این تحقیق با هدف تعیین پلی مورفیسم جایگاه های ژنی کنترل کننده صفت اولین سن جستجوگری زنبورهای عسل ایرانی انجام گرفت.مراحل انجام تحقیق به طور خلاصه شامل موارد زیر می باشد: 1- انتخاب کلنی های با تولیدعسل بالا و طول عمر زیاد ونیز کلنی های با تولید عسل پائین و طول عمر کم از نسل دهم کلنی های طرح جامع زنبورعسل ایران. 2- ارزیابی طول عمر زنبورهای کارگر کلنی های با تولید عسل بالا و نیز کلنی های با تولید عسل پائین از طریق اندازه گیری نیمه عمر آن ها در انکوباتور با درجه حرارت 34 درجه سانتیگراد و رطوبت نسبی 50 درصد. 3- پرورش ملکه از کلنی با طول عمر کم- تولید کم.4- پرورش نر از کلنی با تولید عسل بالا - طول عمر زیاد. 5- تلقیح مصنوعی ملکه های فوق با نرهای مذکوربرای تاسیس نسل اول.6- شماره گذاری زنبورهای یکروزه.7- ارزیابی اولین سن جستجوگری در زنبورهای یکروزه.8- استخراج دی.ان.ای از زنبورهای مذکور.9- مراحل هضم آنزیمی و ای.اف.ال.پی. 10- امتیاز دهی از روی باندهای حاصل. 11- تحلیل داده های صفر ویک توسط نرم افزار جین الکس. 12- تعیین پلی مورفیسم جایگاه های ژن کنترل کننده صفت اولین سن جستجوگری. به طور کلی بیشترین مقدارشاخص شانون مربوط به جایگاهe3m2- 1 در جمعیت کم تولید و همچنین جایگاهe3m3- 4 در جمعیت پر تولید می باشد ، بنابراین این دو جایگاه بیشترین چند شکلی را نشان می دهند. کمترین مقدار شاخص شانون مربوط به جایگاه e6m3- 5 است ، بنابراین کمترین میزان چند شکلی در بین تمامی جایگاه ها مربوط به این جایگاه می باشد. کلید واژه: زنبورعسل- پلی مورفیسم- ای.اف.ال.پی. - اولین سن جستجوگری

دراین مطالعه ردیابی جایگاه های صفت کمی (qtl)درصد چربی شیر در جمعیت هلشتاین ایران با استفاده از 10 جفت نشانگر ریزماهواره مربوط به کروموزوم 14 شامل: ilsts039, cssm066, ilsts011,cbdikm002, cbdikm004, dik5080, dik4884, dik4361, dik258, bm1508, که از بانک اطلاعاتی جهانی ژنوم گاو (http://www.marc.usda.gov/genome) استخراج شده بود، مورد بررسی قرار گرفت. نمونه خون از 10 خانواده پدری شامل 232 نتاج گاو ماده هلشتاین از گاوداری های تحت پوشش مرکز اصلاح نژاد و بهبود شیر کشور مربوط به استان های تهران، اصفهان، مرکزی، خراسان، فارس، یزد، قزوین و زنجان جمع آوری شد. سپس استخراج dna از نمونه ها با استفاده از کیت استخراج accuprep® (bioneer ، کره جنوبی) صورت گرفت و آنالیز مولکولی در پژوهشکده بیوتکنولوژی شمال کشور (abriin) انجام شد. بعد از سنجش کمیت و کیفیت dna استخراج شده، واکنش های pcr با تمام نشانگرها آزمایش شد. تعیین ژنوتیپ نمونه ها با کمک موئین الکتروفورز انجام گرفت و پس از تعیین ژنوتیپ، تجزیه و تحلیل داده ها برای یافتن محتمل ترین محل qtl با استفاده از نرم افزار dmu صورت پذیرفت. محتمل ترین مکان ها که حداکثر آزمون درستنمایی را داشته و معنی دار بود، برای درصد چربی موقعیت ( cm3)، و برای تولید شیر و همچنین تولید چربی موقعیت ( cm54) بدست آمد (05/0>p). با توجه به اینکه ژن dgat1 در موقعیت سانترومری کروموزوم 14 قرار دارد، ممکن است این ژن یک کاندیدای قوی برای اثرات مشاهده شده qtl مربوط به درصد چربی در این جایگاه باشد.

