خلاصه فارسی با توجه به افزایش کاربرد آنتی بیوتیک ها بر علیه عفونت های ناشی از باکتری و در نتیجه پیدایش انواع مقاوم، لذا توجه محققین به یافتن درمان های کمکی و جایگزین از جمله استفاده از گیاهان دارویی معطوف شده است. هدف از انجام این رساله مطالعه اثرات آنتی اکسیدانی باروشdpphو بررسی اثر ضدباکتری عصاره ی متانولی گیاه گل فیلی بر علیه سویه های بالینی اشریشیاکولی جداشده از عفونت ادراری بیماران بیمارستان امام خمینی تهران بود. بدین منظور از سرشاخه های گلدار rhynchocorys elephas (l.) پس از جمع آوری، خشک و آسیاب نمودن، با متانول به روش ماسراسیون عصاره گیری شد. بر روی عصاره متانولی حاصل، مطالعات فیتوشیمیایی از نظر وجود تانن، فلاونوئید، آلکالوئید، گلیکوزید قلبی، گلیکوزید سیانوژنیک، آنتراکینون و ساپونین انجام گرفته و مشخص شده گیاه حاوی فلاونوئید، تانن و ساپونین می باشد. جهت تعیین اثرات ضدباکتریایی، غلظت های مختلف این عصاره بر باکتری e.coliاستانداردptcc1933)() و100سویه بالینی اشریشیاکولی جداشده از عفونت ادراری بیماران بیمارستان امام خمینی تهران در حضور شاهد(جنتامیسین) به روش حفر چاهک مورد برسی قرار گرفت. براساس نتایج تحقیق حاضر، اثر عصاره متانولی این گیاه بر علیه باکتریهای گرم منفی (e.coli) با mic معادل mg/ml 5/62 به دست آمد. در ادامه ی خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره ی متانولی گیاه با روش dpph تعیین شد بر اساس محاسبات صورت گرفته میزان ic50 (غلظتی از عصاره که می تواند 50 درصد رادیکال های آزاد dpph را مهار کند)برای گیاه مورد نظر برابر باmcg/ml 3/114 وبرای bht برابر با mcg/ml 59/10می باشد و با توجه به این نتایج دارای فعالیت آنتی اکسیدانی قابل قبول می باشد. لذا با وجود خواص ضد باکتریایی و خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره حاصل، با انجام تحقیقات و مطالعات وسیع تر و بررسی عدم سمیت می توان استفاده از این گیاه را به عنوان نوعی نگهدارنده یا حتی طعم دهنده به صنعت غذایی و دارویی کشور برای انجام بررسی های in-vivo و in-vitroدر آینده پیشنهاد نمود. همچنین از عصاره ی این گیاه به عنوان یک عامل ضدباکتری مناسب جهت پیش گیری و درمان عفونت های ایجاد شده توسط این گروه از باکتری ها استفاده نمود.

سیانوباکترها دسته ای از پروکاریوتهای فتوسنتز کننده هستند که مورفولوژی متفاوتی نسبت به آنها دارند و در بستر آبهای ساکن رشد می کنند. این دسته از سیانوباکترها از طریق تشکیل بلوم ،اثرات ضد میکروبی از خود نشان می دهند. اثرات دارویی آنها ناشی از تاثیر فیزیولوژیک متفاوت برخی ترکیبات شیمیایی آن روی بدن انسان می باشد. مهمترین و فعالترین اجزاء سیانوباکتر از نظر زیستی آلکالوئید ها ،تانن ها و فلاونوئیدها هستند. پژوهش های اخیر ترکیبات فعال بیولوژیک با اثرات ضد میکروبی را در متابولیتهای ثانویه های سیانوباکترها مشخص نموده است. این مطالعه جهت ارتقاء استفاده درست از سیانو باکتر ها و معرفی آنها به عنوان منبعی برای داروهای جدید طراحی شده است. روش کار: سیانوباکترمیکروسیستیس از بلوم موجود در تالاب پارک دانشجوی رشت طی دو مرحله در شهریور و مهر 931 جمع آوری شد.سپس در محیط آزمایشگاه کشت داده شد تا به حد مناسبی از رشد برسد. برای کشت میکروسیستیس از محیط کشت bg11 استفاده شد. برای تعیین اثرات ضد باکتری عصاره متانولی میکروسیستیس در برابر باکتری های استافیلوکوک اورئوس،باسیلوس سوبتیلیس،اشریشیا کلی و سودوموناس آئروژینوزا در دماها و غلظتهای مختلف از روش چاهک پلیت استفاده شد. ارزیابی فیتوشیمیایی اولیه روی عصاره متانولی 33 % میکروسیتیس نیز انجام شد.از تست mayer برای تعیین آلکالوئید ،تست shinoda برای فلاونوئیدها، تست کف برای ساپونین،تست محلول فریک کلرید برای تانن ،تست واکنش libermann – burchard برای استرول و تست borntrager برای آنتراکینون استفاده شد. نتایج: آلکالوئید،استروئید و ساپونین در سیانوباکترهای میکروسیستیس وجود داشت.فلاونوئید ،تانن و آنتراکینون در میکروسیستیس وجود نداشت. هیچ هاله عدم رشدی از عصاره متانولی و آبی این سیانوباکتر در تست آنتی باکتریال مشاهده نشد.

