نام پژوهشگر: مینا خوشبخت
مینا خوشبخت محمد مهدی سوهانی
استفاده از اگروباکتریوم تومه فاشینس جهت انتقال ژن به مرکبات از روش های رایج و معمول است. ترانسفورماسیون قطعات از طریق اگروباکتریومی انجام می شود که درستی اتصال ژن به پلاسمید pfgc5941 و صحت انتقال ژن که به روش شوک حرارتی یا الکتروپوریشن به اگروباکتریوم سویه eha105 به وسیله ی pcr بررسی شد. باکتری ها در محیـط کشت حاوی آنتی بیوتیک در طـول 3 شب کشت داده می شوند. سپس از طـریق همکشت کردن، عمل ترانسفورماسیون اپی کوتیل و هیپوکوتیل نارنج هایی که به مدت 4 هفته در تاریکی رشد کرده اند انجام می شود. نمونه ها در محیطی شامل سطوح هورمونیbap (mg/l 2, 1, 0) و naa ( mg/l5/0, 25/0, 0) قرار گرفتند.اثر شکاف طولی در انتهای ریزنمونه ها، نقش استوسرینگون (0، mm100 و mm200)، هم چنین اثر استفاده از وکیوم و نیز نقش منبع هیدروکربن(گلوکز و ساکارز) بر کارایی ترانسفورماسیون مورد بررسی قرار گرفت. تأیید ترانسفورماسیون با انجام واکنش pcr صورت گرفت و بهترین نتایج در ترکیب هورمونی bap mg/l2 و naa mg/l25/0 از گیاهانی که به روش هم کشتی، تحت تیمار استوسرینگون صفر، همراه با برش طولی و با منبع هیدروکربن گلوکز بودند، مشاهده شد.