نام پژوهشگر: مهوش قربانی

شناسایی گونه های کمپیلوباکتر از مدفوع سگ و گربه های مراجعه کننده به بیمارستان های دام های کوچک تهران
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1391
  مهوش قربانی   محمدرضا محزونیه

چکیده کمپیلوباکتر یکی از عوامل مهم ایجاد گاستروآنتریت درانسان می‏باشد. از آنجا که کمپیلوباکتریوز بیماری مشترک بین انسان و دام محسوب می شود، در بعضی موارد منشأ عفونت برای انسان، حیوانات حامل باکتری می باشند. سگ و گربه‏های آلوده ممکن است بدون علائم بالینی بوده ولی باکتری را از خود دفع می‏نمایند و گاهی هم علائم بالینی (انتریت، اسهال) در آن ها دیده می شود. به همین دلیل تشخیص سریع و دقیق حیوانات آلوده مهم است. هدف این تحقیق تعیین میزان آلودگی به کمپیلوباکتر بوسیله آزمایش pcr در نمونه مدفوع سگ و گربه‏های ارجاعی به بیمارستان‏های دام کوچک شهر تهران، بوده است. در این مطالعه 100 نمونه مدفوع سگ و گربه اهلی در شهر تهران بررسی شد. نمونه‏های مدفوع گرفته شده به آزمایشگاه منتقل و dna از نمونه‏های مذکور استخراج شد. پرایمرهای مورد استفاده، برای جستجوی توالی‏های اختصاصی در ژن‏های16s rrna ، gly a، mapa و lpxa کمپیلوباکتر انتخاب شدند. ابتدا با استفاده از یک جفت پرایمر یونیورسال موارد مثبت که حاوی توالی نوکلئوتیدی خاص جنس کمپیلو باکتر بود، شناسائی و سپس با روش مولتی پلکس pcr (multiplex pcr) تعیین هویت گونه‏ها انجام شد. سپس محصول pcr با الکتروفورز در ژل، آنالیز و پس از رنگ آمیزی با اتیدیوم بروماید باندهای ایجاد شده با دستگاه uv مشاهده شدند. 39 نمونه به عنوان جنس کمپیلوباکتر شناخته شدند.2نمونه متعلق به گونه کمپیلوباکتر ژژونی (campylobacter jejuni) و 11 نمونه کمپیلوباکتر آپسالانسیس(campylobacter upsaliensis) بودند. با آنالیز آماری (spss) به روش مربع کای، نشان داده شد که ابتلاء به کمپیلو باکتر آپسالانسیس در گربه نسبت به سگ بیشتر است (p?0.05). نتایج بررسی نشان داد که می توان از روش pcr به عنوان روش تشخیصی سریع برای شناسایی باکتری های جنس کمپیلوباکتر و گونه‏های متعلق به آن در نمونه مدفوع حیوانات بیمار یا حامل استفاده کرد، بدون اینکه نیازی به کشت میکروبی و استفاده از آنتی بادی‏های متعدد و گرانقیمت باشد. واژگان کلیدی: کمپیلوباکتر، سگ، گربه، تهران، ایران، pcr