نام پژوهشگر: مینا برفه ئی

بررسی تغییرات ضخامت درم، دستجات کلاژن طبقات پاپیلر و رتیکولر پوست جنین مرغ به دنبال تزریق داخل زرده ای متیونین
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده دامپزشکی 1394
  مینا برفه ئی   محمد ناصر ناظم

با توجه به ضرورت مصرف متیونین به عنوان اولین اسید آمینه ضروری بدن، 30 عدد تخم مرغ بارور (میانگین وزنی 4/0±50 گرم) مرغ مادر گوشتی سویه راس 308، به طور تصادفی به 3 گروه مساوی تقسیم شده و همزمان با هم وارد دستگاه جوجه کشی گردیدند. در روز چهار انکوباسیون، در کیسه زرده تخم مرغ گروه های تیمار به ترتیب 40 و 50 میلی گرم اسیدآمینه متیونین محلول در نیم میلی لیتر pbs استریل تزریق شد درحالی که گروه شاهد فقط نیم میلی لیتر pbs استریل دریافت نمود. در روز هجده انکوباسیون، تخم مرغ ها از دستگاه خارج و جنین ها به روش انسانی کشته شد. سپس از پوست ناحیه سینه سمت چپ هر جنین، نمونه پوست به قطر یک سانتی متر برداشته شد. پس از طی مراحل فیکساسیون و تهیه بلوک از نمونه-ها، مقاطعی به ضخامت 5 میکرون به گونه ای که کل ضخامت پوست (اپی درم و درم) را در برگرفته باشد، تهیه شد. سپس به منظور ارزیابی ضخامت دستجات کلاژن پوست، رنگ آمیزی اختصاصی تری کروم ماسون انجام پذیرفت. از هر لام، 5 شان و در هر شان 15 قطر یا مقطع عرضی باندل های کلاژن در دو ناحیه پاپیلاری و رتیکولار، با استفاده از لنز دیجیتال اندازه گیری شد. همچنین میانگین ضخامت درم و ضخامت اپی درم در بین گروه های مختلف به وسیله میکروسکوپ نوری و لنز دیجیتال اندازه گیری گردید. در ادامه به منظور بررسی روند ادم و آماس احتمالی بافت، رنگ آمیزی هماتوکسین - ائوزین صورت گرفت و نمونه هامورد ارزیابی هیستوپاتولوژی قرار گرفتند. آنالیز آماری مطالعه، توسط نرم افزار آماری spssو روش آماری آنالیز واریانس یک طرفه بین گروه های تعریف شده، انجام گرفت. همچنین از آزمون چند دامنه ای توکی جهت تعیین اختلاف معنی دار بین گروه های آزمایشی بهره گرفته شد. نتایج به دست آمده نشان از تاثیر افزاینده متیونین بر ضخامت اپی درم به خصوص در در حضور 40 میلی-گرم متیونین داشت. همچنین بهترین اثر افزایشی در ضخامت ناحیه درم در حضور 40 میلی گرم متیونین دیده شد. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که متیونین سبب تحریک سنتز کلاژن نابالغ می گردد. با توجه به ضرورت مصرف متیونین به عنوان اولین اسید آمینه ضروری بدن، 30 عدد تخم مرغ بارور (میانگین وزنی 4/0±50 گرم) مرغ مادر گوشتی سویه راس 308، به طور تصادفی به 3 گروه مساوی تقسیم شده و همزمان با هم وارد دستگاه جوجه کشی گردیدند. در روز چهار انکوباسیون، در کیسه زرده تخم مرغ گروه های تیمار به ترتیب 40 و 50 میلی گرم اسیدآمینه متیونین محلول در نیم میلی لیتر pbs استریل تزریق شد درحالی که گروه شاهد فقط نیم میلی لیتر pbs استریل دریافت نمود. در روز هجده انکوباسیون، تخم مرغ ها از دستگاه خارج و جنین ها به روش انسانی کشته شد. سپس از پوست ناحیه سینه سمت چپ هر جنین، نمونه پوست به قطر یک سانتی متر برداشته شد. پس از طی مراحل فیکساسیون و تهیه بلوک از نمونه-ها، مقاطعی به ضخامت 5 میکرون به گونه ای که کل ضخامت پوست (اپی درم و درم) را در برگرفته باشد، تهیه شد. سپس به منظور ارزیابی ضخامت دستجات کلاژن پوست، رنگ آمیزی اختصاصی تری کروم ماسون انجام پذیرفت. از هر لام، 5 شان و در هر شان 15 قطر یا مقطع عرضی باندل های کلاژن در دو ناحیه پاپیلاری و رتیکولار، با استفاده از لنز دیجیتال اندازه گیری شد. همچنین میانگین ضخامت درم و ضخامت اپی درم در بین گروه های مختلف به وسیله میکروسکوپ نوری و لنز دیجیتال اندازه گیری گردید. در ادامه به منظور بررسی روند ادم و آماس احتمالی بافت، رنگ آمیزی هماتوکسین - ائوزین صورت گرفت و نمونه هامورد ارزیابی هیستوپاتولوژی قرار گرفتند. آنالیز آماری مطالعه، توسط نرم افزار آماری spssو روش آماری آنالیز واریانس یک طرفه بین گروه های تعریف شده، انجام گرفت. همچنین از آزمون چند دامنه ای توکی جهت تعیین اختلاف معنی دار بین گروه های آزمایشی بهره گرفته شد. نتایج به دست آمده نشان از تاثیر افزاینده متیونین بر ضخامت اپی درم به خصوص در در حضور 40 میلی-گرم متیونین داشت. همچنین بهترین اثر افزایشی در ضخامت ناحیه درم در حضور 40 میلی گرم متیونین دیده شد. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که متیونین سبب تحریک سنتز کلاژن نابالغ می گردد.