در بیماران مبتلابه سوختگی،عفونت خصوصا با سودوموناس آئروژینوزا(p.a)نقش بسیار مهمی در به خطر انداختن سلامتی این افراد دارد.بعلاوه آلودگی با این باکتریها در بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس (cystic fibrosis;cf)نیز از اهمیت خاصی برخوردار است زیرا در افزایش روند پیشرفت بیماری ومیزان مرگ در این گروه بیماران موثر است.این در حالی است که سویه های(p.a)بطور ذاتی نسبت به بسیاری از آنتی بیوتیکها ومواد ضدعفونی کننده مقاوم بوده و این امر خود در کاهش میزان درمان در بیماران مبتلا به سوختگی وسیستیک فیبروزیس نقش مهمی دارد.مقاومت این باکتریها حتی نسبت به سفالوسپورینهای نسل سوم وچهارم با تولید بتالاکتاماز وسیع الطیف(esbl )دیده شده است.مهمترین علت مقاومت ذاتی این باکتری ها مربوط به نفوذ ناپذیری غشا بوده ولی با اینحال مقاومت آنها تحت تاثیر عوامل دیگری مثل سیستم های افلاکس نیز می باشد که از مهمترین آنها می توان به مقاومت پلاسمیدی وابسته به ژن های mexxy-oprm،mexab-oprm،mexcd-oprj اشاره نمود که در این بین mexab-oprm می تواند مقاومت به گروههای داروئی مختلفی از جمله بتالاکتام، کینولون ها،تتراسایکلین،کلرامفنیکل و رنگها را موجب گردد. در این مطالعه 80 نمونه بالینی (p.a) از بیماران مبتلا به سوختگی وبستری در بیمارستان مطهری تهران و40نمونه بالینی (p.a) از بیماران مبتلا به cf وبستری در بیمارستان مفید تهران در سال 1391 جمع آوری شد.در ادامه تشخیص بر حسب روش های استاندارد بیوشیمیائی و باکتری شناسی انجام گرفت ومتعاقبا حساسیت یا مقاومت آنها نسبت به آنتی بیوتیک های رایج از جمله فلورو کینولون ها با روش دیسک دیفیوژن تعیین شد.برای سویه های مقاوم یا نیمه حساس نسبت به سیپروفلوکساسین mic (حداقل غلظت مهار کنندگی) با روش e-test تعیین گردید.باکتری های مقاوم کاندید بررسی از نظر مولکولی شدند وپس از استخراج dna با روش جوشاندن،فراوانی ژن mex-ab-oprm در آنها با روش pcr انجام شد و محصول ایجاد شده پس از رنگ آمیزی در زیر نور uvبررسی گردید. دربیماران مبتلا به سوختگی مروپنم با 5/82 % و ایمی پنم 2/45 % بیشترین حساسیت را دارندو در بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس مروپنم با 85%و ایمی پنم با 5/82%بیشترین حساسیت را دارندو از بهترین داروها در برابر باکتری هستند.در نتایج حاصل از-test -eدر بیماران مبتلا به سوختگی5/82% و در بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس5/32% مقاوم به سیپروفلوکساسین هستند. با روش ملکولیpcr فراوانی ژن mex- ab-oprm که در افلاکس پمپ این باکتری وجود دارد بررسی گردید ومحصول bp 208در 55% از بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس و7/67% از بیماران مبتلا به سوختگی مشاهده شد.به نظر می رسد علت اصلی مقاومت نسبت به فلوروکینولون مربوط به افلاکس پمپ این باکتری باشد. مقدمه

با توجه به گسترش روزافزون بیماری های گوارشی ناشی از مسمومیت های غذایی و ایجاد مقاومت های میکروبی نسبت به مواد ضد میکروب و همچنین عوارض جانبی خطرناک برخی از این مواد، بنابراین کاهش تعداد میکروارگانیسم ها و کنترل رشد آنها در مواد غذایی از نظر کنترل کیفیت، بهداشت وسلامت عمومی حائز اهمیت است. از طرفی با توجه به نگرانی های عمومی در خصوص عوارض جانبی مواد نگهدارنده شیمیایی، تحقیقات گسترده ای روی گیاهان به منظور کشف مواد ضد میکروبی جدید در حال انجام است؛ تا با دست یابی به یک ماده موثر جهت جلوگیری و یا به تاخیر انداختن فساد میکروبی مواد غذایی، بتوان مشکلات موجود را تا حدودی کاهش داد. یکی از این گیاهان، زعفران با نام علمی crocus sativus l.