چکیده: زوال عقل (دمانس) عبارت است از کاهش پیش رونده در توانایی های درکی و شناختی که ممکن است به علت بیماری یا صدمه به مغز ایجاد شود. دمانس انواع مختلفی دارد که شایعترین آن بیماری آلزایمر می باشد.در بیماری آلزایمر کاهش حافظه، رفتار غیر معمول، کاهش توانایی تفسیر و تغییر شخصیت دیده می شود.روش درمانی و قطعی برای این بیماری وجود ندارد لیکن با استفاده از آنتی اکسیدانها و مهارکننده های آنزیم استیل کولین استراز و داروهای ضدالتهاب غیر استروئیدی که مهمترین آنها فیزوستیگمین می باشد میتوان بعضی علایم بیماری آلزایمر را درمان کرد و از پیشرفت این بیماری جلوگیری کرد.مهمترین عارضه بیماری آلزایمر کاهش حافظه است. در طب سنتی ایران برای تقویت حافظه از گیاه دارویی سعدکوفی استفاده می شود. در این تحقیق برای اولین بار چگونگی تأثیر عصاره سعدکوفی با استفاده از روش المن بر روی بهبود بیماری آلزایمر و مقایسه قدرت مهاری آن بر روی آنزیم استیل کولین استراز با داروی فیزوستیگمین مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس این تحقیق محقق شد که عصاره گیاه سعد کوفی موجب بهبود بیماری آلزایمر می شود که این تأثیر مثبت سعد کوفی از طریق مهار نارقابتی آنزیم استیل کولین استراز می باشد، در صورتیکه داروی فیزوستیگمین از طریق مهار رقابتی فعالیت آنزیم استیل کولین استراز را مهار می کند. عصاره گیاه سعد کوفی در بهترین حالت خود میزان 2/85 % مهارکنندگی از خود نشان داده است که درصد نسبتا بالایی می باشدو تقریبا با بیشترین میزان مهارکنندگی در داروی فیزوستیگمین برابری می کند،با این تفاوت که نسبت به فیزوستیگمین دارای غلظت بسیار بالا و حدود 40 برابر فیزوستیگمین می باشد.پس قدرت مهارکنندگی سعدکوفی در مقایسه با داروی فیزوستیگمین 40 برابر کمتر می باشد.لازم به ذکر است این گیاه عوارض داروی شیمیایی فیزوستیگمین اعم از سرگیجه ، تهوع، بی خوابی، خستگی، عوارض گوارشی، کبدی ، متابولیکی و... را دارا نمی باشد.

پاراکسوناز1سرم انسان یک گلیکوپروتئین وابسته به کلسیم متشکل از 354اسیدآمینه است.این آنزیم توانایی هیدرولیز استرهای اسیدکربوکسیلیک آروماتیک ،استرهای حلقوی، لاکتونها و فسفوتیواسترها را دارا می باشد.اگرچه سوبسترا و فعالیت فیزیولوژیکی طبیعی آن همچنان ناشناخته باقی مانده است.پاراکسوناز1بامهاراکسیداسیون ldlکه به عنوان فاکتور آغازگر و پیشبرنده آترواسکلروز شناخته می شود،نقش موثری رادربیماریهای قلبی ایفامی نماید. آنزیم همچنین قادر به هیدرولیز هموسیستئین تیولاکتون به عنوان یک ریسک فاکتور جدید مطرح شده در آترواسکلروز می باشد.هیدرولیز ترکیبات ارگانوفسفاته از جمله گازهای عصبی و حشره کش ها پاراکسوناز1 رابه عنوان پاکساز بیولوژیکی در بدن معرفی می کند.پلی مورفیسم های مورد بررسی ژنpon1 دردوناحیه کدینگ و پروموتور قرارگرفته اندکه به نظرمیرسد تاثیر به سزایی در تنظیم فعالیت و سطح سرمی وکبدی آن ایفامی نماید.البته فاکتورهای محیطی نیز از عوامل موثر تنظیمی آنزیم به شمار میرود.که تاکنون موارد بسیاری از آنها به صورت invivoوinvitro در سطح ژن و پروتئین آنزیم موردمطالعه قرار گرفته اند.هدف از این تحقیق بررسی تاثیر آنتی اکسیدانها وترکیبات فلاونوئیدی گیاهان به صورت invitro برسطح فعالیت آنزیم خالص شده از سرم انسان بود. ابتدا ml30 سرم به صورت پولد تهیه گردید.بعدازسانتریفیوژ،به مدت 4ساعت در مجاورت تریتون x-100دردمای 4درجه سلسیوس قرارگرفت.به منظور خالص ساز ی از سه مرحله کروماتوگرافی تعویض یونی deae-سفادکسa-50 ،کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون g-200 ومرحله دوم کروماتوگرافی deaeسفادکسa-50 استفاده گردید. در هر مرحله کروماتوگرافی به منظور بررسی فعالیت آنزیم از دو سوبسترای فنیل استات وپاراکسون استفاده شد. غلظت پروتئین در هر فراکشن به روش لوری سنجیده شد. الکتروفورزsds-page به عنوان آخرین مرحله پروسه خالص سازی مورداستفاده قرار گرفت. عصاره الکلی هر کدام ازگیاهان تهیه گردید.ازهریک 10غلظت 10, 25 ,50 ,100, 125 ,150, 200 ,225 ,250و 300 میکروگرم آماده شد.تاثیر هرکدام از غلظتها بر فعالیت پاراکسونازی(پاراکسون)وآریل استرازی(فنیل استات)مورد بررسی قرارگرفت.بعدازتعیین غلظت های اپتیمم گیاهان موثر ,سرعت ماکسیمم و ثابت میکائیلیس منتن محاسبه شد. نتایج در نرم افزار (version16) spss با استفاده از آزمون های آماری anova one way مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفت. طی این سه مرحله آنزیم خالص با فعالیت u/l200و فعالیت اختصاصیu/mg250 بدست آمد.باندالکتروفورز نشان دهنده آنزیم خالص باوزن مولکولی 45کیلودالتون بود.vmax وkmآنزیم خالص شده در مجاورت پاراکسون به ترتیب u/l 3/12±200 و 01/0±6/1 بدست آمدودر مجاورت فنیل استات 123±20000و003/0±75/0 تعیین گردید. نتایج حاصل از این تحقیق ارتباط معنی داری را بین عصاره ها و افزایش فعالیتهای آنزیم نشان داد.عصاره الکلی فلفل (g?100) زرشک(g?50) کلم بروکلی(g? 125) شوید(g? 100 ) سماق (g?100)باعث افزایش فعالیت پاراکسونازی می شود.این افزایش برای فلفل زرشک کلم بروکلی شوید 125? وبرای سماق 166? تعیین گردید. همچنین نشان داده شدکه عصاره های شوید(g?100)چای سبز(g?50)کرفس(g? 125)باعث افزایش فعالیت آریل استرازی آنزیم خالص شده می گردد.این افزایش برای شوید165?چای سبز156? وکرفس 150?تعیین شد.

