زمینه و هدف:عقرب گزیدگی یکی از مشکلات سیستم بهداشت عمومی در کشورهای زیادی است . عقرب دومین علت مرگ ومیر بعد از مار بعلت گزش است . گونه های از عقرب با نیشهای کشنده در شمال و جنوب آفریقا , شرق میانه, آمریکا , ترینیداد و توباگو زندگی میکنند . همیسکورپیوس لپتوروس ( از خانواده اسکورپیونیده و اخیراً در گروه خانواده لیوکلیده) از مهمترین عقرب از نظر بیشترین موارد بالینی در ایران است که علت 95% مرگ و میر ناشی از همه موارد عقرب گزیدگی بیمارستانی است . زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس اصولا عامل سیتوتوکسیک است , و فعالیتهای همولیتیک , درمونکروتیک , نفروتوکسیک , و تا اندازه ایی هپاتو توکسیک دارد. روش بررسی: زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس از استان خوزستان بدست آمد. روش استاندارد rp-hplc برای تفکیک پروتئینهای و پپتیدها بر روی زهر عقرب همیسکورپیوس انجام شد فراکشنها جمع آوری و خشک گردید و در آب مقطر استریل حل گردیدند . تست همولیتیک بر روی فراکشن ها بدست آمده از rp-hplc انجام شد و فراکشنهای همولیتیک تعیین گردید . تست sds-page بر روی فراکشنهای همولیتیک انجام گرفت و وزن مولکولی آنها در محدوده kda 32 مشخص گردید . سپس بر روی فراکشنهای همولیتیک تست درمونکروتیک (بر روی خرگوش) انجام گردید . یافته ها: 103 فراکشن از زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس از طریق ستونc18 ، rp-hplc جمع آوری شد و 9 پیک عمده در تست مشاهده گردید . از میان 103 فراکشن که تست sds-page بر روی آنها قرار گرفت 6 فراکشن در محدوده kda 32 قرار داشتند تست همولیتیک بر روی آنها انجام شد و 4 فراکشن فعالیت همولیتیک گوناگون نشان دادند که در میان آنها فراکشن در محدوده زمانی 55/157 بیشترین فعالیت همولیتیک را از خود نشان داد . در تست درمونکروتیک بر روی پوست خرگوش این فراکشنها با غلظت 5 و 20 میکروگرم فعالیت از خود نشان دادند که بیشترین میزان فعالیت متعلق به فراکشن با محدوده زمانی55/157 بود . نتیجه گیری: زهرعقرب همیسکورپیوس لپتوروس دارای بیشترین فعالیت سیتوتوکسیک می باشد . در rp-hplc تعداد 4 فراکشن با فعالیت همولیتیک و درمونکروتیک مشخص گردید . در آزمایش sds-page همه این 4 فراکشن در محدوده 32-35 کیلو دالتون بودند . به نظر میرسد که تفاوت شدت در این 4 فراکشن rp-hplc در خصوصیات همولیتیک و درمونکروتیک به سبب ایزومرهای متفاوت از یک پروتئین اصلی باشد .