از خانواده iridacea می باشد که از دیر باز استفاده های بسیاری از کلاله قرمز رنگ این گیاه می شده، همچنین چندین مطالعه مبنی بر اثر ضد میکروبی کلاله قرمز رنگ گلهای زعفران انجام گردیده و اثر آن به اثبات رسیده است، اما به دلیل گرانی کلاله ارزشمند این گیاه، استفاده از این بخش، به عنوان یک ماده ضد میکروب در صنعت غذایی صرفه اقتصادی ندارد. با توجه به اینکه سالانه بعد از جمع آوری زعفران (کلاله ی گل ) مقدار بسیار زیادی گلبرگ بههمراه پرچم گلها دور ریخته می شود و از طرفی نیز مطالعات بیولوژیک خاصی بر روی این دو بخش صورت نگرفته،لذا بر آن شدیم تا اثرات آنتی باکتریال عصارهای متانولی،فراکسیونهای کلروفرمی،اتیل استاتی و آبی این دو بخش گل زعفران را به طور جداگانه علیه 2 سوش باکتریایی گرم مثبت استافیلوکوک اورئوس (1431ptcc)، باسیلوس سرئوس (1247ptcc) و 3 سوش باکتریایی گرم منفی اشریشیاکولای (1399ptcc)،سالمونلا انتریکا (1639ptcc) و شیگلا دیسنتریا(1188ptcc ) که عوامل شایع در ایجاد مسمومیت غذایی اند بررسی نماییم تا درصورت مشاهده نتایج قابل قبول بعد از آزمایشات تکمیلی دیگر بتوان از این دو بخش به عنوان مواد ضدمیکروب با عوارض کم و صرفه اقتصادی مناسب تر، در صنعت غذایی استفاده نمود. در این رساله، عصاره تام متانولی گلبرگ و پرچم به روش خیساندن با دستگاه پرکولاتور و با استفاده از حلال متانول، وفراکسیونهای کلروفرمی، اتیل استاتی و آبی گلبرگ و پرچم نیز به روشliquid-liquid fractionationو با حلال های کلروفرم، اتیل استات و آب انجام شد. بررسی اولیه اثرات ضد میکروبی عصاره ها و فراکسیون های نام برده به روش حفر چاهک انجام گرفت و در نهایت حداقل غلظت مهارکنندگی رشد(mic) و حداقل غلظت کشنده (mbc) این باکتری -هابه روش رقت سازی متوالی?در لوله آزمایش (macrodilution method)، تعیین گردید. نتایج حاصله نشان داد عصاره متانولی گلبرگ نسبت به عصاره متانولی پرچم و یا سایر فراکسیون ها، اثر ضد میکروبی قوی تری علیه استاف اورئوس(mic: 15/6 mg/ml)، سالمونلا انتریکا(mic:31/2 mg/ml)وشیگلادیسنتریا(mic:7/8 mg/ml)دارد. در حالی که بر روی اشریشیاکولای، فراکسیون اتیل استاتی پرچم با micبرابر با 31/2 mg/ml و بر روی باسیلوس سرئوس عصاره متانولی پرچم با micبرابر با 31/2mg/ml بیشترین اثر ضد میکروبی را داشته اند. طبق نتایج به دست آمده در کل، شیگلا دیسنتریا کمترین مقاومت و اشریشیاکولای بیشترین مقاومت را از خود نشان دادند که می تواند به خصوصیات ساختمانی آنها مربوط باشد. به طوری که بر روی شیگلا دیسنتریا، عصاره متانولی گلبرگ و فراکسیون اتیل استاتی پرچم با micیکسان و برابر با mg/ml 7/8 بیشترین اثر و فراکسیون کلرفرمی گلبرگ، عصاره متانولی و فراکسیون کلروفرمی پرچم با mic یکسان و برابر با mg/ml 31/2کمترین اثر را داشته اند. بر روی اشریشیاکولای نیز فراکسیون اتیل استاتی پرچم با mic برابر با mg/ml 31/2بیشترین اثر و بقیه عصاره ها و فراکسیون های مورد بررسی با mic یکسان و برابر با mg/ml 62/5 کمترین اثر را روی این باکتری گذاشته اند. با توجه به اثر بخشی کمتر فراکسیون های کلروفرمی نسبت به بقیه فراکسیون ها و عصاره متانولی، می توان چنین استنباط کرد که احتمالاً ترکیبات قطبی با خاصیت ضد میکروبی، در این دو بخش به میزان بیشتری وجود دارد که این موضوع نیازمند مطالعات بیشتری است. از طرفی، با توجه به اینکه فراکسیون های کلروفرمی و اتیل استاتی به طور کلی بر روی هر 5 سوش مورد بررسی موثر بودند می توان گفت احتمالاً ترکیبات غیر قطبی تا نیمه قطبی با خاصیت ضد میکروبی هم در این دو بخش از گیاه زعفران وجود دارد که نیازمند بررسی های بیشتری است. یکی از دلایل تفاوت در میزان micمحاسبه شده در مطالعات مختلف اختلاف ترکیب عصاره ها می باشد. نتایج این مطالعه به طور کلی نشان دهنده اثرات ضد میکروبی مناسب عصاره های متانولی و فراکسیونهای کلروفرمی، اتیل استاتی و آبی این دو بخش از گیاه زعفران بود به طوری که تمام عصاره ها و فراکسیون های مورد مطالعه حداکثر دارای mic برابر با mg/ml 62/5 یا کمتر از آن بودند. همانطور که قبلاً گفته شد با توجه به حجم تولید بسیار بالای سالانه گلبرگ و پرچم گیاه زعفران و نتایج مربوط به mic که در این مطالعه به دست آمد می توان بیان کرد که تهیه چنین غلظتی نیازمند صرف وقت و هزینه بسیاری نیست و از طرفی با توجه به عطر و رنگ قابل قبول زعفران در بین عامه بنابراین امکان استفاده از گلبرگ و پرچم گل زعفران به عنوان یگ نگهدارنده طبیعی در صنعت غذایی وجود دارد که در صورت انجام آزمایشات تکمیلی بیشتر و تایید نتایج به دست آمده در این تحقیق، علاوه بر برآورده کردن خواست مصرف کنندگان برای نگهدارنده های طبیعی، افزایش عمر نگهداری مواد غذایی و در نتیجه کاهش میزان مسمومیت های ناشی از آلودگی مواد غذایی به ارگانیسم های مختلف، از هدر رفتن یک محصول جانبی و طبیعی جلوگیری می شود.

سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن فرصت طلب است که از عوامل مرسوم عفونت های بیمارستانی میان کودکان و بزرگسالان می باشد این باکتری معمولاً نسبت به آنتی بیوتیک های معمول با مکانیسم های ذاتی یا اکتسابی مقاوم هستند در بیشتر موارد کارباپنم ها مثل ایمی پنم انتخاب نهایی در درمان است بنابراین سویه های مقاوم به کارباپنم در شکست درمانی بسیار مهم هستند. هر تغییر در پورینoprd باعث تغییر در نفوذپذیری غشا می شود و مسبب مقاومت به ایمی پنم می شود. هدف این پژوهش بررسی فنوتیپی و ملکولی مقاومت نسبت به ایمی پنم در میان سویه های سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از کودکان غیر سوختگی بیمارستان مرکز طبی کودکان و بیماران سوختگی بیمارستان مطهری بود. مواد و روش: در طی سال 2011، 72 و 90 نمونه سودوموناس آئروژینوزا به ترتیب از زخم سوختگی بیمارستان مطهری و نمونه های کلینیکی از کودکان غیر سوختگی مرکز طبی کودکان جمع آوری شد سپس مقاومت آنها نسبت به آنتی بیوتیک های مرسوم سفپودوکسیم، تیکارسیلین، سفتریاکسون، سفوتاکسیم، سیپروفلوکساسین، مروپنم، آزترونام، آمیکاسین، سفتازیدیم و ایمی پنم که همگی از شرکت mast تهیه شده بود و طبق پروتکل clsi2011 و با استفاده از متدkirby-bauer انجام شد. متلالوبتالاکتامازها تولید می شوند در بین سویه های مقاوم به ایمی پنم که با روشddt به وسیله imp/imp+edta بررسی شد.e.coli atcc 25922 وp.aeruginosa atcc27853 به عنوان سویه ی کنترل استفاده شد و بوسیله ی pcr ژن oprd شناسایی شد. نتایج: مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک های مرسوم در تست آنتی بیوگرام به این صورت مشاهده شده سفپودوکسیم 3/33% و 93% تیکارسیلین 3/13% و 25/90%، سفتریاکسون 7/27% و 93%، سفوتاکسیم 6/36% و 100%، سیپروفلوکساسین 7/27% و 27/90%، مروپنم 2/32% و 27/90%، آزترونام 2/32% و 8/88%، آمیکاسین 8/28% 3/83%، ایمی پنم 5/15% و 8/70% به ترتیب در سویه های کودکان و سوختگی بود. به وسیله ی روش ddt7 میلی متر افزایش در هاله عدم رشد اطراف imp+edta(0/5m) نسبت به imp به تنهایی بررسی شد. در 4 ایزوله (4/ 4%) و 72/13 ایزوله (18%) از مرکز طبی کودکان در مقایسه با نمونه های مطهری بررسی شد. استخراج dna به روش جوشاندن بود. در بررسی ملکولی به وسیله ی متد pcr bp 1412 که اندازه باند ژن oprd است، بررسی شد. در 8 سویه (8/8%) و 46 سویه (8/63%) از مرکز طبی کودکان و بیمار ستان سوختگی مطهری بررسی شد. جمع بندی: همانند گزارش های نرخ مقاومت imp جهانی، نرخ مقاومت بدست آمده در میان بیماران سوختگی بالا می باشد (8/70%)، اما خوشبختانه این مقدار در میان نمونه های کودکان پایین است (5/15%). به منظور کاهش سرعت نرخ مقاومت دستورالعمل imp در این جمعیت باید به دقت انجام شود. علاوه بر این وجود همزمان دیگر مکانیزم های پلاسمیدی در مقاومت به ایمی پنم باید در مطالعات آتی ارزیابی شود.

مقدمه: در دو دهه اخیر، با توجه به گسترش روزافزون مقاومت دارویی در میکروب های بیماری زا و همچنین گزارش عوارض جانبی خطرناک بعضی از آنتی بیوتیک ها تحقیقات گسترده ای روی گیاهان به منظور کشف مواد ضد میکروبی جدید انجام گرفته است. مواد و روش ها: سر شاخه های هوایی گیاه gailonia aucheri در خرداد ماه 1391 از بندرعباس جمع آ وری گردید و به دور از نور مستقیم خورشید خشک و توسط آسیاب پودر شد. عصاره گیری اولیه در پرکولاتور و با متانول انجام شد و پس از یک هفته، عصاره به دست آمده تخلیه و تغلیظ شد و وزن عصاره حاصل برای هر کدام از عصاره ها با حلال های اتردوپترول، اتیل استات، متانول و آّب تعیین شد. اثر ضد میکروبی عصاره های به دست آمده علیه باکتری های گرم مثبت و منفی شامل: استافیلوکوک اورئوسatcc:6538 ، اشریشیاکلی atcc:8739، پسودوموناس آئروژینوزاatcc:9027 ، سالمونلاتایفی atcc:1622 و مخمر کاندیداآلبیکنس atcc:1023 با تعیین mic حداقل غلظت مهاری به روش micro dilution مورد بررسی قرار گرفت. ارزیابی فیتوشیمیایی اولیه روی عصاره تام متانولی نیز انجام شد. از تست mayer برای تعیین آلکالوئید، تست shinoda برای فلاونوئید، تست کف برای ساپونین، تست محلول فریک کلریدر برای تانن و تست borntrager برای آنتراکینون استفاده شد. نتایج: هیچ هاله عدم رشدی از عصاره تام متانولی و فراکسیون های آن در تست حفر چاهک مشاهده نشد. mg/ml 05/11± 33/23 mic= و mg/ml 3453/0± 7324/0 mic= برای عصاره تام متانولی این گیاه به ترتیب علیه استافیلوکوک اورئوس و کاندیدا آلبیکنس به دست آمد. حداقل غلظت مهاری فراکسیون اتردوپترولی این گیاه علیه استافیلوکوک اورئوس mg/ml0/0 ± 125 و برای فراکسیون اتیل استات، mg/ml 031/0± 092/0 علیه استافیلوکوک اورئوس و mg/ml 0183/0± 0481/0 علیه کاندیدا آلبیکنس تعیین شد. mic فراکسیون متانولی علیه استافیلوکوک اورئوس mg/ml 031/0± 092/0 و علیه کاندیداآلبیکنس mg/ml 38/1± 9297/2 به دست آمده است. حداقل غلظت مهاری فراکسیون آبی علیه استافیلوکوک اورئوس mg/ml 05/11±33/23 و علیه کاندیدا آلبیکنس mg/ml 17/0± 3662/0 تعیین شد. عصاره تام و فراکسیون های دیگر این گیاه علیه دیگر سوش های باکتریایی اثر قابل توجهی نداشتند. ساپونین در گیاه کارتوس وجود داشت. فلاونوئید، تانن، آلکالوئید و آنتراکینون در گیاه کارتوس وجود نداشت. نتیجه گیری: از آنجایی که اثر عصاره تام متانولی و سایر فراکسیون های gailonia aucheri بر علیه استافیلوکوک اورئوس و کاندیدا آلبیکنس نسبت به سایر باکتری های بررسی شده بسیار قابل توجه بود، انجام سایر آزمایش های تکمیلی invivo و invitro در مطالعات آتی پیشنهاد می گردد تا در صورت تائید به عنوان روشی آلترناتیو در درمان بیماری های ناشی از این عوامل استفاده شود.

