دراین پژوهش، روش میکرو استخراج مایع – مایع پخشی برای استخراج و پیش تغلیظ دو داروی آرام بخش زولپیدم و آلپرازولام که در درمان بیخوابی و افسردگی افراد استفاده می شوند، به کاربرده شده است. در این روش اندازه گیری ها توسط طیف بینی uv-vis با بررسی پرشدت ترین پیک جذبی انجام گرفت. عوامل موثر بر بازده استخراج دو داروی زولپیدم و آلپرازولام مثل ph، نوع و حجم حلال استخراج کننده و پخش کننده، اثر بافر و اثر نمک بررسی و بهینه شد. تمام مراحل بهینه سازی در نمونه آبی و در شرایط استاندارد انجام گرفت و سپس روش بهینه شده روی نمونه حقیقی قرص و ادرار با روش افزودن استاندارد بررسی شد. در این روش، استخراج زولپیدم بااستفاده از500 میکرو لیتر حلال استخراج کننده (کلروفرم) و 5/2 میلی لیترحلال پخش کننده (متانول) و در حضور بافر فسفات با غلظت 06/0 مولار و ph برابر 5/7 انجام گرفت. هم چنین طبق شرایط بهینه به دست آمده برای نمونه ی آلپرازولام، حجم حلال استخراج کننده (کلروفرم) 400 میکرولیتر، حجم حلال پخش کننده (استون) 2 میلی لیتر ودر حضور بافر فسفات با غلظت 06/0 مولار با ph برابر0/10 می باشد. در روش میکرو استخراج مایع – مایع پخشی از سانتریفوژ برای جداکردن فازهای آبی وآلی استفاده شده است و زمان بهینه سانتریفوژ برای هردو دارو برابر 5 دقیقه به دست آمد. در شرایط بهینه برای زولپیدم در روش dllme، حدتشخیص 08/0 میلی گرم برلیتر وگستره ی خطی30- 1/0 میلی گرم برلیتر و ضریب هم بستگی (2r) برابر 9972/0 میباشد و شرایط بهینه برای آلپرازولام، حدتشخیص 03/0 میلی گرم برلیتر و گستره خطی منحنی کالیبراسیون 20- 08/0 و ضریب هم بستگی (2r) برابر 9993/0 میباشد.