نام پژوهشگر: سید عباس شجاع اساداتی

کشت غیر مداوم با تراکم سلولی بالا برای تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب در باکتری اشریشیاکلای و بررسی فرایند خالص سازی محصول
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده مهندسی شیمی 1391
  سید بابک موسوی   سید عباس شجاع اساداتی

فاکتور رشد اپیدرمی انسانی (hegf) یک پلی پپتیدی 53 آمینو اسیدی با وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون است. این فاکتور رشد به دلیل قابلیت تحریک رشد سلول های پوستی کاربرد گسترده ای در درمان زخم های پوستی پیدا کرده و کاربرد آن به عنوان افزودنی در لوازم آرایشی روز به روز در حال افزایش است. در این پژوهش از کشت غیر مداوم با تراکم سلولی بالای باکتری اشریشیاکلای نوترکیب برای تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون سلولی استفاده شد. در کشت غیر مداوم همراه با خوراک دهی، در مدت زمان 22 ساعت وزن خشک سلولی 31 گرم بر لیتر به دست آمد. فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به شکل توده های پروتئینی نامحلول از باکتری نوترکیب اشریشیاکلای نوترکیب جدا شده سپس.توده های پروتئینی نامحلول در بافر تریس حاوی 2 مولار اوره با ph قلیایی و بافر تریس حاوی اوره 8 مولار، حل شده و خالص سازی آن با استفاده از اولترافیلتراسیون با غشاهای سلولز تری استات با برش حذفی 5، 10 و 20 کیلو دالتون بررسی شد. در نهایت برای خالص سازی بیشتر نمونه محلول پروتئینی به دست آمده از مرحله اولترا فیلتراسیون، از کروماتوگرافی صافی ژل استفاده شد.