اهداف: امروزه مقاومت باکتری ها از جمله e. coli نسبت به داروهای موجود در حال افزایش است . یکی از راه های کسب مقاومت باکتری ها نسبت به داروهای گروه بتالاکتام مانند کارباپنم ها تولید انواعی از آنزیم بتالاکتاماز است که از جمله این آنزیم ها می توان به ampc,imp,kpc,vim اشاره نمود. آلودگی با این باکتری ها هزینه های درمانی و مرگ و میر را افزایش می دهد لذا شناسایی و غربالگری آن ها حائز اهمیت است. بنابراین هدف از این تحقیق بررسی فنوتیپی و مولکولی سویه های e. coli مقاوم به کارباپنم های جداشده از بیماران بستری در بیمارستان های امام خمینی، سینا و مطهری بود. بدین منظور، از بهمن 1390 تا مرداد 1392 سویه های e. coli از بیماران بستری در بیمارستان های مذکور جمع آوری شدند. روش کار: تمام نمونه ها بر اساس روش های معمول میکروب شناسی تایید و حساسیت آن ها نسبت به آنتی بیوتیک های رایج با روش دیسک دیفیوژن بررسی شد. توانایی تولیدmbl با استفاده از روش ddst ، وجود kpc با استفاده از روش modified hodge test و توانائی تولید ampc نیز با استفاده از کیت برونیک اسید بررسی شد. همچنین وجود ژن های kpc,imp,vim با روش pcr غربالگری شد. نتایج: از 120 سویه e. coli جداشده ،تنها دو مورد مقاوم به کارباپنم ها به دست آمد. این دو سویه نسبت به مروپنم و ارتاپنم مقاوم و نسبت به ایمی پنم نیمه حساس بودند. mic برای ایمی پنم و مروپنم در محدوده مقاوم بودند. توانایی تولید mbl با توجه به تفاوت بیش از mm5 در هاله عدم رشد نسبت به مروپنم و ایمی پنم / ایمی پنم + edta در6/1% سویه ها مشخص شد. بعد از انجام تست hodge هر دو سویه از نظر تولید kpc منفی شناسایی شدند. با استفاده از کیت برونیک اسید نیز توانائی تولید ampc منفی شد. وجود ژن های kpc,imp,vim با روش pcr نیز در هر دو سویه منفی بود. نتیجه گیری: خوشبختانه تعداد سویه های مقاوم به کارباپنم ها در بین بیماران بستری در این بیمارستان ها بسیار کم و در حدود6/1%می باشد. با وجود این برای جلوگیری از ایجاد مقاومت باکتریایی انجام تست آنتی بیوگرام قبل از تجویز آنتی بیوتیک توصیه می شود.

از آن جایی که بروز مقاومت دارویی در بین باکتری های مختلف نسبت به داروهای شیمیایی در حال افزایش است محققین همواره به دنبال یافتن داروهائی جدید با منشا طبیعی و عوارض کمتر بوده اند . در این تحقیق بر آن شدیم تا اثر ضد میکروبی عصاره تام متانولی گیاه otostegia persica را علیه گونه های استافیلوکوک جدا شده از نمونه های بالینی بیماران بستری در بیمارستان سینا تهران بررسی کنیم. گیاه otostegia persica در خرداد سال 1391 از استان سیستان و بلوچستان ( زاهدان ) جمع آوری شد و بعد از شستشو و خشک شدن پودر گردید. عصاره تام به کمک متانول و روش پرکولاسیون تهیه و تغلیظ شد. بطور همزمان نمونه برداری از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان سینا انجام و 100گونه مختلف استافیلوکوک بر اساس استانداردهای باکتری شناسی جدا و شناسائی گردید. در ادامه اثر ضد باکتریایی عصاره تام متانولی و حداقل غلظت مهاری (mic) آن در کنار آموکسی سیلین بعنوان کنترل با روش میکرودایلوشن و حفر چاهک برای باکتریهای استاندارد استافیلوکوک اورئوس ptcc1112و اساتافیلوکوک اپیدرمیدیس ptcc1114 وسویه های بالینی استافیلوکوک تعیین شد. در بررسی هایی که روی 100 نمونه از گونه های مختلف استافیلوکوک انجام گرفت70 % مربوط به استافیلوکوک اورئوس ، 15 % مربوط به استافیلوکوک اپیدرمیدیس و 15 % مربوط به سایرگونه ها (مثل ساپریفیتیکوس و غیره ) بود. همچنین فراوانی نمونه های بررسی شده شامل 49 % کشت خون ،30 % ترشحات ، 13 % از زخم و 8% از لوله تراشه جدا شدند . بعلاوه 60% نمونه ها مربوط به بخش عفونی و 40 % مربوط به بخش icu بودند . در روش دیسک دیفیوژن ، mic عصاره گیاه 50 میلی گرم بر میلی لیتر در مقایسه با mic پودر آموکسی سیلین 100 میلی گرم بر میلی لیتر تعیین شد . با توجه به نتایج بدست آمده ، عصاره متانولی گیاه otostegia persica با غلظتی نصف و با قدرتی دو برابر نسبت به آموکسی سیلین مانع رشد باکتریها شده است . از طرف دیگر در برخی گونه های استافیلوکوک بررسی شده نسبت به آموکسی سیلین مقاومت دیده شد در حالیکه که عصاره متانولی بررسی شده بر علیه بیشتر از نصف گونه ها ی استافیلوکوک مهار رشدی ایجاد کرده است.با توجه به نتایج رضایت بخش بدست آمده انجام سایر تست های تکمیلی مثل بررسی خواص سایتوتوکسیک پیشنهاد میگردد

