بیماری هموفیلی a یک بیماری مغلوب وابسته به کروموزوم جنسی است که با خونریزی غیرکنترل شونده مشخص می شود. ابتلا به این بیماری در اثر وجود انواع جهش در ژن عامل هشت انعقادی بروز می کند. حذف ، اضافه شدن ، مضاعف شدن و مهمترین آنها یعنی جهش معکوس ، که در حدود نیمی (45%) از بیماران مبتلا به نوع شدید هموفیل a را به خود اختصاص می دهد، را در بر می گیرد و موجبات بروز بیماری هموفیلی a با شدت و ضعف متفاوت را فراهم می آورد. در این تحقیق به منظور شناسایی جهش معکوس در اینترون 22 ژن عامل هشت، ، افراد مبتلا به هموفیلی a مورد بررسی قرار داده شدند. این بیماران به تعداد 21 نفر به مرکز درمان جامع کودکان هموفیلی ایران مراجعه کرده بودند تا در این بیماران جهش 22inv مورد شناسایی قرار گیرد. از افراد مبتلا به روش مناسب نمونه خون دریافت شد و پس از استخراج dna با استفاده از تکنیک های نوین مولکولی این جهش شناسایی گردید. ابتدا با استفاده از روش inverse pcr متداول در آزمایشگاه مرکز فوق نمونه ها مورد آنالیز قرار گرفتند ، سپس با استفاده از تکنیک real time pcr این روش برای اولین بار ارتقا و با کیفیت بهتر و سریعتری قادر به شناسائی جهش مذکور گردید . در نهایت برای رسیدن به روش آنالیز سریع ، مطمئن و قابل دسترس با ضریب اطمینان بالا از long range pcr استفاده گردید . با بهینه سازی این روش ها و تائید چند باره صحت وجود جهش در 11 بیمار از 21 هموفیل مبتلا به نوع a آن ، با فراوانی بالای جهش (52%) که خود نشان دهنده اهمیت وجود این جهش در میان بیماران هموفیل ایرانی است، نشانگر این مطلب مهم نیز می باشد که می توان در اولین اقدام برای شناسائی سریع ، دقیق و کم خرج جهش معکوس 22inv از روش long range pcr و کیت های رایج و قابل دسترس آن ( تجربه این مطالعه کیت ویژه تاکارا را پیشنهاد می کند) استفاده نمود و برای تائید نهائی در مواردی از نمونه هایی که بهر دلیل جواب روشنی نداده اند از روش بهینه و ارتقاء یافته inverse pcr استفاده نمود.