نام پژوهشگر: ثمین حسینی
ایوب پورحسن خیاوی احمد حسینی
چکیده اسفناج (spinacia oleracea l.) یکی از مهمترین سبزیهای برگی است که به صورت تازه و یا فرآوری شده مصرف میشود و به دلیل داشتن خواص دارویی و مواد غذایی فراوان به صورت گسترده در دنیا کشت و مصرف میشود. گیاه اسفناج همواره تحت تاثیر بیمارگرهای مختلف قارچی، باکتریایی و ویروسی قرار میگیرد. در نمونهبرداریهای صورت گرفته از مزارع منطقه داوران شهرستان رفسنجان در سال1390، مجموعاً 177 نمونه از گیاهان اسفناج مشکوک به آلودگی ویروسی با علایم زردی، چروکیدگی، بد شکلی و سبز زردی جمع آوری گردید. با استفاده از روش داس الیزا آلودگی 77 نمونه و در مجموع 5/43 درصد از بوتههای اسفناج دارای علایم ویروسی به ویروس موزاییک خیار (cmv) مشخص گردید. نتایج آزمون مذکور همچنین نشان داد که هیچ کدام از نمونههای اسفناج، به ویروسهای bcmv، tswv، amv، pvy و ویروسهای جنس potyvirus آلوده نبودهاند. نتایج حاصل از بررسی 33 نمونه از علفهای هرز جمع آوری شده از اطراف مزارع اسفناج نشان داد که به غیر از اسفناجهای خودرو که بهصورت علف هرز اطراف مزارع اسفناج رشد میکنند هیچ کدام از این نمونهها به cmv آلوده نبودند. از میان جدایههای جمعآوری شده cmv، یک جدایهی تحت عنوان spk انتخاب و در گیاه اسفناج تکثیر گردید. آزمون تعیین دامنه میزبانی جدایه ی spk، بر روی تعداد 28 گونه گیاهی انجام و مشخص شد که این جدایه دارای دامنهی میزبانی محدودی میباشد و ویروس فقط در 11 گونه موفق به تکثیر شده است. آزمون بذربردی نشان داد که از 200 بذر تهیه شده از کشاورزان منطقه، پنج نهالبذر (5/2 %) به ویروس cmv آلوده بودند. شته aphis gossypii جدایهی spk را با کارایی 80 درصد منتقل کرد. استخراج rna کل این جدایه با استفاده از محلول تجاری rnx-plus، با موفقیت انجام شد. آزمون rt-pcr با استفاده از آغازگرهای اختصاصی مربوط به rnaهای اقماری ویروس cmv نشان داد که جدایهی spk فاقد rna اقماری میباشد. استفاده از جفت پرایمر cmvcpf و cmvcpr در آزمون rt-pcr منجر به تکثیر یک قطعه 870 جفت بازی شامل ژن پروتئین پوششی و نواحی غیر کد کننده دو طرف آن در rna3 جدایه ی spk گردید در حالیکه با استفاده از جفت پرایمر cmv primer 1 و cmv primer در آزمون ic-rt-pcr یک قطعهی حدودا 501 جفت بازی تکثیر شد. آزمون rflp بر روی قطعات تکثیر شده با استفاده از آنزیمهای برشی mspi (hpaii) ، bsuri (haeiii) و ecori انجام شد. نتایج آزمونهای مولکولی rt-pcr، ic-rt-pcr، rflp، توالییابی ژن cp و رسم درخت فیلوژنی علاوه بر تایید مولکولی وجود cmv در گیاه اسفناج ، نشان داد جدایهی spk متعلق به زیر گروه ii ویروس موزاییک خیار میباشد. پژوهش حاضر اولین مطالعه مولکولی و بیولوژیکی بر روی ویروس موزاییک خیار جدا شده از اسفناج از ایران میباشد.
زهره داودی ثمین حسینی
باقلا (vicia faba l.) یکی از حبوبات مهم در ایران و بسیاری از کشورهاست. در میان ویروسهای گزارش شده از روی باقلا، ویروس موزاییک زرد لوبیا (bymv) یکی از معروفترین بیماریهای ویروسی است که دامنه وسیعی از گیاهان را آلوده میکند. این ویروس از خانواده potyviridae و جنس potyvirus است. در این پژوهش، طی نمونه برداریهای انجام شده در سال زراعی 89 و 90، 544 نمونه برگی از مزارع باقلا ی استان های خوزستان و کرمان (به ترتیب شهرستانهای دزفول و جیرفت) و 38 نمونه علف هرز جمع آوری شد. نمونه های جمع آوری شده دارای علایم موزاییک سبز خفیف تا شدید، کوچکی و بدشکلی برگ ها و تعدادی فاقد علایم ویروسی بودند. ابتدا نمونه ها با استفاده از آزمون های سرولوژیکیdas-elisa و tpia و آنتی بادی چندهمسانه ایی bymv و bcmv مورد بررسی قرار گرفتند.