در این تحقیق امکان ردیابی پدر بره های نر با استفاده از میکرو ساتلایت در گوسفند بلوچی با استفاده از نشانگرهای اختصاصی کروموزوم y در گوسفند ( sry m18وy2,y3, y5, y6, y7, y8, y9, y10, y12, y13, y14, y15, y16)و میکروساتلایت های اختصاصی کروموزومyدرگاوسانان (umn0907،umn0307،umn1203،umn0304،sry-hmg ،umn0311،sry-r2801 ،maf45 ،bm861 ،inra057 ،inra189 ،bry-1 ،bym-1 ) و 6 جفت پرایمر اختصاصی کروموزوم yاسب (eca.ya16 ، eca.ye01، eca.yh12، eca.yj10،eca.ym02 eca.yp09 ) مورد بررسی قرار گرفتند. در یک مورد پرایمر های اختصاصی کروموزوم yاسب برای گوسفند به خوبی تکثیر انجام داد. برای این پرایمر تکثیر به صورت اختصاصی در نر ها قابل بررسی بود. نمونه های خون مورد نیاز در این تحقیق از 250راس گوسفند نژاد بلوچی که از عمده ترین نژادهای پرورش داده شده در نوار شرقی ایران می باشند از خراسان ،بیرجند ،طبس و زابل با استفاده از ونوجکت های 10میلی لیتری حاوی edtaجمع آوری شدند. استخراج dna از خون کامل تعداد زیادی از نمونه ها با روش فنول-کلروفرم تعدادی با روش استخراج نمکی و تعدادی نیز با استفاده ار کیت استخراجی صورت گرفت. dna های استخراج شده تعیین کیفت و کمیت شدند. با استفاده از ژل آگارز 1درصد،کیفیت dna و برای بررسی کمیت آنها از دستگاه nano drop 2000 و beckman coulter استفاده شد. میزان غلظت آلودگی های پروتئینی، rna و فنولی موجود در dnaاستخراج شده تعیین گردید. برای تکثیر پرایمرها از سه روش pcrبه صورت پایه، به صورت touchdown ودر بعضی موارد برای تعیین دمای انلینگ از برنامه های گرادیان استفاده شد. برای تفکیک قطعات حاصل از تکثیر در pcr،تکثیر آنها را بر روی ژل آگارز بررسی شد و بعد از مشاهده تکثیر، محصولات pcr برای تفکیک بیشتر بر روی ژل پلی اکریل آمید واسرشته ساز 6درصد مورد سنجش قرار گرفتند. روش رنگ آمیزی با استفاده از نیترات نقره صورت گرفت. به طور کلی تمام پرایمر های بررسی شده در سه دسته جای گرفتند. آنهایی که تکثیری انجام ندادند آنهایی که تکثیر داشتند به صورت مونومورف بودند و دسته سوم به صورت پلی مورف تکثیر داشتند. نتیجه ای که ازبررسی این پرایمر ها بدست آمد وجود تشابه بسیار بالا بین نر های موجود در گله مورد بررسی است، این نتایج مشابه نتایج بدست آمده در تحقیقات مشابه بود و انتظاری که از وجود نواحی حفاظت شده در کروموزوم y وجود داشت را کاملا نشان داد و نشان داد این نشانگر ها توانایی تفکیک بین نرها در دام های مورد بررسی را ندارند. از دلایل که برای چنین سطح بالایی از همولوژی می توان ذکر کرد وجود انتخاب در مرکز اصلاح نژاد دام شمال شرق کشور (عباس آباد) برای تولید نسل ها است. لذا ضرورت انجام این تحقیق بر روی سایر نژادهای گوسفند و به خصوص استفاده از گونه های وحشی در ایران را آشکار می نماید.