یکی از گیاهان آندمیک ایران که تاکنون اثرات ضد باکتریایی آن مورد مطالعه قرار نگرفته است، nepeta depauperata از تیرهlabiatea می باشد. در این تحقیق اثرات ضد باکتریایی عصاره تام و فراکسیون های کلروفرمی، متانولی و آبی علیه 6 سوش باکتریایی گرم مثبت و منفی به روش چاهک پلیت و mic بررسی گردید. امروزه با توجه به تنوع ژنتیکی ایجاد شده در عوامل بیماری زای باکتریایی و پیدایش سویه های مقاوم و همچنین عوارض جانبی ناشی از مصرف این داروها، جایگزین کردن آن ها توسط داروهای ضد باکتریایی با منشأ گیاهی از اهمیت ویژه ای برخوردار و انگیزه ای برای تحقیقات در زمینه یافتن داروهای گیاهی بدون عوارض جانبی شده است. و همچنین با توجه به بررسی های انجام گرفته در این تحقیق، همان طور که از فصل نتایج مشهود است، در روش چاهک پلیت، عصاره تام و فراکسیون کلروفرمی در مورد میگروارگانیسم های گرم مثبت استافیلوکوک اورئوس و باسیلوس سوبتیلیس و گرم منفی سودوموناس آئروژینوزا و فراکسیون متانولی بر رو ی سودوموناس آئروژینوزا هاله عدم رشد مشاهده گردید ولی در تعیین mic به روش microdilution در مورد استافیلوکوک اورئوس، باسیلوس سوبتیلیس، اشریشیا کلی، سودوموناس آئروژینوزا و سالمونلا تایفی نتایج قابل قبولی به دست آمد. بهترین نتیجه برای در مورد استافیلوکوک اورئوس مربوط به عصاره تام با mic:500mg/ml (40mg/µl) ودر مورد باسیلوس سوبتیلیس مربوط به فراکسیون های متانولی و آبی با (40mg/µl) mic:500mg/mlو در مورد سودوموناس آئروجینوزا مربوط به فراکسیون های متانولی و آبی با mic:500 mg/ml(40mg/µl) و در مورد سالمونلا تایفی مربوط به عصاره تام و فراکسیون کلروفرمی باmic:1000 mg/ml (80mg/µl) و همچنین در مورد اشریشیا کلی مربوط به عصاره تام و فراکسیون های متانولی و کلروفرمی و آبی باmic:500 mg/ml (40mg/µl) می باشد. در سال 2004 مطالعه ای روی گونه ای به نام n.crispa انجام شد و مشخص شد که بخش هوایی این گیاه دارای اثرات ضد باکتریال علیه باکتری های گرم مثبت بوده است (25). بطور مشابه در این مطالعه نیز اثر ضد میکروبی علیه برخی از باکتری های گرم مثبت مثل استافیلوکوک اورئوس و باسیلوس سوبتیلیس دیده شد. در مطالعه ای در سال 2012 مشخص شد که عصاره استونی n.cilaris علیه سودوموناس آئروژینوزا موثر بوده است. اگرچه که در مطالعه عصاره استونی بررسی نشده ولی عصاره تام و خصوصاً فراکسیون های کلروفرمی، متانولی و آبی بخش هوایی گیاه علیه سودوموناس آئروژینوزا با mic:500,1000 mg/ml بسیار موثر بوده است. این گونه می توان نتیجه گیری کردکه عصاره تام و کلروفرمی علیه 3 باکتری گرم منفی سودوموناس آئروژینوزا، اشریشیا کلی و سالمونلا تایفی و فراکسیون متانولی و آبی علیه 2 باکتری گرم منفی سودوموناس آئروژینوزا و اشریشیا کلی در مقایسه با شاهد آنتی بیوتیک اثر آنتی باکتریال خوبی داشته و در صورت اثبات عدم اثر سایتوتوکسیتی عصاره ها می توان از آن به عنوان داروی گیاهی استفاده نمود. در مورد عدم مشاهده هاله عدم رشد در روش چاهک پلیت می توان این گونه متصور شد که عصاره تام و فراکسیون های آن انتشار خوبی در محیط کشت جامد مولر هینتون آگار نداشتند و با توجه به پایان نامه ای که توسط لین. جی در سال 2011 در زمینه اثرات ضد باکتریایی کیتوزان نوشته شده و در آن روش های مختلف بررسی این اثرات مورد مطالعه قرار گرفته است، عدم انتشار عصاره بر روی محیط کشت جامد، منطقی به نظر می رسد و باید از روش های برخورد مستقیم عصاره و میکروب استفاده نمود.

