تایپینگ سوش های مایکو باکتریوم توبر کلوزیس جدا شده در بیماران شهر تهران با استفاده از Spoligotyping

Normal 0 false false false EN-US X-NONE AR-SA /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Table Normal" mso-tstyle-rowband-size:0 mso-tstyle-colband-size:0 mso-style-noshow:yes mso-style-priority:99 mso-style-qformat:yes mso-style-parent:"" mso-padding-alt:0in 5.4pt 0in 5.4pt mso-para-margin-top:0in mso-para-margin-right:0in mso-para-margin-bottom:10.0pt mso-para-margin-left:0in line-height:115% mso-pagination:widow-orphan font-size:11.0pt font-family:"Calibri","sans-serif" mso-ascii-font-family:Calibri mso-ascii-theme-font:minor-latin mso-fareast-font-family:"Times New Roman" mso-fareast-theme-font:minor-fareast mso-hansi-font-family:Calibri mso-hansi-theme-font:minor-latin mso-bidi-font-family:Arial mso-bidi-theme-font:minor-bidi} سابقه و هدف: اسپولیگو تایپینگ روشی بر اساس پلی مورفیسم لوکوس کروموزی DR (توالی تکراری مستقیم) 36جفت بازی که به یک یا دو توالی فاصله اندازه 35-41 جفت بازی متصل است می باشد.94 توالی فاصله اندازه مختلف بین DR شناسایی شده که تنها 43 توالی فاصله انداز به صورت معمول مورد استفاده قرار می گیرد. بر اساس وجود یا فقدان این توالی ها می توان سوش های مایکو باکتریوم توبرکلوزیس را از هم متمایز کرد. هدف از انجام مطاله شناسایی تایپ های منتشر سوش مایکوباکترم توبرکلوزیس در شهر تهران می باشد. مواد و روش ها: کشت مثبت متعلق به 149 بیمار مبتلا به سل ریوی از نظر اسپولیگوتایپینگ مورد بررسی قرار گرفتند. جدا سازی اولیه سویه های مایکوباکتریوم با روش پتروف 4% و با استفاده از محیط Lowenstein Jensen انجام شد و برای شناسایی سویه ها از تست بیوشیمیایی افتراقی از قبیل: تست های نیاسین- فعالیت کاتالاز- احیاء نیترات استفاده شد. حساسیت دارویی در برابر ایزونیازید (0/2µg/m)، ریفامپین (40µg/ml). استرپتوماسیون (µg/m 10) و اتامبوتول (2µg/ml) به روش تناسبی انجام و سویه ها به سه گروه حساس، MDR و غیر MDR تقسیم بندی شده اند. سپس DNA از کلنی ها مثبت با روش کیت DNA technology استخراج گردید. قطعات مورد نظر با روش PCR تکثیر شده و پس از دناتوره کردن قطعه تکثیرشده هیبریداسیون با آنزیم استرپتاویدین پر اکسید از به روش line reverse blot انجام می گیرد. پس از اضافه کردن کمی لومینسانس و گذاشتن غشاء بر روی فیلم X-ray رادیولوژی می شود که به روش کیت Spoligotyping از شرکت هلندی انجام شد. یافته ها: سویه ها به 9 دسته (Beijing ,CAS1 ,CAS2 ,Haarlem ,U ,T2 ,T1 ,EAI3 ,EAI2 ,CAS2) متمایز شدند که بیشترین تعداد مربوط به سویه T-Haarlem (27٪) و کمترین تعداد مربوط به سویه (T2 (٪0/4 می باشد. همچنین با روش تایپینگ دو سویه متعلق به مایکوباکتریوم بویس نیز شناسایی شد.نتیجه گیری: این روش سریع ساده و دارای حساسیت بالا بود و در هربار انجام این روش تعداد 50 نمونه را می توان ازهم متمایز کرد.