هپاتیت b که بوسیله ویروس هپاتیت b ایجاد می شود هنوز هم از زمره معضلات عمده بهداشتی در سراسر جهان به شمار می رود. در ژنوم مخمر pichia pastoris دو کپی از ژن الکل اکسیداز (aox) وجود دارد که aox1و aox2 می باشند پروموتر aox1 در سیستم های بیان pichia جهت تولید پروتیینهای نوترکیب (با استفاده از متانول بعنوان inducer ) استفاده می شود.و ما نیز به منظور بهینه سازی شرایط عملیاتی افزایش بیان پروتئین آنتی ژن سطحی هپاتیت b در فرآیند فرمانتاسیون fed batchبا تغییر شرایط محیط کشت pichia pastoris ، محیط کشت با ترکیب تعریف شده را به داخل فرمانتور وارد شده و استریلیزاسیون در محل برای محیط کشت انجام گردید. ازسوش pichia pastoris که قبلا در ارلن کشت داده شده بود و جمعیت سلولی حدود 7/1 گرم بر لیتر رسیده بود به فرمانتورحاوی محیط کشت طراحی شده وارد شد. که نهایتا با تزریق به موقع متانول خالص به مقدار کافی در فواصل زمانی مشخص جهت تامین کربن لازم و کافی بعنوان خوراک و همچنین تزریق مرتب ویتامین های a وb هر کدام به مقدار 5/12سی سی و تریس المنت به مقدار 5/4سی سی در این فرمانتاسیون که حدودا 109ساعت به طول انجامید و مقدار بیومس تولیدی به میزان مطلوب، تقریبا 480 گرم بر لیتر و میزان hbsag به 185/0 میلی گرم بر لیتر رسید.