تعیین بیوتیپ‌های‌ بروســلا ملـی‌تنسیس‌ در ایزوله‌های‌ انسانی‌ و گوسفنــدی‌

زمینه و هدف: بروسلوز یکی‌ از مهمترین‌ بیماری‌های‌ مشترک‌ بین‌ انسان‌ و دام‌ است‌. به‌ دلیل‌ اهمیت‌ بیماری‌ مذکور و تأثیر انواع‌ بیوتیپ های‌ باکتری‌ بروسلا در طراحی‌ استراتژی های‌ کنترل‌ بیماری‌، ایزوله‌های‌ انسانی‌ و گوسفندی‌ بروسلا ملی‌ تنسیس‌ جهت‌ تعیین‌ بیوتیپ‌ مورد بررسی‌ قرار گرفتند. روش مطالعه: در این‌ بررسی‌ 5 ایزوله‌ بروسلا ملی‌ تنسیس‌ کشت‌ خون‌ انسان‌ و 25 ایزوله‌ کشت‌ جنین‌ گوسفند از بیمارستان ها و مراکز دامپزشکی‌ اصفهان‌ جمع‌آوری‌ گردید. پس‌ از استخراج‌ DNA ژنومی‌ باکتریهای‌ جدا شده‌ با استفاده‌ از SDS (Sodium Dodecyl Sulfate)، پروتئیناز K و با روش‌ فنل‌-کلروفورم‌ و رسوب‌ آن‌ با اتانول‌، قطعات‌ omp2a و omp2b هر کدام‌ از ایزوله‌ها با استفاده‌ از پرایمرهای‌ اختصاصی‌ omp2F و omp2R و با روش‌ PCR، Amplify شدند و محصولات‌ PCR (Polymerase Chain Reaction) با استفاده‌ از آنزیمهای‌ اندونوکلئاز Alu I، Hinf I و Taq I برش‌ داده‌ و الکتروفورز و رنگ‌آمیزی‌ شدند. نتایج: قطعات‌ omp2a و omp2b تمام‌ ایزوله‌های‌ انسانی‌ و گوسفندی‌ به‌ ترتیب‌ دارای‌ اندازه‌هایی‌ حدود bp (base pair) 1100 و bp 1200 و محصولات‌ PCR در خصوص‌ همه‌ ایزوله‌های‌ انسانی‌ و گوسفندی‌ اندازه‌ای‌ مشابه‌، برای‌ omp2a حدود bp 1100 و برای‌ omp2b حدود bp 1200 بود. همچنین‌ الگوی‌ باندهای‌ حاصل‌ از PCR-RFLP تمام‌ ایزوله‌ها مشابه‌ الگوی‌ باندهای‌ بروسلا ملی‌تنسیس‌ بیوتیپ‌ یک‌ بود. نتیجه گیری: با توجه‌ به‌ الگوی‌ باندهای‌ حاصل‌ از PCR و PCR-RFLP قطعات‌ omp2a و omp2b ایزوله‌های‌ انسانی‌ و گوسفندی‌ می‌توان‌ نتیجه‌ گرفت‌ که تمام نمونه های مورد مطالعه در منطقه اصفهان بیوتیپ یک‌ بروسلا ملی‌ تنسیس‌ بوده و عامل‌ بروسلوز انسانی‌ و گوسفندی‌ می‌باشند. این‌ مطالعه‌ بایستی‌ مرتباً تکرار گردد تا از وارد شدن‌ سویه‌ها و یا گونه‌های‌ جدید بروسلا به‌ منطقه‌ آگاه‌ شویم‌. این‌ مسئله‌ در کنترل‌ بیماری‌ بسیار حائز اهمیت‌ است‌.