چکیده با توجه به کاربرد گسترده نانوذرات نقره در پزشکی، مواد آرایشی و بهداشتی، مرغداری ، نساجی و صنایع خودرو، تحقیقات پاتولوژی بر روی نانوذرات نقره ضروری به نظر می رسد. از ویژگی های قابل توجه نانو ذرات در صنایع مختلف مربوط به حجم کوچکی از آنها می باشد، اگر چه این ویژگی دارای اثرات مضری بر سلامت انسان است. در این مطالعه اثر نانو ذرات نقره در غلظت های مختلف به بر بافت کبد رت های نژاد ویستار مورد بررسی قرار گرفت. رت ها به چهار گروه تست ویک گروه کنترل تقسیم شدند و یک بار در روز به مدت 15 روز مورد گاوا‍ژ قرار گرفتند. افزایش در غلظت نانوذرات نقره برای گروه یک تا چهار به ترتیب برابر با مقادیر 5، 50، 100 و500 میلی گرم برکیلو گرم وزن بدن می باشد. آنزیم های کبدی شاملalt، ast و alp اندازه گیری شدند و قسمتی از بافت کبد برای بررسی های پاتولو‍‍ژیکی جمع آوری گردید. طبق نتایج بدست آمده، افزایش غلظت نانوذرات موجب افزایش دو برابری در سطح پلاسمایی آنزیم های کبدی گردید. نکروز خفیف تا متوسط در گروه های یک و دو مشاهده گردید. نکروز متوسط در گروه های سه و چهار اتفاق افتاد. پرخونی در تمام گروه ها از خفیف تا متوسط مشاهده گردید. در برخی موارد نکروز و تغییر چربی تشخیص داده شد. آنالیزهای آماری با استفاده از نرم افزارهای spss18 انجام گرفت. افزایش غلظت نانو ذرات نقره موجب اثرات پاتولوژیک بر بافت کبد رت می شود. مطابق نتایج بدست آمده نشان داده شد که نانوذرات نقره سبب سمیت کبدی در مدل حیوانی می-شود. لذا پیشنهاد می شود که نانوذرات نقره را با احتیاط بیشتری در صنایع مربوطه استفاده کرد و همچنین نظارت بهداشت حرفه ای باید لزوماً در نظر گرفته شود. واژگان کلیدی:نانو ذرات ، نقره ، بافت کبد ، آنزیم های کبدی ، موش رات

با توجه به مزیتهای دارویی هیرودین و ارجحیت مصرف آن در مقایسه با هپارین بعنوان داروی ضد انعقاد، تولید آن در داخل کشور برای مصارف دارویی امری ضروری می باشد. بدست آوردن مقادیر زیاد هیرودین از منابع طبیعی بسیار مشکل بوده، بنابراین استفاده از تکنولوژی تولید پروتئینهای نوترکیب اجتناب ناپذیر می باشد.هیرودین یک پروتئین کوچک با 65 تا 66 اسید آمینه می باشد که از غدد بزاقی زالو ترشح میگردد. هیرودین قوی ترین بازدارنده ترومبین می باشدو بعنوان یک داروی ضد انعقاد می تواند در بیماریهای قلب و عروق و عمل های جراحی مورد استفاده قرار گیرد و خطرات ناشی از لخته شدن خون را که غالبا به مرگ می انجامد کاهش دهد. از طرفی بیان بالای هیرودین برای سلول میزبان (e. coli) توکسیک بوده که برای حل آن استفاده از سیستم های ترشحی به منظور ترشح پروتئین هدف در دستور کار ما قرار دارد. بعلاوه هنگامیکه میزان بالایی از پروتئینهای هترولوگوس در e.coli بیان میشوند روند طبیعی فولدینگ مختل میشود؛ در اینحالت پروتئین تولید شده دارای ساختار سوم طبیعی نبوده و در نتیجه فعالیت بیولوژیک خود را از دست میدهد ، همچنانکه نمیتواند از سلول ترشح شود.لذا برای تولید هیرودین نوترکیب دارای سیگنال پپتید phoa این مراحل را انجام دادیم: 1- در مرحله اول سفارش ساخت ترادف 66 نوکلئوتیدی واریانت hv3 ژن هیرودین (فرم دسیرودین) آنرا به شکل سنتتیک دادیم. 2- سپس انتقال ژن به یک وکتور بیانی قوی (مثل وکتورهای خانواده pet) . 3-به منظور تسهیل در تخلیص این پروتئین، استفاده از his-tag در انتهای n ژن . 4-درج سیگنال پپتید phoa در ابتدای ژن هیرودین با هدف ترشح آن به فضای پری پلاسمیک باکتری و محیط کشت. 5- بیان پروتئین توسط سویه های bl21(de3)، origamib(de3) و اندازه گیری میزان بیان هیرودین توسط هر یک از سویه ها. 6- در مرحله بعدی میزان محصول تولید شده در درون سیتوپلاسم، فضای پری پلاسمی و محیط کشت انداره گیری شد.