نام پژوهشگر: رضا میرفخرایی

استخراج و خالص سازی ماده موثر گیاه دارویی peganum harmala l و بررسی بیان ژن های کاسپاز 8 و trail دخیل در مسیر خارجی آپوپتوز در سلول های سرطانی mda_mb_231
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1391
  سحر سید حسن طهرانی   رضا میرفخرایی

بر اساس یافته های بالینی اخیر بیش از 60? از بیماران مبتلا به سرطان از گیاهان به عنوان مکمل در درمان خود استفاده می کنند. گیاه اسپند، peganum harmala l به دلیل وجود آلکالوئیدهایی که دارد دارای خاصیت ضد سرطانی است. هدف از انجام این پایانامه بررسی اثر ضدسرطانی آلکالوئیدهای هارمین و هارمالین اسفند می باشد. آلکالوئیدهای اسپند استخراج و توسط دو تکنیک hplc و ft-ir شناسایی شدند و اثر آنها به عنوان یک ترکیب ضد سرطان بروی رده ی سلولی سرطانی mda_mb231 و mcf_7 بررسی شد. میزان مهارکنندگی رشد سلول های سرطانی توسط تکنیک mtt مطالعه شد و بیان ژن های caspase 8 و trail در مسیر خارجی و p21 وp53 از ژن های دخیل در سرطان به صورت کمی توسط rt-pcrو کیفی توسط real-time rt-pcr مورد سنجش قرار گرفت. دو ژن trail و caspase 8 در سلول های تحت تیمار با عصاره ی آلکالوئیدی نسبت به سلول های شاهد افزایش بیان داشتند و همچنین افزایش بیان دو ژن p21 وp53 پیشنهاد می کند که این عصاره علاوه بر القای آپپتوز، منجر به توقف چرخه سلولی نیز می شود که با استفاده از نتایج این تحقیق می توان امکان استفاده از این ترکیب آلکالوئیدی را به عنوان دارو یا مکمل دارویی در درمان سرطان پیشنهاد کرد.

تاثیر عصاره آلکالوئیدی دانه اسپند بر بیان ژن های دخیل در مسیرمیتوکندریایی آپوپتوز (مسیر داخلی آپوپتوز) در سلول های سرطانی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1391
  سمیه هاشمی شیخ شبانی   رضا میرفخرایی

بتاکربولین آلکالوئید ها مانند هارمین و هارمالین از عمده ترین آلکالوئید های موجود در دانه ی اسپند peganum harmala l می باشند که به دلیل نقش احتمالی آنها در درمان سرطان مورد توجه قرار گرفته اند. تاثیر آلکالوئید های مذکور پس از استخراج و شناسایی در مهار رشد سلول های سه رده ی سرطانیmda_mb_231 ، skbr-7 و sknmc مورد بررسی قرار گرفتند.تغییرات مورفولوژیکی و وقوع آپپتوز توسط کیت آنکسین مورد ارزیابی قرار گرفتند. میزان بیان ژن های bax، bcl-2، bid، puma در مسیر داخلی به صورت کمی و کیفی به ترتیب توسط rt-pcrو real-time pcr مورد سنجش قرار گرفت. نتایج نشان داد که عصاره ی آلکالوئیدی حاوی هارمین و هارمالین رشد و حیات سلول های سرطانی مورد بررسی را با القای آپپتوز کاهش می دهد. کاهش بیان در ژن ضد آپپتوز bcl-2 و افزایش بیان در ژن های آپپتوزی bax وpuma نقش این عصاره ی آلکالوئیدی را بر فعال سازی مسیر داخلی آپپتوز تایید می نماید. افزایش بیان ژنbid به عنوان رابط مسیر داخلی و خارجی، تاثیر این عصاره را بر هر دو مسیر اشاره دارد. این نتایج اثر ضدسرطانی هارمین وهارمالین را ثابت می کند.