بررسی بیان ژن های فاکتور نوروتروفیک در سلول های بنیادی چربی انسانی کشت شده در محیط های سرم دار و بدون سرم

سابقه و هدف: از آنجا که سرم گاوی در انسان ایمونولوژیک بوده و به­ هنگام پیوند خطر انتقال عفونت را به ­همراه دارد، در این تحقیق سرعت تکثیر، بقاء و بیان ژن ­های نوروتروفینی در سلول­ های بنیادی چربی انسانی کشت داده شده در محیط بدون سرم و سرم­دار با یکدیگر مقایسه شدند. مواد و روش ­ها: در این مطالعه تجربی سلول­ های بنیادی از بافت چربی زیرجلدی ناحیه شکم 15 خانم سزارینی استخراج شده و در محیط کشت -MEMα حاوی 10 درصد سرم جنین گاوی یا محیط فاقد سرم کشت داده شدند. بنیادی بودن سلول­ های پاساژ چهارم با روش فلوسایتومتری و قابلیت تمایزشان به سلول­ های چربی و استخوان تأیید شد. تکثیر و بقاء سلولی، به ­ترتیب با روش­ های همو­سایتو­متری و MTT بررسی شد. همچنین، میزان بیان ژن­ های نوروتروفیک با روشRT-PCR  ارزیابی گردید. نتایج: سلول ­ها به نشان­گر­های CD44، CD73، CD90، CD105 پاسخ مثبت داده و به نشان­گرهای CD34 و CD45 پاسخ منفی دادند و توانایی تمایز به سلول­ های چربی و استخوان را داشتند. بقاء و تکثیر سلول­های کشت شده در محیط سرم­دار به­ مدت 48 ساعت نسبت به محیط بدون سرم، به­ طور معنی­ داری افزایش یافته بود. سرم باعث افزایش معنی ­داری در میزان بیان ژن­ های BDNFوNT-3  نسبت به سلول­ هایی که در محیط بدون سرم کشت داده شده بودند، گردید. نتیجه ­گیری: با حذف سرم و بهینه ­سازی شرایط کشت می ­توان سلول­ های مناسب­ تری برای پیوند فراهم کرد. نتایج به­ دست آمده را می ­توان مقیاسی جهت یافتن جایگزین مناسب برای سرم گاوی قرار داد.