با توجه به مقاومت باکتری ها نسبت به آنتی بیوتیک ها و نیاز روزافزون انسان به استفاده از گیاهان دارویی برای کنترل بیماری¬ها بررسی¬های بیشتر گیاهان مورد توجه محققین قرار گرفتند. لذا هدف از این تحقیق بررسی اثر ضد میکروبی عصاره تام و فراکسیون¬های کلروفرمی اتیل استاتی متانولی و آبی حاصل از بخش هوایی گیاه مریم گلی مصری علیه 5 سوش باکتریایی و یک سوش قارچی بود. گیاه salvia aegyptiaca از گیاهان اندمیک ایران است. این گیاه از خانواده lamiaceae می¬باشد که در اردیبهشت ماه 1391 از بندرعباس جمع آوری گردید، عصاره¬گیری سر شاخه¬های هوایی با متانول به روش پرکولاسیون انجام گردید و فراکسیون¬های کلروفرمی، اتیل استاتی، متانولی و آبی آن به روش liquid-liquid fractionation تهیه شد. اثر آنتی باکتریال در غلظت¬های (80 mg/µl) 1000، (40 mg/µl) 500، (20mg/µl) 250، (10 mg/µl) 125 میلی¬گرم/ میلی¬لیتر برای عصاره تام و فراکسیون¬های کلروفرمی، متانولی و آبی علیه سه باکتری گرم مثبت: استافیلوکوکوس اورئوس (ptcc 1431)، استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس ( (ptcc 1435 باسیلوس سرئوس (ptcc 1015) و دو باکتری گرم منفی: اشرشیاکلای (ptcc 1399)، سودوموناس آئروژینوزا (ptcc 1430) و قارچ کاندیدا آلبیکنس(ptcc 5027) توسط روش چاهک پلیت بررسی شد. در این مطالعه عصاره تام بر روی باکتری¬های سودوموناس آئروژینوزا، استافیلوکوکوس اورئوس، باسیلوس سرئوس موثر بود اما بیشترین اثر را روی سودوموناس آئروژینوزا در غلظت (40 mg/µl) 500 میلی¬گرم بر میلی¬لیتر (33/11 میلی¬متر) داشت. فراکسیون کلروفرمی بر روی سودوموناس آئروژینوزا در غلظت (40 mg/µl) 500 میلی¬گرم بر میلی¬لیتر، (33/17 میلی متر) اثر داشت. فراکسیون متانولی بر روی سودوموناس آئروژینوزا و باسیلوس سرئوس موثر بود، اما بیشترین اثر را روی باسیلوس سرئوس در غلظت (10 mg/µl) 125 میلی¬گرم بر میلی¬لیتر (33/11 میلی¬متر) داشت. فراکسیون آبی بر روی باکتری¬های استافیلوکوکوس اورئوس و باسیلوس سرئوس موثر بود اما بیشترین اثر را روی استافیلوکوکوس اورئوس در غلظت (80 mg/µl) 1000 میلی¬گرم بر میلی¬لیتر، (12 میلی متر) داشت. mic (حداقل غلظت نهایی) برای عصاره تام که اثر ضد باکتری بر روی باکتری¬های استافیلوکوکوس اورئوس (mic: 250 mg/ml)، سودوموناس آئروژینوزا (mic:1000 mg/ml)، فراکسیون کلروفرمی بر روی سودوموناس آئروژینوزاmic: 1000 mg/ml (، استافیلوکوکوس اورئوس (mic: 1000 mg/ml)، باسیلوس سرئوس (mic:1000 mg/ml)، قارچ کاندیداآلبیکنس (mic:500 mg/ml)، فراکسیون متانولی بر روی سودوموناس آئروژینوزا (mic:500 mg/ml)، استافیلوکوکوس اورئوس (mic:500 mg/ml)، باسیلوس سرئوس (mic:125 mg/ml)، استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس (mic:500mg/ml)، اشریشیاکلای(mic:1000 mg/ml) و فراکسیون آبی برروی سودوموناس آئروژینوزا (mic:500 mg/ml)، استافیلوکوکوس اورئوس (mic:1000 mg/ml) باسیلوس سرئوس (mic:1000 mg/ml) ، استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس(mic:1000 mg/ml)، اشریشیاکلای(mic:500 mg/ml) با متد میکرودیلوشن داشت.

همواره استفاده از گیاهان دارویی در پزشکی از اهمیت خاصی برخوردار بوده است. با توجه به پیدایش باکتری های مقاوم به بسیاری از آنتی بیوتیک ها، استفاده از گیاهان دارویی می تواند نگاه تازه ای به درمان و پیشگیری باشد. با توجه به اثرات ضد میکروبیturmeric (curcuma longa), ginger (zigebir officinale roscoe) borage (echium amonenum بر روی باکتری های گرم منفی و مثبت در مطالعات قبلی بر آن شدیم تا اثرات همین گیاهان را بر سویه های acinetibacter baumannii مقاوم جدا شده از نمونه های جدا شده از سوختگی بیمارستان مطهری بررسی کنیم. برای این بررسی از روش های دیسک دیفیوژن و میکرودیلوشن برای تعیین mic بر اساس روش clsi 2012 استفاده شد. برای شاهد از آنتی بیوتیک ایمیپنم استفاده شد. acintobacter baumanii یک باسیل گرم منفی مقاوم به انواع آنتی بیوتیک ها می باشد و یکی از سخت ترین باکتری ها در کنترل و درمان می باشد. عفونت با acinetonacter baumannii در مراکز درمانی خود را به صورت عفونت خونی، پنومونیا، عفونت مجاری ادراری و عفونت زخم نشان می دهد. این باکتری به سرعت به آنتی بیوتیک های موجود از خود مقاومت نشان داده و در حال حاضر به معظلی جدی در درمان تبدیل شده است. در این تحقیق عصاره متانولی گیاهان turmeric (curcuma longa) ginger(zigebir officinale roscoe) borage (echium amonenum اثر آنتی باکتریال قابل توجهی بر روی اسینتوباکتر بومانی از خود به تنهایی و مخلوط نشان دادند و نسبت به آنتی بیوتیک ایمیپنم که آنتی بیوتیک انتخابی در مراکز درمانی می باشد به شدت مقاومت از خود نشان دادند.

