OPTIMIZATION OF DIPHTHERIA TOXOID PRECIPITATION BY USING SATURATED AMMONIUM SULPHATE IN ORDER TO IMPROVE DIPHTHERIA VACCINE

Authors

  • اکرمی, میثم گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد تهران مرکزی، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
  • طباطبایی, میترا السادات گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد تهران مرکزی، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
  • نوفلی, مجتبی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، تحقیقات کشاورزی، سازمان آموزش و پژوهش و توسعه (AREEO) ،کرج، ایران
Abstract:

سابقه و هدف: کورینه باکتریوم دیفتریه باکتری هوازی و بی­هوازی اختیاری است. مهم­ترین گونه از خانواده کورینه ‌باکتریاها، عامل بیماری دیفتری است که به ­وسیله توکسین خود، بیماری دیفتری را ایجاد می­کند. آمونیم ­سولفات نمکی معدنی است که از آن برای ترسیب و خالص­سازی پروتئین ها استفاده می­شود که با افزایش مقدار نمک حلالیت پروتئینی کم شده و پروتئین ­ها به­ واسطه قطعه­ های هیدروفوب خود، به­هم پیوسته و رسوب می­کنند. واکسن دیفتری از طریق تخلیص و ترسیب توکسوئید باکتری دیفتری تهیه می­ شود که از جمله روش­های ترسیب، استفاده از آمونیوم ­سولفات به­صورت نمک خشک و یا تهیه محلول فوق اشباع از آن است. مواد و روش ­ها: کشت باکتری دیفتری در شرایط بهینه و مغذی سبب افزایش تولید توکسین توسط باکتری می­شود و بعد از غیرفعال­ سازی توکسین و تبدیل آن به توکسوئید در صنایع تولید واکسن مورد استفاده قرار می­گیرد. کلیه محیط­های کشت باید حداقل به­مدت 24 ساعت در حرارت 37-35 درجه سانتی­گراد انکوبه شوند. به ­منظور ترسیب توکسوئید باکتری از محلول فوق اشباع 32/4 مولار آمونیوم با درصدهای مختلف سولفات استفاده شد. نتایج به­دست آمده از این روش باSDS PAGE و (Lateral flow test) Lf TEST مورد بررسی قرار گرفت. یافته­ها: استفاده از آمونیوم­سولفات فوق اشباع32/4 مولار به­ جای استفاده از نمک خشک آمونیوم­سولفات که در روش سنتی (WHO TRS, No.980) که قبل در صنایع واکسن ­سازی مورد استفاده قرار می­گرفت، باعث حذف مرحله طولانی مدت دیالیز شده و از طرفی هدر رفت محصول نهایی (توکسوئید) را به ­صورت کامل محسوس کاهش داده و هم­چنین باعث حذف ناخالصی ­های ناخواسته از محصول نهایی شده و محصول نهایی خالص ­تر را در مقیاس بیش­تر در اختیار قرار داده است. نتیجه ­گیری: از آنجایی­که هدف در صنایع تولید واکسن، دست­یابی به مقدار حداکثری توکسوئید از این باکتری است لذا استفاده از آمونیوم­ سولفات فوق اشباع 32/4 مولار برای ترسیب توکسوئید دیفتری به­ جای استفاده از نمک خشک آمونیوم ­سولفات باعث کاهش هدر رفت محصول نهایی و حذف مرحله زمان بر و غیر اقتصادی دیالیز شده و از نظر اقتصادی نیز مقرون به صرفه­ تر خواهد بود.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

Preparation and in-vitro evaluation of sodium alginate microspheres containing diphtheria toxoid as new vaccine delivery

  During last two decades, polysaccharides such as alginate (Alg) alone and in combination with other biopolymers are widely used in vaccine and drug delivery systems. The aim of the present work was to investigate the potential utility of microparticles made of alginate (Alg) as new vehicles for improving nasal vaccine delivery. For this purpose, diphtheria toxoid (DT) was chosen as a model an...

full text

Preparation and Evaluation of Diphtheria Toxoid-Containing Microspheres

Preparation of chitosan (CS) microspheres as a novel drug delivery vehicle for intranasal immunization using high, medium and low CS molecular weight (MW) was investigated in this study. Diphtheria toxoid (DT) was used as a model antigen. The emulsion-solidification method was adopted for microencapsulation of DT.  In the first step, following the purification of semi-crude DT by the ion-exchan...

full text

Additional recommendations for use of tetanus toxoid, reduced-content diphtheria toxoid, and acellular pertussis vaccine (Tdap).

The American Academy of Pediatrics and the Centers for Disease Control and Prevention are amending previous recommendations and making additional recommendations for the use of tetanus toxoid, reduced-content diphtheria toxoid, and acellular pertussis vaccine (Tdap). Review of the results from clinical trials and other studies has revealed no excess reactogenicity when Tdap is given within a sh...

full text

Experience with diphtheria toxoid-tetanus toxoid-acellular pertussis vaccine in Japan.

In Japan, the morbidity rate for pertussis per 100,000 population was 147.6 in 1950 when whole cell pertussis vaccine was introduced but dropped to 0.2 in 1972 when routine immunization with a combined vaccine consisting of diphtheria toxoid, tetanus toxoid, and whole cell pertussis had been widely accepted. Thereafter, adverse reactions to the whole cell pertussis vaccine became a social probl...

full text

Guillain-Barré syndrome after tetanus toxoid, reduced diphtheria toxoid and acellular pertussis vaccine: a case report

INTRODUCTION The association of Guillain-Barré syndrome with vaccination has been described in the literature; it is infrequent and controversial. An association with swine influenza, influenza, hepatitis and tetanus vaccination has been documented in few case reports. CASE PRESENTATION A 40-year-old Caucasian man sustained a small right temporal epidural hematoma and nondisplaced right skull...

full text

The Purification and Concentration of Diphtheria Toxoid

By precipitation with acetone at 4 degrees C. a refined diphtheria toxoid was obtained as a dry powder, readily soluble in aqueous solutions. The powder itself appears to be stable. When dissolved in half the original volume of physiological salt solution, the toxoid remained stable, in the cold room, for a period of 7 months. Only toxoids should be used which have been completely detoxified by...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 8  issue 31

pages  0- 0

publication date 2018-07

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023