نام پژوهشگر: نهضت عبدالرسولی

بررسی بیان اینترفرون آلفا 2b در سیستم بیانی باکتری اشرشیاکلی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده کشاورزی 1389
  نهضت عبدالرسولی   محمد رعایایی اردکانی

اینترفرون ها وسیله دفاعی بدن علیه ویروس ها می باشند که به سرعت در بدن تولید شده، سلولهای اطراف را به تولید پروتئین هائی که تکثیر ویروس را مهار، یا پاسخ ایمنی و رشد سلولی را کنترل می کنند، تحریک می کنند. در این پژوهش، ژن اینترفرون آلفاb2 پس از تکثیر با آغازگرهای اختصاصی در ناقل بیانی (+)pet-26b تحت کنترل پروموتور t7 و پپتید نشانه پریپلاسمی pelb و با استفاده از آنزیم های برشی ncoi و xhoi کلون گردید. سازه تهیه شده به باکتری اشرشیاکلی سویه bl21(de3) منتقل گردید. همسانه سازی ژن اینترفرون آلفا در ناقل بیانیpet26b(+) با استفاده از colony pcr، هضم آنزیمی و تعیین توالی، تأیید شد. سپس بیان ژن اینترفرون آلفا با استفاده از آنالیز بلات نقطه ای در زمانهای مختلف پس از القاء با iptg مورد بررسی قرار گرفت. . همچنین امکان هدایت پروتئین اینترفرون آلفای تولید شده به فضای پریپلاسمی باکتری، 15 ساعت پس از القاء موردبررسی قرار گرفت. با استفاده از این روش مشخص شد که اینترفرون آلفاb2 در سیستم بیانی باکتری تولید شده و وارد فضای پری پلاسمی باکتری شده است.