نام پژوهشگر: خدایار ایسپره

افزایش فعالیت آنزیم سلولازی در موتانت های قارچ t.reesei به روش القای موتاسیون فیزیکی و شیمیایی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان البرز - دانشکده کشاورزی 1392
  خدایار ایسپره   محمدعلی ابراهیمی

کاهش پیوسته ی منابع سوخت فسیلی و افزایش پیوسته ی بهای سوخت موجب تلاش های گسترده برای دست یابی به سوخت های جایگزین شده است. اگر بتوان با بهینه سازی هر چه بیشتر فرایندهای تولید، از سوخت های جایگزینی مانند اتانول استفاده کرد می توان امیدوار بود که مشکل انرژی تا اندازه ی زیادی حل شود. برای نیل به این هدف، موثرترین راهکار تجزیه سلولز با استفاده از کمپلکس سلولاز است.سلولز از زنجیره های بلند مولکول های گلوکز تشکیل شده که در فرآیند هیدرولیز، این زنجیره ها گسسته می شوند تا قند را آزاد کنند. سلولازها گستره ی وسیعی از کاربرد را در صنعت(تولید بیواتانول) و کشاورزی(مکمل خوراک دام) دارا می باشند. یکی از بزرگترین مشکلات و موانع استفاده ی تجاری و گسترده از آنزیم سلولاز، بهای آن است.یکی از راهکارهای عمدهبرای کاهش بهای آنزیم، تولید آنزیم های بهینه می باشد.میزان تولید آنزیمهای سلولازی در قارچ تریکودرما ریسئی زیاد بوده و برای اهداف تجاری نیز عمدتاً از آن استفاده شده است. در این پژوهش که با هدف افزایش فعالیت سلولاز در قارچ تریکودرما ریسئی با روش القای موتاسیون شیمیایی(با موتاژن ems)، و فیزیکی(اشعه گاما و فرابنفش) صورت گرفت، ارزیابی کیفی موتانت های حاصل توسط آزمون مندلز، و القای تولید آنزیم به منظور ارزیابی کمی در محیط های کشت اصلاح شده تریکودرما انجام شد. میزان تولید پروتئین و فعالیت ویژه ی آنزیم سلولاز در همه ی موتانت ها اندازه گیری و پروفایل پروتئینی با ژل sds-page بررسی شد. آنالیز نتایج این آزمایشات نشان داد که تیمار های جهش زایی شیمیایی(ems)، فیزیکی(اشعه گاما) و تلفیقی(اشعه گاما و ems) در افزایش تولید آنزیم سلولاز در قارچ تریکودرما موفقیت آمیز بوده و به ترتیب سه جدایه ی tr.c6، tr.m21، وdm7(21) انتخاب شد که میزان پروتئین و فعالیت سلولازی آنها نسبت به جدایه ی والدی افزایش یافته بود.