سابقه و هدف: امروزه عفونت با هلیکوباکترپیلوری یک مشکل جهانی است. با توجه به مقاومت ا?نتی بیوتیکی این باکتری، نیاز جدی به درمانهای جایگزین و یا موادی که مقاومت به ا?نتی بیوتیکها را کم کنند، احساس میشود. هدف ازاین مطالعه بررسی خواص ضد میکروبی و جلوگیری کننده از مقاومت ا?نتی بیوتیکی عصاره هیدروالکلی و استونی پوست و غلاف انار بر علیه هلیکوباکترپیلوری میباشد. مواد و روش ها: عصاره ی استونی و هیدروالکلی به روش خیساندن تهیه شد. جامعه مورد مطالعه را 60 نفر از بیمارن مبتلا به گاستریت که فاقد بیماری های بدخیم، دیابت و ضعف سیستم ایمنی باشند تشکیل می دهد. در این بررسی نمونه های حاصل از بیوپسی های معده افراد مبتلا به گاستریت از بیمارستان طالقانی طی یک دوره 5 ماهه جمع آوری گردید. پزشک متخصص از طریق آندوسکوپی 2 نمونه بیوپسی از بیمار گرفته شد، این نمونه ( نمونه ای که درون محیط اوره قرار نگرفته ) پس از تایید تست اوره آز مثبت فوری در داخل محیط نرمال سالین در داخل کولد باکس ( در شرایط دمایی 4 درجه ) و زمان کمتر از 2 ساعت به آزمایشگاه فرستاده شدند . سپس این بیوپسی ها در بروسلا آگار کشت داده شد و در انکوباتور در دمای 37 درجه وگاز پک c قرار گرفتند و نتایج بعد از 3-5 روز بررسی شدند . که پس از مشاهده کلونی ، رنگ آمیزی گرم انجام یافت و بعد از تعیین نوع باکتری ها، حساسیت و مقاومت نمونه در برابر دیسک استاندارد آنتی بیوتیک های سنتتیک بررسی گردید آزمایش آنتی بیوگرام جهت تعیین حساسیت و مقاومت باکتریایی به عصاره پوست و غلاف انار و آنتی بیوتیک های رایج سنتتیک به روش disc diffusion agar و mic انجام گرفت. در این تحقیقات علاوه بر بررسی اثرات ضد میکروبی عصاره های تهیه شده بر نمونه های هلیکوباکتر پیلوری بر روی سایر پاتوژن های بدست آمده از نمونه بیماران از جمله استاف ساپروفیتیکوس ، استاف اپیدرمیس ، سالمونلا ، سودوموناس آئروژینوزا ، انتروکوک فکالیس ، کلبسیلا ، استرپ بتا همولیتیک b ، اشرشیاکولای واستاف ارئوس نیز بررسی انجام شد. یافته ها: عصاره پوست و غلاف انار نسبت به آموکسی سیلین می تواند اثر بهتری روی باکتری های ایجاد کننده عفونت های گوارشی علی الخصوص هلیکوباکترپیلوری داشته باشد. عصاره استونی اثر بهتری نسبت به هیدروالکلی بر روی اغلب باکتری های پاتوژن دارد و اختلاف معنی دار است. عصاره استونی و هیدروالکلی در نمونه های هلیکوباکترپیلوری حساس به کلاریترومایسین اثر بخشی مشابهی نسبت به کلاریترومایسین داشتند و در نمونه های مقاوم به کلاریترومایسین اثر بخش نبودند. نتیجه گیری: استفاده عصاره پوست و غلاف انار اثرات مشابه با کلاریترومایسین بر روی هلیکوباکترپیلوری داشته باشد و می تواند از آموکسی سیلین قوی تر عمل کند. اثر بخشی این دو عصاره در برابر سایر پاتوژن ها اغلب قوی تر از آموکسی سیلین و سیپرو فلوکساسین بوده است. با مقایسه اثر عصاره استونی و هیدروالکلی به این نتیجه می توان رسید که در اکثر سویه های هلیکوباکتر پیلوری حساس به عصاره پوست و غلاف انار, عصاره استونی اثر بخشی مشابهی نسبت به هیدروالکلی دارد.

با توجه به بروز مقاومت باکتری ها در برابر آنتی بیوتیک ها و همچنین عوارض جانبی مختلف داروهای شیمیایی، دستیابی به ترکیبات ضد باکتریایی جدید ضروری می باشد. در مطالعه قبلی اثر آنتی باکتریال عصاره تام متانولی و فراکشن های آلکالوئیدی این گیاه بر سویه استاندارد استافیلوکوک بررسی و مشخص شد که فقظ عصاره ی آلکالوییدی بر علیه این گروه از باکتری اثر آنتی باکتریال قابل توجهی داشته است. لذا در این تحقیق بر آن شدیم تا اثر عصاره تام اتیل استاتی و آلکالوئیدی بخش گلدار گیاه glaucium vitellinum را بر گونه های استافیلوکوک که از نمونه های مختلف بیماران بیمارستان سینا جمع آوری شده اند،به روش mic بررسی نمائیم. g.vitellinum یکی از گیاهان تیره خشخاش papaveraceae می باشد که در اردیبهشت ماه سال 1392 از خوانسار جمع آوری و بعد از شناسایی علمی ، بخش هوایی گلدار آن خشک و پودر شده و عصاره تام متانولی آن به روش پرکولاسیون تهیه گردید . فراکنش آلکالوئیدی آن که حاوی تمام آلکالوئیدهای موجود در گیاه بود از عصاره تام متانولی جدا شده و عصاره تام اتیل استاتی آن به روش پرکولاسیون تهیه گردید تا اثر آنتی باکتریال آنها بر روی سویه های استاندارد استافیلوکوک اورئوس (ptcc1431) و استافیلوکوک اپیدرمیدیس (ptcc1435) و 100 نمونه ی بالینی استافیلوکوک که از نمونه های مختلف بیماران جدا شده بود با تعیین حداقل غلظت مهاری (mic) با روش میکرودایلوشن طبق پروتکل 2014 تعیین گردید. نتایج: میانگین mic فراکشن آلکالوئیدی g.vitellinum علیه اورئوس 17/87 (میلی گرم/ میلی لیتر) و علیه استافیلوکوک اپیدرمیدیس و سایر گونه ها 23/21 (میلی گرم/ میلی لیتر) و میانگین mic عصاره تام اتیل استاتیg.vitellinum علیه استافیلوکوک اورئوس 73/25 (میلی گرم/ میلی لیتر) و علیه استافیلوکوک اپیدرمیدیس و سایر گونه ها 98/21 (میلی گرم/ میلی لیتر) بود. نتیجه گیری: با توجه به نتایج چشمگیر بدست آمده در این مطالعه انجام سایر تست های و in vitro in vivo در مطالعات بعدی پیشنهاد می گردد.