سرطان مثانه یکی از انواع بدخیمی های مجاری ادراری است که شیوع آن در مردان 4 برابر بیشتر از زنان می باشد و تشخیص زودهنگام آن در درمان موثر و کنترل بیماری نقش بسزایی دارد. روش های تشخیصی که بر اساس شناسایی آنتی ژن های محلول رها شده در نمونه ادرار هستند، می توانند جایگزین روش های شناسایی تهاجمی شده و همچنین میزان اختصاصیت و حساسیت بالاتری از خود نشان دهند. nmp22 بخشی از پروتئین های اسکلت هسته ای می باشد و نقش مهمی در مکانیسم همانندسازی dna، رونویسی، پردازش rna و تنظیم بیان ژن دارد. این پروتئین پس از آپوپتوز سلول، به ادرار رها شده و غلظت آن در ادرار افراد مبتلا به سرطان مثانه 20 تا 80 برابر بیشتر از نمونه های افراد سالم می باشد. در این مطالعه، پروتئین نوترکیب nmp22 دارای نواحی آنتی ژنیک به منظور ایجاد پاسخ ایمنی در مدل حیوانی طراحی، بیان و تخلیص شد. مواد و روش ها: توالی ژنتیکی پروتئین مورد نظر از پایگاه اطلاعاتی genbank برداشته شد و نواحی اپیتوپی آن بر اساس مقالات و همچنین با استفاده از پایگاه های اطلاعاتی پروتئین انتخاب شده و 300 آمینواسید انتخابی برای بیان در میزبان e.coli سویه bl21 بهینه شده و برای سنتز به شرکتgenscript سفارش داده شد. این قطعه در وکتور بیانی pgs21a دارای دنباله هیستیدینی دریافت شد و به باکتری مستعد bl21a انتقال داده شد و بیان صورت گرفت. sds-page انجام شد . وسترن بلاتینگ جهت تایید بیان و همچنین الایزا جهت بررسی واکنش با آنتی بادی تجاری انجام شد . آنتی ژن تخلیص شده به منظور تولید آنتی بادی پلی کلونال به حیوان تزریق شد. یافته ها: پروتئین مورد نظر به خوبی بیان شده و باند63 کیلودالتونی با استفاده از sds-page مشاهده شد در حالیکه نمونه های القا نشده و باکتری بدون پلاسمید فاقد باند در ناحیه موردنظر بود. وسترن بلاتینگ با استفاده از anti-his tag بیان پروتئین را تایید کرد. الایزا نیز واکنش اختصاصی آنتی ژن و آنتی بادی تجاری anti-numa را در مقابل نمونه کنترل منفی نشان داد .پس از تزریق به حیوان، آنتی بادی پلی کلونال ضد t-numa با تیتر مناسب حاصل شد. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب t-numa می تواند به عنوان یک کاندید مناسب جهت طراحی ابزار تشخیصی برای سرطان مثانه با استفاده از نمونه ادرار مورد استفاده قرار بگیرد. کلمات کلیدی: سرطان مثانه، پروتئین نوترکیب، t-numa