نام پژوهشگر: کبری زاله سمنگانی

بررسی اثر وانادیوم درمحلول انجماد شیشه ای بر رشد آزمایشگاهی فولیکولهای بدست آمده از تخمدان منجمد - ذوب موش
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه رازی - دانشکده علوم 1392
  کبری زاله سمنگانی   مهری آزادبخت

انجماد بافت تخمدان روش مناسبی جهت حفظ باروری در افرادی است که به دلیل داشتن سرطان تحت شیمی درمانی و پرتو درمانی قرار می گیرند. از زمان ارائه روش های انجمادی تا کنون تلاش های زیادی به منظور بهبود شرایط انجماد صورت گرفته، در مطالعات مختلف تأثیر روش ها و محیط های مختلف انجماد بر روی تخمک، جنین و بافت تخمدان مورد ارزیابی قرار گرفته، با این وجود بهترین محیط انجماد معرفی نشده است، لذا معرفی محیط مناسب انجماد بسیار ضروری به نظر می رسد. گزارشات زیادی در مورد افزودن موادی همچون کلسیم، آسکوربات و آنتی اکسیدان ها به محیط انجماد وجود دارد. مطالعات نشان داده مواد معدنی نقش مهمی در بلوغ آزمایشگاهی تخمک و رشد بعدی جنین دارند. یکی از این مواد معدنی وانادیوم است، که به عنوان یک عنصر کمیاب برای عملکرد سلولی نرمال و تکوین مهم می باشد. بهترین کاربرد اثبات شده وانادیوم استفاده به عنوان یک تقلید کننده انسولین است. وانادیم مانند انسولین رفتار آنزیم ها را تحت تاثیر قرار داده و فعالیت فاکتورهای رشد را تقلید و تنظیم می کند. در این مطالعه اثر وانادیوم در محلول انجماد شیشه ای بر رشد فولیکول های به دست آمده از تخمدان منجمد شیشه ای-ذوب موش بررسی شد. در این تحقیق تخمدان های موش های نژاد nmri با رده سنی4-2 هفته به طور تصادفی در گروه های منجمد نشده و منجمد شیشه ای-ذوب با افزودن غلظت های مختلف(100,10,0 و 250 میکرو مولار) آمونیوم متا وانادات تقسیم بندی شدند. تخمدان ها در گروه های منجمد شیشه ای به طور متوالی در محلول های پیش تیمار) dmso وeg 5/7 درصد در محلول پایه ?-mem و fbs 10درصد) به مدت 7دقیقه و محلول انجماد شیشه ای (dmso 15 درصد،eg 15 درصد و سوکروز 0/5 مولار در محلول پایه α-mem و fbs10 درصد) به مدت 3 دقیقه غوطه ور شده، در نی انجمادی قرار گرفته و به مدت یک هفته در تانک نیتروژن مایع نگهداری شدند. پس از یک هفته تخمدان ها در دمای 37 درجه سانتی گراد در غلظت های نزولی1,0/5,0/25 مولار سوکروز ذوب شدند و سپس مورد بررسی بافت شناسی قرار گرفتند. فولیکول های پره آنترال با قطر 130-100 میکرومتر به روش مکانیکی از تخمدان های گروه های مورد مطالعه جدا شده و به مدت 9 روز کشت داده شدند همچنین تخمک های نابالغ گرفته شده از تخمدان ها نیز به مدت 24 ساعت در محیط بلوغ قرار گرفتند. سپس بقای فولیکول ها در ابتدای کشت، رشد فولیکول ها، بقا پس از کشت، میزان زنده ماندن تخمک ها و درصد بلوغ آن ها مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج به دست آمده نشان داد که حضور آمونیوم متا وانادات در محلول انجماد موثر بوده و می تواند اثرات آسیب زای انجماد را بر بافت تخمدان کاهش دهد. به علاوه میزان بقای فولیکول ها، رشد فولیکول ها، میزان زنده ماندن تخمک ها و درصد بلوغ آن ها در حضور غلظت 100 میکرو مولار آمونیوم متاوانادات نسبت به دیگر گروه های منجمد شیشه ای شده بهتر بود، ولی این مقادیر از گروه منجمد نشده کمتر بود(anova,p-value<0.5).