شوری یکی از مهمترین عوامل محدود کننده در بیش از 35 درصد زمینهای زراعی است. شناسایی سازوکارهای مولکولی که در پاسخ گیاهان به شوری دخیل است، میتواند به بهبود منابع ژنتیکی در اصلاح گیاهان کمک نماید. نعناع فلفلی یک گیاه دارویی و معطر است که میزان روغنهای ضروری موجود در آن تحت تاثیر عوامل محیطی مختلفی مثل خشکی، شوری و نوع خاک قرار می گیرد. تکنیک cdna-aflp برای شناسایی برخی از ژنهای افتراقی پاسخ دهنده به تنش شوری در گیاه نعناع فلفلی به کار گرفته شد. این آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار و سطوح شوری صفر، 50، 100 و 150 میلی مول در لیتر nacl انجام پذیرفت. 4 ماه پس از کشت، گیاهان برداشت شده و rna بافت گیاه با استفاده از کیت rneasy qiagen استخراج شد. رشته اول cdna با استفاده از آنزیم رونوشت بردار معکوس بر اساس mrna تخلیص شده، ساخته شده و رشته دوم از روی رشته اول با استفاده از آنزیم dna پلیمراز ساخته شد. cdna دو رشته ای با استفاده از آنزیم های برشی psti و taqi هضم شد. تکثیر اولیه قطعات cdna برش یافته صورت پذیرفت و تکثیر ثانویه با استفاده از آغازگرهای انتخابی با دو نوکلئوتید اضافی انجام شد. محصولات pcr بر روی ژل پلی آکریل آمید 5% جداسازی شد و تعداد 63 قطعه دارای بیان افتراقی از ژل بریده شده و dna موجود در ژل پس از استخراج تحت همان شرایط تکثیر ثانویه مجدداً تکثیر شدند. 21 قطعه تکثیر شده در باکتری e.coli و با استفاده از کیت کلون جت همسانه سازی شده و سپس توالی یابی شدند. توالی های حاصل با استفاده از blast x مورد ارزیابی و تحلیل قرار گرفت. 19 قطعه توالی یابی شده با توالی ژنهای شناخته شده در سایر گونه های گیاهی شباهت داشته است که در چندین گروه ژنی شامل انتقال سیگنال مثل فسفولیپازc، سم زدایی رادیکالهای آزاد همچون آهن سوپراکسیددسموتاز، تنظیم ساختار یا تخریب پروتئین مثل بکلین و چاپرونین 60، متابولیسم چون کاردیولیپین سنتاز، حمل و نقل مثل abc-t و پروتئین های دفاعی و مرتبط با تنش در گیاه همچون آدنوزین?5-فسفوسولفات رداکتاز ، طبقه بندی شده اند.12 توالی در بانک جهانی ژن (ncbi) ثبت گشته و شماره های دسترسی به آنها تعلق گرفت.

عوامل محیطی سبب تغییراتی در رشد و نمو گیاهان دارویی و نیز کمیت و کیفیت مواد موثره آنها می شود. شوری خاک یکی از عوامل محدود کننده در کشت گیاهان در بسیاری از نواحی جهان مخصوصا در نواحی خشک و نیمه خشک می باشد.نعناع فلفلی (mentha piperita) یک گیاه دارویی ارزشمند است که به دلیل کاربرد گسترده آن در صنایع مختلف، در سطح وسیعی از مزارع کشت می شود. هدف از اجرای این تحقیق بررسی بیان 2 ژن فسفولیپازc و گلوتامین سنتتاز در پاسخ به تنش شوری در گیاه نعناع فلفلی با استفاده از تکنیک real time pcr بود. آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با 3 تکرار انجام گرفت. تنش شوری در پنج سطح مختلف به میزان 25، 50، 75، 100 و 150 میلی مولارnacl اعمال شد. نمونه برداری از بافت برگ و ریشه انجام گرفت. پس از یک هفته اعمال تنش شوری،الگوی بیان ژن فسفولیپاز cدر بافت برگ نشان داد که در سطح شوری 25 میلی مولار تقریبا 7 برابر افزایش بیان وجود داشت که این افزایش معنی دار بود. بیان این ژن در بافت ریشه نعناع فلفلی پس از یک هفته اعمال تنش، در سطوح شوری 25 و 100 میلی مولار تقریبا 3 برابر و در سطوح 50 و 75 میلی مولار به ترتیب 12 و 14 برابر نسبت به شاهد کاهش یافت.نتایج نشان داد بیشترین میزان بیان ژن فسفولیپازc در بافت برگ یک هفته پس از اعمال سطح شوری 25 میلی مولار بود در حالی کهکمترین میزان بیان این ژن در بافت ریشه و یک هفته پس از اعمال سطح شوری 75 میلی مولار بود. ژن گلوتامین سنتتاز فقط در بافت برگ 24 ساعت پس از اعمال سطح شوری 150 میلی مولار بیان شد و در شاهد و سایر تیمارها بیان نشد. چون هدف آزمایش بررسی الگوی بیان ژن به صورت نسبی بود، دیگر نیازی به real time pcr نبود.