نام پژوهشگر: نجمه شریف روحانی

برداشت ترکیبات فنلی توسط پراکسیداز های گیاهی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه 1389
  نجمه شریف روحانی   عذرا صبورا

پراکسیداز یک آنزیم مهم می باشد که با مصرف h2o2 بسیاری از ترکیبات زیستی و غیر زیستی را اکسید می کند. یکی از مهمترین نقش های این آنزیم تصفیه فاضلاب ها و آب های آلوده است. در این پژوهش فعالیت پراکسیدازی ترب سفید و حذف فنل ها توسط آن بررسی شد. برای خالص سازی آنزیم روش های راسب سازی با سولفات آمونیوم، کروماتوگرافی تبادل یون (deae sephadex) استفاده گردید. خصوصیات کینتیکی آنزیم نیز بررسی شد. نتایج نشان داد که پراکسیداز ترب بهترین فعالیت را در دمای c? 60، 5ph= و h2o2در mm 5/1 و گایاکول درmm 3 دارد. پایداری دمایی پراکسیداز ترب در محدوده c? 60-30 و پایداری ph آنزیم در محدوده 6-4 ثبت شد. فنل ها از مهمترین اجزاء آلاینده آب ها هستند. پراکسیداز می تواند این ترکیبات را با مصرف h2o2 اکسید کند. فراورده های واکنش رسوب می کنند. محلول های فنلی شامل 4،2-دی کلروفنل، 6،2- دی کلروفنل، فنل، 2-کلروفنل، 4-کلروفنل، m-کرزول و o- کرزول توسط پراکسیداز ترب تیمار شدند. اثر برخی فاکتور ها بر روی واکنش های حذف بررسی گردید. نتایج نشان داد که افزایش h2o2 تا حد بهینه باعث افزایش سرعت واکنش و مقادیر اضافی آن باعث کاهش یا توقف برداشت می شود. با افزایش غلظت آنزیم اکسیداسیون فنل ها افزایش یافت. ph بر حذف فنل ها در محدوده 6-5 موثر می باشد. افزودن موادی مثل sds، peg و edta باعث بهبود برداشت و افزایش کارایی آنزیم می شود. برداشت ترکیبات فنلی توسط گیاهان in vitroو in vivo ، سورگوم و نخل مرداب مطالعه شد. نتایج حاصل نشان داد که فنل ها بر ویژگی های ظاهری و ساختار تشریحی گیاهان اثر قابل ملاحظه ای می گذاشتند به نحوی که گسترش سیستم آوندهای چوبی و لیگنینی شدن سلول ها مشاهده گردید. مقدار کلروفیل a، کلروفیل کل، قند های احیاءکننده و پلی ساکاریدها نیز کاهش یافت. برعکس، فعالیت آنزیم های پراکسیداز، پلی فنل اکسیداز و سوپراکسید دیسموتاز افزایش یافت. در بررسی حذف فنل ها توسط گیاه نخل مرداب مشاهده شد که علاوه بر محیط های حاوی گیاه، گلدان های فاقد گیاه که به عنوان نمونه شاهد بودند نیز حذف و کاهش فنل ها را نشان دادند. این نتایج وجود میکروارگانیسم هایی را که در حذف فنل ها دخالت می کنند،ثابت می کنند. از نتایج حاصل 5 باکتری- باسیلوس سرئوس، باسیلوس سوبتیلیس، سودوموناس آئروژیناز، استافیلوکوکوس اپیدرمیتیس و یک باکتری ناشناخته- شناسایی شدند.