جداسازی اسپرم های منجمد حامل کروموزوم x و y گاومیش با روش شیب غلظت وارزیابی آن با روش هیبرید کردن در جا با ماده فلورسنت

زمینه مطالعه: تعیین جنسیت اسپرم یکی از راه های مهم پیش انتخاب جنسی نتاج است که به همراه تلقیح مصنوعی، توانائی قابل توجهی برای بهبود رونـد اصلاح نـژاد دام هـا دارد. هدف : هدف از انجام این تحقیق ارزیابی شیب غلظت ناپیوسته allgrad درجداسازی اسپرمهای گاومیش بر اساس کروموزومهای جنسی به روش هیبرید کردن فلورسنت درجا (fish) بود. روش کار: جهت جداسازی اسپرم های حاوی کروموزوم های جنسی و منی منجمد گاومیش پس از ذوب به روش شیب غلظت ستونی از غلظت نامتناوب 4 لایه ای از غلظت 65 تا 95 و با اختلاف 10درصد بین لایه های متوالی با استفاده از محیط تهیه گردید. نمونه اسپرم پس از ذوب برروی اولین لایه تیوب قرار گردید تا اسپرماتوزوئیدهای با چگالی مشابه را پس از سانتریفیوژ در یک سـطـح جمـع آوری واستخـراج نمـایـد. از روش بـا پـروب رنگـی تهیـه شده گاوی برای تمایز اسپرم ها در محیط های تفکیکی استفاده گردید. شمارش اسپرماتوزوئیدها برحسب وجود سیگنال های رنگی قرمز و سبز که به ترتیب معرف اسپرم های حامل کروموزوم های و بود صورت گرفت. نتایج: بر اساس نتایج بدست آمده اختلاف معنی داری در تعداد اسپرم های با کروموزوم های x درمحیط مایع جداشده از لایه تحتانی نسب به فوقانی (3/78 در مقـابـل 7/21 درصـد)گـزارش گـردیـد(05/0 p