روش intracytoplasmic sperm injection (icsi) یکی از روش های کمک باروری برای غلبه بر ناباروری با فاکتور اسپرمی می باشد که علاوه بر انسان در گونه های حیوانی و نیز حیوانات اهلی انجام می گیرد. در مورد گاو، خوک و گوسفند به دلیل منحصر به فرد بودن ساختار کروماتین اسپرم، تزریق آن به تنهایی برای لقاح موفق در icsi و تشکیل پیش هسته نر کفایت نمی کند. ساختار نوکلئوپروتئینی کروماتین اسپرم در این گونه ها از جمله در گوسفند به دلیل حضور پروتامین نوع 1 و پیوند های دی سولفیدی فراوان در ساختار آن بسیار متراکم و پایدار است. لازمه تشکیل پیش هسته نر در این گونه ها، تراکم زدایی اسپرم قبل از تزریق به داخل اووسیت می باشد. کارایی روش icsi را در گوسفند با تیمار های مختلف به منظور تراکم زدایی کروماتین آن می توان ارتقا بخشید. تیمار مناسب علاوه بر کارایی در تراکم زدایی، باید حداقل تأثیر سوء را بر صحت dna اسپرم داشته باشد. بنابراین ارزیابی صحت dna اسپرم قبل از تزریق ضروری می باشد که بدین منظور از روش هایی همچون رنگ آمیزی اکریدین اورنج و آزمون tunel استفاده می شود. از آن جا که تا کنون تیمار کارآمد و ایمن برای اسپرم گوسفند شناسایی نشده است، بر آن شدیم تا با هدف دستیابی به چنین روشی به بررسی تیمار های hep+dtt، hep+2me (2-mercaptoethanol) و hep+gsh و انجام آزمون tunel و رنگ آمیزی اکریدین اورنج در مورد آن ها بپردازیم.