در بخش اول این پژوهش، مقدار pk (pk شناساگری) در محدوده phهای 00/5-00/6 و ثابت اسیدی (pka) در محدوده phهای 40/10-60/11 برای رنگینه 2- متوکسی-4-((2- متیل-h1- ایندول-3- ایل)(2- متیل-h3- ایندول-3- ایلیدن) متیل)فنول (bim) به وسیله روش اسپکتروسکوپی (uv-vis) در دمای ثابت تعیین شده است. در بخش دوم این پژوهش، برهمکنش bim با آلبومین سرم گاوی (bsa) با استفاده از روش های اسپکتروسکوپی جذب نوری و فلورسانس در محلول های بافر با phهای مختلف (00/5، 50/6، 80/6، 40/7، 00/8 و 00/11) بررسی شده است. ثابت های پیوند و استوکیومتری پیوند با تجزیه و تحلیل طیف جذب نوری رنگینه bim در غلظت های مختلف bsa با استفاده از نرم افزار squad تعیین شد. نتایج نشان می دهد که بهترین تطابق داده ها از نرم افزار squad بر اساس نسبت استوکیومتری 1:1 بین bsa و رنگینه bim می باشد. تمایل پیوند شدن bim به bsa در phهای (00/5، 00/11) از سایر مقادیر ph بیشتر بود. نشر فلورسانس bsa در اثر پیوند شدن bim به bsa خاموش می گردد و فرآیند خاموشی بر اساس رابطه استرن- ولمر خطی می باشد. نتایج نشان داد که نیروهای بین مولکولی الکترواستاتیک و هیدروفوبیک نقش موثری در برهمکنش و پایداری کمپلکس bim-bsa دارند. کلید واژه: اسپکتروسکوپی، برهمکنش، bim، bsa