیده و در نهایت پروتئین LLO بیان گردید. بیان این پروتئین با استفاده از روش SDS PAGE و وسترن بلات تایید شد.
منابع مشابه
Efficacy of a Lactococcus lactis ΔpyrG vaccine delivery platform expressing chromosomally integrated hly from Listeria monocytogenes.
Listeria monocytogenes is a significant food-borne pathogen and the causative agent of listeriosis, a disease which manifests as meningitis in immunocompromised adults or infection of the fetus and miscarriage in pregnant women. We have previously used Lactococcus lactis, a GRAS (Generally Regarded As Safe) organism, as a vaccine vector against listeriosis by engineering plasmid-mediated expres...
متن کاملGene cloning and expression and secretion of Listeria monocytogenes bacteriophage-lytic enzymes in Lactococcus lactis.
Bacteriophage lysins (Ply), or endolysins, are phage-encoded cell wall lytic enzymes which are synthesized late during virus multiplication and mediate the release of progeny virions. Bacteriophages of the pathogen Listeria monocytogenes encode endolysin enzymes which specifically hydrolyze the cross-linking peptide bridges in Listeria peptidoglycan. Ply118 is a 30.8-kDa L-alanoyl-D-glutamate p...
متن کاملModeling of the competitive growth of Listeria monocytogenes and Lactococcus lactis in vegetable broth.
Current mathematical models used by food microbiologists do not address the issue of competitive growth in mixed cultures of bacteria. We developed a mathematical model which consists of a system of nonlinear differential equations describing the growth of competing bacterial cell cultures. In this model, bacterial cell growth is limited by the accumulation of protonated lactic acid and decreas...
متن کاملUse of Bacteriocin Producing Lactococcus lactis subsp. lactis LABW4 to Prevent Listeria monocytogenes Induced Spoilage of Meat
A bacteriocin producing strain of Lactococcus lactis subsp. lactis LABW4 was isolated from naturally fermented milk product which exhibited strong antibacterial activity against Listeria monocytogenes MTCC657, a food spoilage psychrophilic organism. Both cell free and heat killed supernatants of LABW4 were effective to produce zones of inhibition against L. monocytogenes in vitro. The antibacte...
متن کاملDIAGNOSIS of LISTERIA MONOCYTOGENES MENINGO - ENCEPHALITIS BY 1 REAL - TIME PCR ON hly
8 1 Département de Microbiologie, Hôpital Necker-Enfants Malades, Assistance Publique9 Hôpitaux de Paris, Université Paris Descartes, France 10 2 Centre National de Référence des Listeria, World Health Organization Collaborating Centre 11 for Foodborne Listeriosis, Institut Pasteur, Paris, France. 12 3 Actual Adress: Laboratoire de Microbiologie-Hygiène, Centre Hospitalier de Versailles, Le 13 ...
متن کاملA Computational Study of Amensalistic Control of Listeria monocytogenes by Lactococcus lactis under Nutrient Rich Conditions in a Chemostat Setting
We study a previously introduced mathematical model of amensalistic control of the foodborne pathogen Listeria monocytogenes by the generally regarded as safe lactic acid bacteria Lactococcus lactis in a chemostat setting under nutrient rich growth conditions. The control agent produces lactic acids and thus affects pH in the environment such that it becomes detrimental to the pathogen while it...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 31 شماره 4
صفحات 63- 72
تاریخ انتشار 2018-12-22
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023