نام پژوهشگر: گلنوش خوشنویسان

بیان و خالص سازی آنزیم رنیلالوسیفراز و مطالعه اثر پلی اولها بر فعالیت سینتیکی آن
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم پایه 1393
  گلنوش خوشنویسان   رحمان امام زاده

رنیلالوسیفراز آنزیم بیولومینسانس کننده ای است که به عنوان مارکر سلولی در پژوهش های زیستی مورد استفاده قرار می-گیرد. با توجه به اهمیت کاربردی این آنزیم، بررسی ویژگی های ساختاری، عملکردی و سینتیکی آنزیم و هم چنین رابطه ساختار و عملکرد آن در محیط های مختلف و مطالعه ی تاثیر ترکیبات مختلف بر پایداری سینتیکی و حرارتی این آنزیم به شناخت هر چه بیشتر آن کمک خواهد کرد. در این پژوهش فعالیت و کارایی کاتالیتیک آنزیم رنیلا لوسیفراز در غلظت های مشخصی از دو ترکیب اسمولیت گلیسرول و سوربیتول اندازه گیری و بررسی شد، تغییرات ساختار دوم و سوم آن در حضور این دو ترکیب مورد بررسی قرار گرفت و به کمک شبیه سازی مولکولی آنزیم در حضور این ترکیبات رابطه ساختار و عملکرد آنزیم مطالعه شد. همچنین تاثیر گلیسرول و سوربیتول بر پایداری حرارتی آنزیم مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که کارایی کاتالیتیک آنزیم رنیلا لوسیفراز در نتیجه ی ورود مولکول های گلیسرول به کانال اصلی آنزیم کاهش می یابد و نوع پراکنش مولکول های سوربیتول در اطراف دهانه کانال اصلی آنزیم کارایی کاتالیتیک این آنزیم را تحت تاثیر قرار می دهد. آزادی تحرک آمینواسیدهای موجود در پیچ های سطحی آنزیم با افزایش غلظت گلیسرول و سوربیتول کاهش یافته و بنابراین ساختار سوم آنزیم رنیلا لوسیفراز تغییر یافته و دسترسی کروموفور ans به مناطق هیدروفوب پروتئین افزایش می یابد. آنزیم رنیلا لوسیفراز در حضور گلیسرول و سوربیتول به اندازه ی مورد انتظار پایدار نشد.