نام پژوهشگر: الهه زاده حسینقلی

نمایش باکتریائی فاکتورهای بیماریزای bapو فسفولیپاز d ازacinetobacter baumannii بر روی باکتری lactococcus lactis
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه 1393
  الهه زاده حسینقلی   لطیف موسوی گرگری

به علت افزایش میزان مقاومت های آنتی بیوتیکی، acinetobacter baumannii یکی از مشکلات سلامت عمومی و تهدید بزرگی برای بیماران بستری در بیمارستان، رفت و آمد کنندگان به بخش مراقبت های ویژه نیروهای نظامی محسوب میشود. ممکن است واکسیناسیون این گروهای خطر وقوع و گسترش عفونت های مرتبط با آن را کاهش دهد. در مطالعه ی حا ضر امکان تحریک سیستم ایمنی خونی و سلولی توسط یکی از فاکتور های بیماریزای این باکتری بنام فسفولیپاز d توسط روشهای بیوانفورماتیکی مورد بررسی قرار گرفت. سپس بعد از تعیین فراوانی ژن pld در بین جدایه های بالینی جمع آوری شده از طریق pcr امکان استفاده از پروتئین نوترکیب pld بعنوان واکسن زیر واحدی در مدل موشی سنجیده شد. در عین حال پروتئین pld و پروتئین مرتبط با بیوفیلم (bap) بر روی باکتری lactococcus lactis نمایش داده شدند و کارائی این باکتریهای نوترکیب به عنوان واکسن خوراکی در مدل موشی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج بررسی های بیوانفورماتیکی پایداری دمائی نیمه عمر طولانی، عدم شباهت به پروتئینهای انسانی و موشی و باکتریهای فلور روده و غیر آلرژی زا بودن پروتئین pld را نشان داد. توالی های اپیتوپی تحریک کننده ی سیستم ایمنی خونی و سلولی نیز در این پرتئین شناسائی شدند. همچنین یک کاندیدای واکسن پپتیدی بر علیه این باکتری و چند باکتری دیگر بیماریزای انسانی معرفی شد. نتایج pcr وجود ژن pld را در همه ی جدایه ها نشان داد. کاندیدای واکسن زیر واحدی pld باعث تولید مقادیر قابل توجهی آنتی بادی بر علیه pld شد. موش های ایمن دریافت کننده ی دوز های کشنده ی108 ، 109و 1010 از باکتری a. baumannii 100% زنده ماندند. در گروه دریافت کننده ی 1011 این میزان به 80% تقلیل یافت. همه موش های غیر ایمن مردند. موش های غیر ایمن در یافت کننده ی 108 و 109باکتری 100% زنده ماندند. این میزان با دریافت 1010و 1011 باکتری یه 60% افت پیدا کرد. موش هایی که به صورت دهانی l. lactis نمایش دهنده ی pld یا bap دریافت کردند نیز افزایش میزان igg را نشان دادند. موش های ایمن شده با باکتری نمایش دهنده ی pld با دریافت 108 و 109باکتری 100% زنده ماندند. . این میزان با دریافت 1010و 1011 باکتری یه ترتیب 80% و 40% بود. موش های ایمن شده با باکتری نمایش دهنده ی bap با دریافت 108،109 و1010باکتری % 100 محافظت شدند. 80% محافظت حاصل استفاده از 1011 باکتری بود. همه موش های کنترل در عرض 24 بعد از چالش مردند. نتایج آزمایشگاهی نشان می دهد هم واکسن نوترکیب و هم واکسنهای خوراکی به طور معنی داری باعث تولید آنتی بادی و حفاظت موش ها از عفونت های حاصل از a. baumannii میشود