چکیده ندارد.

آنزیم استیل کولین استراز ‏‎(ache)‎‏ به صورت واحدهای مونر، دی و تترامر بوده و بصورت کلی ‏‎g‎‏ نمایش داده می شود. آنزیم استیل کولین استراز از بافت ‏‎caudate nucleus‎‏ مغز گوساله جداسازی و تخلیص گردیدو از نظر میزان مهار شوندگی توسط دو داروی فیزوستیگمین و پروکائین هیدروکلراید در ‏‎in ritro‎‏ بررسی شد. در ابتدا آنزیم ‏‎ache‎‏ از بافت مغز گوساله توسط روش هموژناسیون و سانتریفوژ در چند مرحله در غلظت 32/0 مولار سوکروز و حاوی یک میلی مول ‏‎edta‎‏ استخراج گردید و سپس توسط سولفات آمونیوم 30% رسوب داده شد. پس از آن با کروماتوگرافی تعویض یونی (توسط ‏‎(deae-cellulose)‎‏ و ژل فیلتراسیون (توسط ژل 200 - ‏‎g‎‏) دو پیک حاوی فراکنش های مختلفی که دارای فعالیت استیل کولین استراز بالایی میباشند بدست آمد. آنزیم استیل کولین استراز با فعالیت مخصوص ‏‎74/5iu/mg‎‏ به دست آمد که 86 برابر افزایش فعالیت را نشان می دهد. مقادیر ‏‎km, vmax‎‏ آنزیم با سوبسترای استیل تیوکولین به ترتیب برابر ‏‎52/63u m/ml/mg‎‏ و 11/0 میلی مولار مشخص شد. الکتروفورز با ژل 10 درصد پلی اکریل آمید سدیم دو دسیل سولفات نیز باند مربوط به آنزیم را نشان می دهد. آنالی زالکتروفورزی استیل کولین استراز، جرم مولکولی ‏‎67000+-3000d‎‏ برای زیر واحد مونومر را نشان داد. ‏‎*‎‏ ‏‎ic50‏ برای داروهای پروکائین و فیزوستیگمین به ترتیب برابر 87/0 و 49/4 - 10 میل یمولار به دست آمد که نشان دهنده قدرت بالای مهارکنندگی داروی فیزوستیگمین نسبت به پروکائین می باشد. همچنین پارامترهای کینتیکی آنزیم ‏‎ache‎‏ در حضور این داروها مطالعه گردیدند. بطوریکه ‏‎km‎‏ آنزیم در حضور پروکائین و فیزوستیگمین به ترتیب برابر 65/0 و 22/2 میلی مولار به دست آمد. ‏‎vmax‎‏ آنزیم در حضور داروها و در عدم حضور داروها یکسان و برابر ‏‎52/63 um/ml/mg‎‏ مشخص گردید که این دو دارو به عنوان مهارکننده های رقابتی آنزیم فوق معرفی می گردند. ‏‎ic50‎‏: غلظتی از دارو که باعث مهار 50 درصد آنزیم می شود.