ایجاد وکتورهای تداخلی یوکاریوتی از pSVM با انتقال ناحیه‌ی توالی اتصال در ژنوم (attB) به آن

Authors

  • جعفری, حمیده مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد، شهرکرد، ایران
Abstract:

زمینه و هدف: سالیان زیادی است که انواع مختلفی از سلول‌های تخمدان هامستر چینی (CHO) غالباً برای تولید اکثر محصولات دارویی استفاده می‌شود. تولید دائمی در این سلول‌های میزبان، یک چالش بزرگ است. هدف از این مطالعه، همسانه سازی ناحیه ی توالی اتصال در ژنوم باکتری (attB) در وکتور pSVM با استفاده از سیستم نوترکیبی phiC31 برای بقای طولانی وکتور در سلول‌های C‏HO بوده است. روش بررسی: در این مطالعه تجربی آزمایشگاهی، یک جایگاه برش آنزیم محدود کننده‌ی PvuII به عنوان جایگاه کلونینگ توسط نرم افزار CLC در وکتور pSVM انتخاب که برش با این آنزیم منجر به ایجاد دو انتهای صاف در وکتور شد. دو پرایمر اختصاصی برای جداسازی و تکثیر ناحیه‌ی attB از وکتور pDrBB2 توسط نرم افزار 5 Oligo®طراحی شد. ژل الکتروفورز و آنالیز PCR بر روی قطعه تکثیرشده در جهت تایید ساختار آن انجام شد. یافته ها: ناحیه‌ی attB به طور موفق در داخل وکتور pSVM الحاق شد و توسط ژل الکتروفورز نشان داده شد. در جهت تایید ورود ژن attB در وکتور pSVMواکنش colony PCR از کلنی‌های نوترکیب انجام شد و صحت کلونینگ با مشاهده‌ی باند مربوط به ترادف attB انجام گرفت. نتیجه گیری: در این تحقیق، جایگاه attB در پلاسمیدpSVM همسانه سازی گردید. با بهره گیری از این اطلاعات و وجود جایگاه psedo-attP در کروموزوم سلول‌های CHO، می توان بعد از الحاق ژن اینترفرون انسانی در این پلاسمید، و ورود این پلاسمید و پلاسمید حاوی آنزیم اینتگراز به سلول‌های CHO برای اولین بار زمینه‌ی پایداری بیان این پروتئین را در سلول‌های CHO فراهم کرد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ایجاد وکتورهای تداخلی یوکاریوتی از psvm با انتقال ناحیه ی توالی اتصال در ژنوم (attb) به آن

زمینه و هدف: سالیان زیادی است که انواع مختلفی از سلول های تخمدان هامستر چینی (cho) غالباً برای تولید اکثر محصولات دارویی استفاده می شود. تولید دائمی در این سلول های میزبان، یک چالش بزرگ است. هدف از این مطالعه، همسانه سازی ناحیه ی توالی اتصال در ژنوم باکتری (attb) در وکتور psvm با استفاده از سیستم نوترکیبی phic31 برای بقای طولانی وکتور در سلول های c‏ho بوده است. روش بررسی: در این مطالعه تجربی آزم...

full text

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

full text

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

full text

مطالعة ساختار ژنتیکی اسب‌های بومی ایران با استفاده از توالی D-loop ژنوم میتوکندری

در این مطالعه، به منظور آگاهی از ساختار ژنتیکی اسب‌های بومی ایران در مقایسه با نمونه‌های خارجی، نمونه‌های خون از 95 رأس اسب از جمعیت‌های متعدد نقاط مختلف کشور و 114 توالی D-loop میتوکندری از بانک اطلاعات ژنوم بدست آمد. DNA کلیة نمونه‌های بومی با استفاده از روش شستشوی نمکی استخراج شده و بعنوان الگو برای تکثیر و تعیین توالی ناحیة D-loop ژنوم میتوکندری بکار برده شدند. با آنالیز توالی قطعة 247 جفت ...

full text

جستجوی توالی (های) شبه TASH در ژنوم تیلریاهای گوسفندی ایران

تیلریا لستو کاردی و تیلریا اوویس از مهمترین عوامل تیلریوز گوسفندی در ایرانهستند اما شدت علائم ایجاد شده، و میزان مرگ و میر در این دو نوع تیلریاکاملا با یکدیگر تفاوت دارد. تیلریا لستو کاردی باعث ایجاد یک بیماری کشندهدر گوسفندان علی الخصوص بره ها در مناطق مختلف ایران شده اما تیلریااوویس تنها باعث یک بیماری تحت بالینی و غیرکشنده در گوسفندان می شود. باوجود اهمیت بالای تیلریا لستوکاردی، شناخت کمی در...

full text

انتقال ژن به سلول‌های یوکاریوتی با واسطه نانو سامانه لیپوزومی شبه ویروسی

مقدمه: این مطالعه با طراحی یک سامانه انتقالی بر مبنای فسفاتیدیل‌کولین غشایی، یک مدل شبه ویروسی کاملاً ایمن و کارآمد برای انتقال ژن و تولید واکسنهای DNA معرفی می‌کند که قابل استفاده در بسیاری از حیطه‌های علوم پزشکی خواهد بود. مواد و روشها: به منظور ایجاد یک سامانه شبه سلولی در برگیرنده DNA، طی دو مرحله آبگیری و آب‌دهی پی‌در‌پی از لیپیدهای DMPC و کلسترول، DNA پلاسمیدی در یک ساختار بسته به خواهد ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 16  issue 6

pages  9- 18

publication date 2015-02

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023