نام پژوهشگر: محسن شیخ حسن

انتقال ژن cry1ab به کلزا به منظور مقاومت به آفات پروانه ای
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه مازندران 1388
  محسن شیخ حسن   حسن رهنما

کلزا یکی از گیاهان مهم روغنی می باشد که تنها بعد از سویا و نخل روغنی جایگاه سوم را در تولید جهانی به خود اختصاص داده است. این گیاه عضو خانواده براسیکا می باشد. یکی از مهمترین عوامل محدود کننده تولید دانه های روغنی از جمله کلزا مجموعه ای از آفات هستند که به این گیاه خسارت وارد می کنند. آفات حشره ای گیاهان روغنی کلزا، منحصراً مختص خانواده شب بو هستند که از جمله این آفات، آفات پروانه ای می باشند. آفات پروانه ای اختصاصی خانواده شب بوئیان از جمله plutella xylostella و pieris brassicae جز مهمترین آفات سبزیجات می باشند و همواره کلزا را مورد حمله خود قرار می دهند. یکی از عوامل مهم در حفظ و افزایش عملکرد گیاهان زراعی، کنترل آفات و کاهش خسارت ناشی از آن است. انتقال ژن های مقاومت به حشرات از جمله ژن های bt یک راهبرد جدید و مکمل اصلاح کلزا برای مبارزه با آفات این محصول به حساب می آید. در این تحقیق، جهت تراریخت نمودن گیاه کلزا، از هیپوکوتیل به عنوان ریزنمونه در تراریختی رقم slm046 کلزا به واسطه agrobacterium tumefaciens استفاده شد. ژن cry1ab تحت کنترل پیشبر pepc و پایانبر 35s به گیاه کلزا انتقال داده شد. گیاهان تراریخته احتمالی در محیط گزینش حاوی غلظت های مختلف فسفینوتریسین غربال شدند. آنالیز pcr با آغازگرهای اختصاصی ژن cry1ab، حضور ژن انتقال یافته در گیاهان را نشان دادند. همچنین آنالیز pcr با آغازگرهای اختصاصی ژن bar نیز حضور این ژن را در گیاهان تراریخت تا?یید کردند. بیان این ژن و تولید پروتئین cry1ab نیز با استفاده از آزمون جریان جانبی مورد تایید قرار گرفت.

انتقال ژن cry1ab به کلزا به منظور مقاومت به آفات پروانه ای
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری - دانشکده علوم کشاورزی 1388
  محسن شیخ حسن   حسن رهنما

کلزا یکی از گیاهان مهم روغنی می باشد که تنها بعد از سویا و نخل روغنی جایگاه سوم را در تولید جهانی روغن به خود اختصاص داده است.در این تحقیق، به منظور تولید گیاهان کلزای مقاوم به آفات از کاست ژنی pepc-cry1ab-nos و از روش انتقال ژن به واسطه اگروباکتریوم استفاده گردید. بدین منظور کاست ژنی فوق به درون ناقل دوتایی pcambia3300 وارد شد. سپس ناقل جدید به داخل اگروباکتریوم سویه aglo1 تراریزش گردید. در این تحقیق، از محور زیرلپه به عنوان ریزنمونه استفاده شد. ژن bar نیز به عنوان عامل انتخابی مورد استفاده قرار گرفت که باعث ایجاد مقاومت نسبت به علف کش فسفینوتریسین می شود.گیاهان تراریخت احتمالی در محیط های انتخابی حاوی فسفینوتریسین باززا شدند. وجود ژن های cry1ab و bar در ژنوم گیاهان تراریخته توسط پرایمرهای اختصاصی این ژن ها و واکنش زنجیره ای پلیمراز به اثبات رسید. رونویسی و تولید mrna از ژن cry1ab نیز توسط انجام آزمایش rt-pcr تایید گردید. همچنین بیان این ژن و تولید پروتئین cry1ab با استفاده از آزمون جریان جانبی مورد تایید قرار گرفت. آزمایش های تکمیلی جهت تایید عملکرد ژن با استفاده از زیست سنجی در دست انجام است.