در این تحقیق پس از استخراج dna ژنومی باکتری مولد لیپاز وتکثیر ژن بالغbtl2 با روش pcr، محصول pcr در وکتورpgem5 کلون گردید. سپس ژن btl2 از وکتور کلونینگ خارج و در وکتور بیانی pic9 تحت کنترل پروموتر الکل اکسیداز کلون شدهوسازه حاصل به درون e.coli انتقال داده شد.پس از تایید صحت کلونینگ پلاسمید نوترکیب با آنزیمbglii خطی شد و با الکتروپوریشن به مخمر انتقال داده شد. در نهایت مخمر پیکیا پاستوریس در محیط bmgy کشت داده شد و با متانل تولید آنزیم لیپاز القا گردید. وجود آنزیم در محیط کشت باتست پارانیتروفنیل پالمیتات و روش ایمونوبلات تایید شد.

112 نمونه فرآورده های لبنی از قبیل ماست ، دوغ، شیرخام و آغوز از مناطق بکر استان های کرمانشاه، کردستان، لرستان، ایلام و مرکزی جمع آوری شد. جداسازی باکتری ها بر مبنای روش های استاندارد بین المللی انجام شد. پس از انجام کشت های متوالی بر روی محیط های اختصاصی با کسب کلنی های تیپیک و مشاهده میکروسکوپیک، 93 سویه لاکتوباسیل(سویه منتخب) جدا شد. به منظور شناسایی بیوشیمیایی سویه ها تخمیر 19 قند، همچنین رشد در دمای 15 و 45 درجه سلسیوس و واکنش در برابر اسکولین بررسی شد. سپس براساس قدرت تولید فولات و استالدئید غربالگری انجام و سویه های برتر انتخاب شدند.ژنوم سویه ها با آغازگرهای مخصوص جنس تکثیر شدند و لاکتوباسیل بودن سویه ها تایید شد. همچنین ژن s rrna 16 کامل تکثیر و در باکتری e.coli dh5? کلون شد.توالی نوکلئوتیدی ژن های همسانه سازی شده تعیین و در بانک ژن ncbi ثبت گردید. پس از مقایسه توالی های مذکور با دیگر باکتری های ثبت شده در این بانک، درخت فیلوژنی رسم گردید و مشخص شد که باکتری های تولید کننده فولات به لاکتوباسیلوس کروستوروم شباهت دارند و باکتری های تولید کننده استالدئید به لاکتوباسیلوس فرمنتوم شباهت دارند. سپس از باکتری های برتر، پروتئین استخراج و با الکتروفورز دوبعدی لکه های پروتئینی آنها از هم جدا شدند. سپس لکه های پروتئینی سویه kr43 (با توان تولید استالدئید) توسط طیف سنجی جرمی ms/ms آنالیز شدند.برخی از پروتئین های شناسایی شده معرف مسیر جدیدی برای تولید استالدئید ( از ئیدرولیز استوئین) در این باکتری می باشند. در این بررسی شناسایی و جداسازی لاکتوباسیل ها با تولید اسید فولیک بالا ( بیش از 50 میکروگرم بر لیتر) و لاکتوباسیل های دیگری با توان تولید استالدئید بالا( 20 میلی گرم بر کیلوگرم) و در نهایت معرفی یک مسیر جدید برای تولید استالدئید در لاکتوباسیل ها برای اولین بار صورت گرفته است.

چکیده ندارد.

زیتون درختی مهم با ارزش اقتصادی فراوان است . از جمله گیاهان ارزشمندی است که به دلیل عمر زیاد و سازگاری آن ، در نقاط مختلف جهان بویژه در کشورهای حوزه مدیترانه کشت می شود.