با توجه به اهمیت نقش ژن hppks1 در بیوسنتز هیپرفورین در گیاه علف چای، در این تحقیق اثر غلظت های مختلف سالیسیلیک اسید بر بیان این ژن با استفاده از روش real-time pcrمورد مطالعه قرار گرفت. بدین منظور، کالوس های حاصل از نمونه های برگی گیاهان علف چای کشت شده در شیشه تحت تیمار سه غلظت سالیسیلیک اسید قرار گرفتند و فعالیت ژن hppks1در زمان های 24، 48 و 72 ساعت بعد از تیمار با روش pcr با ارزیابی لحظه ای مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که در محیط عاری از الیسیتور میزان بیان ژن در زمان های مختلف تغییری نداشت. در نمونه های تیمار شده با 100 میکرومولار سالیسیلیک اسید، بعد از 24 و 48 ساعت میزان بیان ژن hppks1به طور آشکاری روند رو به رشدی داشت. روند مشابهی در نمونه های تیمار شده با غلظت 250 میکرومولار این الیسیتور نیز مشاهده شد. بر این اساس بیشترین میزان بیان ژن hppks1 مربوط به زمان 48 ساعت و کمترین آن مربوط به زمان 72 ساعت بود. بر اساس نتایج به دست آمده مشاهده شد که در هر سه زمان 24، 48 و 72 ساعت، با افزایش غلظت سالیسیلیک اسید بر میزان نسبی بیان ژن hppks1 افزوده می شود. همچنین، مشاهده گردید که میزان بیان این ژن 24 ساعت پس از آزمایش برای تیمارهای شاهد، 100 و 250 میکرومولار به ترتیب حدود یک، 9/1 و 7/2 برابر میزان بیان آن در نمونه های شاهد بود. روند مشابهی 48 ساعت پس از آزمایش نیز مشاهده شد به طوریکه با افزایش غظت از صفر به 250 میکرومولارسالیسیلیک اسید میزان نسبی بیان ژن حدود 3 برابر افزایش یافت. نتایج مشاهده شده در مدت زمان 72 ساعت نیز روند مشابهی با نتایج فوق نشان می دهد به طوریکه غلظت های صفر و 250 میکرو مولار سالیسیلیک اسید به ترتیب با حدود یک و 5/2 برابر شاهد دارای حداقل و حداکثر میزان بیان ژن hppks1 در شرایط آزمایش بودند. بر اساس نتایج فوق می توان نتیجه گرفت که با افزایش غلظت سالیسیلیک اسید بعد از گذشت 24 و 48 ساعت افزایش معنی داری در بیان ژن hppks1 مشاهده شد، درحالی که بعد از 72 ساعت در همه غلظت ها رو به کاهش گذاشت. بنابراین ممکن است انتظار داشته باشیم که افزایشی در محتوای هیپرفورین کالوس ها تحت تیمار سالیسیلیک اسید تنها تا حدود 48 ساعت بعد از تیمار مشاهده شود.

گل راعی با نام علمی hypericum perforatum یک گیاه علفی از تیره hypericaceae است که اهمیت آن به عنوان یک گیاه داروئی به دلیل داشتن ترکیباتی مانند هیپریسین و هیپرفورین به طور قابل توجهی افزایش یافته است. با توجه به اهمیت ژن hyp-1 در بیوسنتز هیپریسین در این تحقیق اثر غلظت های مختلف اسید سالیسیلیک بر بیان این ژن مورد مطالعه قرار گرفت.میزان بیان ژن به میزان غلظت الیسیتور، همچنین به مدت زمان تیمار بستگی دارد و در این تحقیق بهترین زمان، 24 ساعت و بهترین غلظت، 250میکرومولار بدست آمد.

با توجه به نقش ژن hyp-1 در بیوسنتز هیپریسین در گل راعی، در این تحقیق اثر غلظت های مختلف بنزیل آمینوپورین بر بیان این ژن مورد مطالعه قرار گرفت. بدین منظور، کالوس های حاصل از نمونه های برگی گل راعی کشت شده در شرایط درون شیشه ای، تحت تیمار سه غلظت مختلف bap قرار گرفتند و فعالیت ژن hyp-1 در زمان های 24، 48 و 72 ساعت بعد از تیمار با روش real time pcr مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس نتایج به دست آمده مشخص شد که در محیط عاری از الیسیتور bap، میزان بیان ژن در زمان های مختلف تغییر چشمگیری نداشت. در نمونه های تیمار شده با 5/0 میلی گرم در لیتر از bap نیز، 24 و 48 ساعت پس از اعمال تیمار افزایش یا کاهش چشمگیری در شاخص بیان ژن مشاهده نشد. در حالی که پس از گذشت 72 ساعت میزان بیان ژن hyp-1 حدود سه برابرافزایش یافت. در نمونه های تیمار شده با 2 میلی گرم در لیتر بنزیل آمینوپورین، در هر سه زمان مورد مطالعه افزایش حدودا سه برابری در میزان بیان ژن نسبت به نمونه شاهد مشاهده گردید. از طرف دیگر با مقایسه غلظت های مختلف bap، مشاهده شد که در زمان های 24و48 ساعت پس از تیماردهی، در هر دو غلظت صفر و5/0 میلی گرم در لیتر از تیمار مربوطه، میزان بیان ژن hyp-1 تقریبا ثابت است و تغییر چندانی در شاخص بیان ژن مشاهده نمیشود. در حالی که در غلظت 2 میلی گرم در لیتر از تیمار مذکور، میزان بیان ژن hyp-1 به میزان حدود سه برابر افزایش می یابد. این در حالیست که در نمونه های مورد مطالعه در زمان 72 ساعت، در هر دو غلظت 5/0 و 2 میلی گرم در لیتر بنزیل آمینوپورین، افزایش تقریبا سه برابری در میزان بیان ژن مشاهده میگردد. بطوریکه در هر دو غلظت 5/0 و2 میلی گرم از bap، بیشترین میزان بیان ژن 72 ساعت پس از اعمال تیمار مشاهده میشود. در این تحقیق کمترین میزان شاخص بیان ژن hyp-1 ، مربوط به نمونه شاهد(صفر میلی گرم در لیتر) در زمان 24 ساعت پس از کشت (9458/780) و بیشترین میزان شاخص بیان این ژن مربوط به 72 ساعت پس از اعمال 2 میلی گرم در لیتر از تیمار مذکور (089/3010) میباشد.