نام پژوهشگر: همایون مهروانی

ساخت dna واکسن fmdv-type o-vp1 gene ، رادیوواکسن ویروس تب برفکی و ارزیابی پاسخ ایمنی در موشهای balb/c با استراتژی پرایم بوست
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی 1390
  فرحناز معتمدی سده   امیررضا جلیلیان

هدف اصلی واکسن‏های دامی بهبود و کنترل محصولات دامی و کاهش مصرف دارو و هورمون ها می باشد. ویروس بیماری تب برفکی باعث زیان های اقتصادی زیادی در دام ها می شود. مطالعات ایمونولوژیکی در ویروس تب برفکی نشان داده است که اپی توپ غالب مسئول القائ پاسخ آنتی بادی خنثی کننده، باقیمانده های آمینو اسیدی موجود در لوپ g-h هستند که لوپ سطحی پروتئین ساختمانی vp1 می باشد. واکسن رایج این بیماری به دلایلی چون نیمه عمر کوتاه، نیاز به زنجیره سرد و عدم ایجاد پایداری دایم و ... به تنهائی نمی‏تواند در کنترل آن موثر باشد، لذا هدف از این تحقیق ساخت واکسن dna حاوی ژن vp1 ویروس تب برفکی تایپ o جداسازی شده از ایران در سال 1386، ساخت رادیوواکسن این بیماری با استفاده از پرتو گاما و در نهایت ارزیابی پاسخ های ایمنی همورال و سلولی این دو نوع واکسن در مدل موشی می باشد. در این تحقیق ژن vp1 ویروس تب برفکی تایپ o جداسازی شده از شهر ری در سال 1386 با استفاده از یک جفت پرایمر اختصاصی و آزمون rt-pcr جداسازی و جهت ساخت dna واکسن، در ناقل بیانی pcdna3.1+ الحاق گردید. سپس ویروس فوق تکثیر، توسط پرتوگاما غیرفعال سازی شده و جهت ساخت رادیوواکسن فرمولاسیون گردید. جهت بررسی پاسخ های ایمنی همورال و سلولی، واکسن dna و رادیوواکسن به موش های balb/c تزریق شدند. بررسی تیتر آنتی سرم خنثی کننده نشان داد که گروه‏های واکسینه شده با واکسن‏های dna vaccine gmcsf, radio vaccine, normal vaccine, pb 1, pb2 and pb3 دارای تیتر آنتی سرم بیش از 2/1 می باشند و در گروه‏های واکسن نرمال و رادیوواکسن بیشترین تیتر آنتی سرم مشاهده شد. همچنین بررسی ایمنی سلولی با استفاده از آزمون mtt و مقادیر اینترفرون گاما نشان داد که القا ایمنی سلولی در گروه های پرایم بوست 1، 2 و 3 نسبت به گروه‏های رادیوواکسن، واکسن نرمال، dna vaccine و dna vaccine + gmcsf بیشتر بود، همچنین در گروه‏های پرایم بوست 1 و 2 نسبت به پرایم بوست 3 بیشتر بوده است. به نظر می رسد که تعداد لنفوسیتهای th1 در گروههای پرایم بوست 1 و 2 افزایش معنی‏داری داشته است. اندازه گیری میزان اینترلوکین 10 و 4 در سه گروه پرایم بوست نشان داد که در این سه حالت تعداد لنفوسیتهای th2 تغییر معنی‏داری نسبت به گروه‏های کنترل منفی نداشت. در نهایت نتیجه‎گیری شد که استراتژی پرایم بوست هترولوگ با استفاده از dna vaccine + gmcsf و واکسن غیرفعال باعث فعال‏سازی پاسخ‏های ایمنی همورال وسلولی کاملاً مناسب در مدل‏های موشی شده است. البته واکسن نرمال و رادیوواکسن باوجودی که پاسخ ایمنی هومورال خوبی داشتند ولی القای لنفوسیتهای th1 در آنها کمتر بوده است. لذا می توان گفت برای القا پاسخ ایمنی هومورال وابسته به t cell گروههای واکسن موثر به ترتیب: 1. گروههای pb2 و pb1 2. گروههای نرمال واکسن و رادیوواکسن 3. گروه pb3 4. گروه dna vaccine- gmcsf

ارزیابی ویژگی ضد ویروسی ترکیب گیاهی آریا اورال® بر ویروس تب برفکی سویه ی) (opanasia در شرایط برون تنی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1392
  امین دبیلی نصرآبادی   سید محمود عظیمی دزفولی

تب برفکی بیماری ویروسی است که در بیشتر کشورها وجود دارد. عامل بیماری تب برفکی یک rna ویروس از جنس آفتوویروس (aphthovirus) و خانواده پیکورناویریده (picornaviridae) می باشد. هدف از مطالعه پیش رو ارزیابی اثر ضد ویروسی ترکیب گیاهی آریا اورال® بر ویروس تب برفکی سویه ی opanasia در شرایط برون تنی به روش neutral red uptake (nru assay) می باشد. در این تحقیق از سه ماده تشکیل دهنده این ترکیب که شامل اوژینول، ریوند به همراه اسید سالیسیلیک، سرکه سیب و ترکیبی از این مواد با نام تجاری آریا اورال® رقت سریال تهیه شد. سه رقت بی خطر برای کشت سلول، از نظر ویژگی ضد ویروس opanasia در زمان های مختلف ارزیابی گردید. رقت های مورد استفاده برای ریوند 004/0، 008/0 و 016/0 میلی گرم در میلی لیتر، اوژینول 003/0، 006/0 و 012/0 میلی گرم در میلی لیتر، سرکه سیب 6-10، 6-10×2 و 6-10×5 درصد و در مورد آریا اورال® رقت های 6-10×6 و 6-10×125 درصد بوده است. آزمایش در سه بازه زمانی 2 ساعت، 3 ساعت و 4 ساعت در پلیت های مجزا و دو بار در روز های مختلف مورد ارزیابی قرار گرفت. رنگ آمیزی بوسیله رنگ حیاتی neutral red که جذب سلول های زنده می شود، انجام و توسط دستگاه خوانشگر الایزا در طول موج 540 نانومتر خوانده شد. نتایج نشان داد مدت زمان تماس ترکیب ها با ویروس در مورد هر کدام از این مواد روند یکسانی در افزایش جذب نوری (optical density) نشان می دهد، در این تحقیق گروه های درمانی ریوند در رقت 016/0 میلی گرم در میلی لیتر در مدت زمان 2 ساعت و تمام رقت ها این گروه در مدت زمان های 3 و 4 ساعت تماس با ویروس در میزان جذب نوری با گروه شاهد ویروس تفاوت معنی دار نشان دادند (05/0p<). رقت های 6-10×2 و6-10×5 درصد سرکه سیب در مدت زمان 2 ساعت مجاورت با ویروس و تمام رقت های این گروه در مدت زمان 3 و 4 ساعت تماس با ویروس در میزان جذب نوری با گروه شاهد ویروس تفاوت معنی دار نشان دادند (05/0p<). در مورد اوژینول و آریا اورال® تمام رقت های این دو گروه در بازه های زمانی 3 و 4 ساعت با گروه شاهد ویروس در میزان جذب نوری، تفاوت معنی داری دیده شد (05/0p<). آریا اورال® با رقت 6-10×125 درصد پس از 4 ساعت تماس با ویروس بیش ترین اثر ضد ویروسی را داشت.